مشکلات واقعی مطالعات آموزشی مدرن. مشکلات واقعی تحقیقات آموزشی
با نوع واکنش های کاتالیز شده، تمام آنزیم های شناخته شده به شش کلاس تقسیم می شوند:
1. اکسید موتوکتاز، واکنش اکسیداسیون کاتالیزوری.
2. هیدرولاز، واکنش های کاتالیزوری از شکاف هیدرولیتیک پیوند های داخل مولکولی در اتصالات مختلف.
3. Transferases، واکنش های کاتالیزوری انتقال بین مولکولی یا داخل مولکولی گروه شیمیایی و باقی مانده ها با انتقال همزمان انرژی که در اوراق قرضه شیمیایی صورت می گیرد.
4. لیگاز ها (Synthetases)، واکنش های کاتالیزوری 2 مولکول ترکیب، ترکیب با تقسیم پیوندهای فیو فسفات ATP یا سایر تریپسفات مشابه.
5. واکنش های واکنش کاتالیزوری واکنش های غیر مغزی یا پیوستن گروه های شیمیایی مختلف ترکیبات آلی برای دوبرابر دوگانه.
6، ایزومراز، واکنش های کاتالیزوری تبدیل ترکیبات آلی به ایزومرهای آنها.
oxidoreductases و هیدرولیزا در خاک گسترده هستند، که در بیودینامیک خاک بسیار مهم هستند.
کاتالاز
(H 2 O 2: H 2 O 2-oxidoreductase)
کاتالاز واکنش تجزیه پراکسید هیدروژن را برای تشکیل آب و اکسیژن مولکولی کاتالیز می کند:
H 2 O 2 + H 2 O 2 O 2 + N 2 O.
پراکسید هیدروژن در فرایند تنفس موجودات زنده تشکیل شده و به عنوان یک نتیجه از واکنش های بیوشیمیایی مختلف اکسیداسیون مواد آلی تشکیل شده است. سمیت پراکسید هیدروژن با واکنش بالا آن تعیین می شود که اکسیژن تک، * O 2 را نشان می دهد. واکنش بالا آن منجر به واکنش های اکسیداسیون کنترل نشده می شود. نقش کاتالیزوری این است که آن را برای ارگانیسم های پراکسید هیدروژن سمی می کند.
کاتالاز در سلول های موجود زنده، از جمله میکروارگانیسم ها و گیاهان گسترده است. فعالیت کاتالاز بالا نیز خاکی نشان داده شده است.
روش های تعیین فعالیت کاتالاز خاک بر مبنای اندازه گیری میزان پوسیدگی پراکسید هیدروژن است، زمانی که آن را با خاک از لحاظ اکسیژن آزاد شده (روش های گازومتریک) یا با مقدار پراکسید های مورد تایید، که توسط تیتراسیون پرمنگناتومتریک یا رنگ سنجی تعیین می شود، با خاک به خاک منتقل می شود روش با تشکیل مجتمع های نقاشی شده.
تحقیق e.v. دنتکو و K.Sh. Casev ثابت شده است که هنگام ذخیره نمونه ها، فعالیت کاتالاز از تمام آنزیم ها به میزان زیاد کاهش می یابد، بنابراین تعریف آن باید در هفته اول پس از نمونه برداری انجام شود.
خاکستر روش گول زدن
دوره تجزیه و تحلیل. برای تعیین فعالیت کاتالاز، دستگاه از دو Burettes شلنگ لاستیکی متصل شده استفاده می شود که با آب پر شده و سطح آن را تعادل می دهند. حفظ سطح آب خاصی در بورت نشان دهنده دستیابی به تعادل دما در دستگاه است. ژاکت (1 گرم) خاک به یکی از جدایی از فلاسک کوتوله منتقل می شود. 5 میلی لیتر از راه حل پراکندگی هیدروژن 3٪ به جدایی دیگر از فلاسک ریخته می شود. فلاسک به شدت با یک لوله لاستیکی با یک لوله شیشه ای بسته شده است که با استفاده از یک شلنگ لاستیکی به معیارهای اندازه گیری متصل می شود.
تجربه در دمای 20 درجه سانتیگراد انجام می شود، زیرا در دمای مختلف، میزان واکنش متفاوت خواهد بود که نتایج را تحریف می کند. در اصل، درجه حرارت مهم نیست، و پراکسید، این است که باید 20 درجه سانتیگراد باشد. اگر دمای هوا به طور قابل توجهی بالاتر از 20 0 ثانیه باشد (در تابستان) توصیه می شود که در زیرزمین یا در یکسان تجزیه و تحلیل کنید اتاق سرد توصیه می شود در چنین مواردی، استفاده از حمام آب با دمای 20 درجه سانتیگراد به طور موثر بعید است.
آغاز تجربه در یک کرونومتر یا ساندویچ در لحظه ای که پراکسید با خاک مخلوط شده است و محتویات لرزش کشتی مخلوط شده است. چشمک زدن مخلوط در طول تجربه تولید می شود، سعی نکنید فلاسک ها را با دست خود لمس کنید، آن را برای پلاگین نگه دارید. اکسیژن آزاد شده آب را از Burette جابجا می کند، سطح آن پس از 1 و 2 دقیقه مشخص شده است. توصیه به تعیین مقدار اکسیژن هر دقیقه به مدت 3 دقیقه به دلیل رونده ی واکنش تجزیه پراکسید تنها باعث افزایش زمان صرف شده در تجزیه و تحلیل می شود.
این تکنیک به یک محقق اجازه می دهد تا فعالیت کاتالاز بیش از 100 نمونه در روز را تجزیه و تحلیل کند. این مناسب برای تجزیه و تحلیل اولین، با استفاده از 5-6 کشتی است. در عین حال، یک نفر به طور مستقیم در تجزیه و تحلیل مشغول به تجزیه و تحلیل سطح بورت است، و دوم به دنبال زمان، داده ها را می نویسد و عروق را شستشو می کند.
کنترل به عنوان استریل شده با گرمای خشک (180 درجه سانتیگراد) خاک است. برخی از خاک ها، ترکیبات و مواد معدنی دارای فعالیت های بالایی از تجزیه کاتالیز های معدنی پراکسید حتی پس از عقیم سازی - تا 30-50٪ کل فعالیت است.
فعالیت کاتالاز در میلی لیتر 2 بیان شده است که در 1 دقیقه 1 گرم خاک منتشر شده است.
معرفها: راه حل 3 درصد H 2 O 2. غلظت perhydras لزوما به صورت دوره ای تایید شده است، راه حل کار بلافاصله قبل از تجزیه و تحلیل آماده می شود. برای ایجاد غلظت perhydron بر مقیاس های تحلیلی در یک فلاسک ابعاد با ظرفیت 100 میلی لیتر وزن 1 گرم 2 O 2، حجم به برچسب و کلاهبرداری تنظیم می شود. 20 میلی لیتر از راه حل حاصل از فلاسک های مخروطی در 250 میلی لیتر (3 تکرار) قرار می گیرد، 50 میلی لیتر آب مقطر و 2 میلی لیتر از 20 درصد H 2 SO 4 اضافه شده است. سپس تثبیت شده 0.1 n. راه حل KMNO 4. 1 میلی لیتر از راه حل KMNO 4 مربوط به 0.0017008 گرم H 2 O 2 است. پس از ایجاد غلظت perhydrol، یک محلول 3 درصد با رقیق کردن با آب مقطر تهیه می شود. راه حل Titer CMNO 4 از Fixanal تهیه شده و چندین روز برای ایجاد تیتر آماده می شود.
dehydrogenase
(Substrate: بیش از (f) -Oxidoreductase).
واکنش های اکسیداسیون Dehydrogenase کاتالیزوری اکسیداسیون را توسط dehydrogenation از مواد آلی کاتالیز می کند. آنها بر روی طرح زیر منتقل می شوند:
2 + در A + VN 2
در خاک، بستر dehydrogenation می تواند ترکیبات آلی غیر اختصاصی (کربوهیدرات، اسیدهای آمینه، الکل ها، چربی ها، فنول ها و غیره) و خاص (مواد هوموس) باشد. دهیدروژناز ها در واکنش های واکنش اکسیداتیو به عنوان حامل های هیدروژن عمل می کنند و به دو گروه تقسیم می شوند: 1) ایروبیک، انتقال هوای هیدروژن هیدروژن بسیج شده؛ 2) بی هوازی، که هیدروژن را به سایر گیرنده ها انتقال می دهد، آنزیم ها.
روش اصلی تشخیص دهيدروژناز، ترميم شاخص هاي با نوع بالقوه پتانسیل ديستوکس ديستوکس است.
برای تعیین فعالیت های هیدروژناز های خاک، نمک های بی رنگ تترازولیا (2،3،5 -5-triphenyltetrazolium chloride - TTX) به عنوان هیدروژن استفاده می شود که به ترکیبات قرمز Formasanov بازسازی می شوند (Triphenyl Formasan - TFF).
دوره تجزیه و تحلیل. تعلیق (1 گرم) خاک آماده شده به طور منظم از طریق قیف در پایین لوله قرار می گیرد و ظرفیت 12 تا 20 میلی لیتر و کاملا مخلوط می شود. 1 میلی لیتر از 0.1 میلی لیتر از محلول بستر Dehydrogenation (گلوکز) و 1 میلی لیتر از راه حل 1 درصد تهیه شده از TTX را اضافه کنید. لوله های تست در یک تحریک کننده آناروستات یا خلاء قرار می گیرند. تعریف در شرایط بی هوازی انجام می شود که در آن هوا با وضوح 10-12 میلی متر هکتار تخلیه می شود. هنر. برای 2-3 دقیقه و یک ترموستات را به مدت 24 ساعت در دمای 30 درجه سانتیگراد قرار دهید. هنگامی که انکوب کردن خاک ها با زیربناها، تولوئن به عنوان یک ضد عفونی کننده اضافه نمی شود، زیرا؛ آن را به شدت مانع اثر دهيدروژناز را مهار می کند. کنترل فشار خاک استریل شده (در 180 درجه سانتیگراد به مدت 3 ساعت) و بستر بدون خاک. پس از انکوباسیون در فلاسک، 10 میلی لیتر اتیل الکل یا استون اضافه کنید، 5 دقیقه لرزش دهید. راه حل نقاشی شده از TFF فیلتر شده و رنگ آمیزی شده است. با یک رنگ بسیار شدید، محلول با الکل (استون) با 2-3 بار رقیق می شود. استفاده از 10 میلیمتر Cuvettes و یک فیلتر نور با طول موج 500-600. مقدار Formasan در MG بر اساس یک منحنی استاندارد (0.1 میلی گرم در هر میلی لیتر) محاسبه می شود. فعالیت دهیدروژناز در 24 ساعت در Mg TTF در 10 گرم خاک بیان می شود. تعریف خطا تا 8٪.
واکنش ها:
1) 1٪ راه حل 2،3،5-triphenylterazolia کلرید؛
2) 0.1 متر محلول گلوکز (18 گرم گلوکز در 1000 میلی لیتر آب مقطر حل می شود)؛
3) الکل اتیل یا استون؛
4) Triphenyl Formasan برای مقیاس استاندارد. برای کامپایل یک منحنی کالیبراسیون، تعدادی از راه حل ها در اتیل الکل، استون یا تولوئن با غلظت Formasan تهیه می شود (از 0.01 تا 0.1 میلی گرم فرمازان در 1 میلی لیتر) و فتوکلاولیکترات، همانطور که در بالا توضیح داده شده است.
در غیاب فرمازان، با ترمیم TTH هیدروسولفیت سدیم (سولفیت آمونیوم، پودر روی در حضور گلوکز) به دست می آید. غلظت اولیه محلول TTX 1 میلی گرم بر میلی لیتر. هیدروسولفیت سدیم کریستال به 2 میلی لیتر از راه حل اولیه TTX در نوک لنست اضافه می شود. رسوب فرماسان توسط 10 میلی لیتر تولوئن حذف می شود. این حجم تولوئن شامل 2 میلی گرم فرمازان (0.2 میلی گرم بر میلی لیتر) است. پرورش بیشتر آماده سازی راه حل های کاری برای مقیاس.
درندهای
(β-fruitfuranosidase، شکر)
این Invertase Carbohydrase است، آن را بر روی پیوند بتا-فروکتورفورانوزیداز در ساکارز، ریفینوز، هندزوز و غیره عمل می کند. فعال ترین این آنزیم هیدرولیز ساکارز با تشکیل قندهای کاهش دهنده - گلوکز و فروکتوز:
درندهای
از 12 N 22 O 11 + N 2 O C 6N 12 O 6 + C 6H 12 O 6
فروکتوز گلیکوز ساکارز
این invertase در طبیعت گسترده است و در تقریبا تمام انواع خاک یافت می شود. فعالیت بسیار بالا invertase در خاک های کوهستانی کوهستانی تشخیص داده شده است. فعالیت invertase به وضوح با محتوای هوموس و باروری خاک همبستگی دارد. توصیه می شود هنگام مطالعه اثر کود برای ارزیابی اثربخشی آنها توصیه شود. روش ها برای تعیین فعالیت invertase خاک بر اساس حسابداری کمی از قندهای بازسازی شده با توجه به Berran و تغییر خواص نوری محلول ساکارز قبل و بعد از قرار گرفتن در معرض آنزیم است. اولین روش را می توان در هنگام مطالعه آنزیم با دامنه بسیار گسترده فعالیت و غلظت بستر استفاده کرد. روشهای قطبی سنجی و فتوکولاوریمتریک بیشتر به تمرکز قندهای و غیر قابل قبول برای خاک های با محتوای بالا نیاز دارند ارگانیک. آلیجایی که راه حل های نقاشی شده به دست می آیند؛ بنابراین، این روش ها به مطالعات خاك محدود می شود.
هدف از این کار تعیین فعالیت بیولوژیکی خاک در حذف های مختلف از جاده ها در چهار سیستم آنزیم است: dehydrogenes، کاتالاز، invertase، urease.
مفاهیم اساسی
روش های آنزیمولوژیک خاک امکان تعیین مقدار غیر کمی از آنزیم ها را می توان تعیین کرد، اما فعالیت آنزیم هایی که عمدتا در حالت جذب شده (immobilized) بر روی سطح کلوئیدهای خاک و تا حدی در محلول خاک قرار دارند.
اصل تعیین فعالیت آنزیم های خاک بر اساس تعداد واکنش های واکنش پردازش شده در طول واکنش یا محصول واکنش حاصل شده تحت شرایط مطلوب دما، pH متوسط \u200b\u200bو غلظت زیربناها است.
آنزیم های مربوط به کلاس واکنش های اکسیداسیون کاتالیزوری اکسیدورتوکتاز که نقش اصلی را در فرایندهای بیوشیمیایی در سلول های موجود زنده، و همچنین در خاک بازی می کنند. رایج ترین اکسیدوکتاز ها مانند کاتالاز و دهیدروژناز، فعالیت آن یک شاخص مهم از پیدایش خاک است.
کاتالاز آب و اکسیژن مولکولی برای سمی برای پراکسید پراکسید سلولی که در فرآیند تنفس موجودات زنده به عنوان یک نتیجه از واکنش های اکسیداسیون بیوشیمیایی های مختلف مواد آلی تشکیل شده است، سمی می کند.
فعالیت کاتالاز با استفاده از روش گازومتریک با حجم اکسیژن انتخاب شده بر اساس اندازه گیری میزان تجزیه پراکسید هیدروژن در طول تعامل آن با خاک تعیین می شود.
دهیدروژناز - آنزیم هایی که در فرآیند تنفسی شرکت می کنند، هیدروژن را از بسترهای اکسید شده صاف می کنند. برخی از dehydrogenases به طور مستقیم بر اکسیژن مولکولی، دیگران - بر روی هر گیرنده، مانند Hainons، Methylene آبی منتقل می شوند.
برای تعیین فعالیت دهیدروژناز به عنوان یک گیرنده هیدروژن، نمک های بی رنگ تترازولیا (2،3،5 -5 -5-triphenyltetrazolium کلرید (TTX) استفاده می شود که به ترکیبات قرمز Formasan (Triphenyl Formasan (TFF) بازگردانده می شوند.
هیدرولیزاسیون واکنش های هیدرولیز ترکیبات مختلف ترکیبات آلی پیچیده را انجام می دهد، که بر روی اتصالات مختلف عمل می کند: استر پیچیده، آمید گلوکوزید، پپتید و غیره به این کلاس شامل آنزیم های آنزیم های Invertase، UREASE و غیره است که فعالیت آن یک شاخص مهم از فعالیت بیولوژیکی خاک است به طور گسترده ای برای ارزیابی اثرات انسان شناسی استفاده می شود..
این Invertase بر روی پیوند P-fructufuranosidal در ساکارز، رازینین، استاخویوه عمل می کند و تقسیم ساکارز را بر مقدار مقادیر equimolar گلوکز و فروکتوز تولید می کند.
تعيين فوتوكولوژيمتري فعاليت invertase براساس حسابداری بازسازي قندهاي ايجاد شده در حين تقسيم ساکارز براي تشخيص قندهاي بازيابي شده است.
تجزیه ترکیبات نیتروژن آلی با مشارکت مستقیم آنزیم های خارج سلولی انجام می شود. آمونیاک تشکیل شده در طول فعالیت اورهاز به عنوان منبع تغذیه گیاهی عمل می کند.
اوره هیدرولیز اوره کاتالیز می شود. محصولات هیدرولیز نهایی آمونیاک و دی اکسید کربن هستند. اوره به عنوان بخشی از بقایای گیاهی، کود و کود نیتروژن به خاک می افتد؛ این نیز در خاک خود به عنوان یک محصول متوسط \u200b\u200bدر فرآیند تبدیل ترکیبات آلی نیتروژنیک - پروتئین ها و اسیدهای نوکلئیک تشکیل شده است.
تعیین فعالیت کاتالاز
تجهیزات و معرفها:
سیستم برای گاز سنجی (شکل 8)؛ راه حل 10٪ H 2 O 2؛ saco er
شکل. 8 - نصب برای تعیین گاز سنجی فعالیت کاتالاز در نمونه های خاک:
1 - فلاسک، 2 - بورت، 3 - آداپتور، 4 - گلابی با آب
روش انجام کار
1. سمت خاک خاردار 1 گرم اضافه کردن به فلاسک در 100 سانتی متر 3، اضافه کردن 0.5 گرم از Casso 3.
2. به پایین با دقت با یک tweezet، یک فنجان کوچک با 1.7 سانتی متر 3 10٪ از محلول پراکسید هیدروژن قرار دهید.
3. نمونه خاک MOOF 4 سانتی متر 3 آب مقطر.
4. فلاسک به شدت لوله لاستیکی را با یک لوله متصل به یک برش لاستیکی ضخیم دیجیتال متصل می کند از طریق یک TEE مجهز به یک گیره. بورت با یک گلابی ارتباط برقرار می کند. بورت و گلابی با آب پر می شوند. سطح آب در آنها تعادل است و گلابی در ارتفاع مشخص ثابت می شود.
5. شروع تجربه در یک کرونومتر در زمانی که عروق با پراکسید هیدروژن لغو می شود و به دنبال آن، محتویات فلاسک را لرزاند. چشمک زدن مخلوط باید در هر زمان تجربه ادامه یابد، بدون دست زدن به پایین فلاسک به طور مستقیم. اکسیژن تخلیه آب را از بورت جابجا می کند، سطح آن اشاره شده است.
6. مقدار اکسیژن مولکولی برجسته شده به مدت 1 دقیقه در دمای 18-20 درجه سانتیگراد در نظر گرفته شده است.
7. فعالیت کاتالاز در حجم (cm 3) اکسیژن بیان شده توسط 1 گرم خاک در دقیقه بیان شده است. تعریف خطا تا 5٪.
8. روش های مشابه برای انجام با تمام نمونه های خاک.
9. جدول 15 درجه اشباع خاک کاتالاز را ارزیابی کنید .
جدول 15 ‑ مقیاس برای ارزیابی میزان غنی سازی آنزیم های خاک
| درجه غنی سازی خاک | کاتالاز، 2 سانتیمتر 3 / گرم در هر 1 دقیقه | Dehydrogenase، Mg TFF به مدت 10 ساعت به مدت 24 ساعت | Invertase، Mg گلوکز در هر 1 گرم در 24 ساعت | اورهزا، Mg NH 4، 10 گرم به مدت 24 ساعت | phospotase، mg p 2 o 3 در هر 10 گرم در هر ساعت 1 ساعت |
| خیلی فقیر | < 1 | <1 | <5 | <3 | <0,5 |
| فقیر | 1-3 | 1-3 | 5-15 | 3-10 | 0,5-1,5 |
| میانگین | 3-10 | 3-10 | 15-50 | 10-30 | 1,5-5,0 |
| ثروتمند | 10-30 | 10-30 | 50-150 | 30-100 | 5-15 |
| بسیار غنی | >30 | >30 | > 150 | > 100 | > 15 |
تعریف فعالیت Dehydroginase
دستگاه ها، ظروف، معرفها:
فوتوکولور سنج کاغذ نقشه کشی؛ 0.1 متر محلول گلوکز؛ 1٪ محلول 2،3،5-triphenylterazolia کلرید (TTX)؛ Saso 3؛ اتانول؛ Triphenylformazan (TFF).
روش انجام کار
1. خاک خاک خشک را برای 1 گرم هر نمونه در لوله آزمایش قرار دهید، 10 میلی گرم (در نوک اسپاتولا) Saco 3، 1 سانتی متر 3 0.1 متر محلول گلوکز اضافه کنید و راه حل 1 سانتیمتر 3 1٪ TTX؛ محتویات هر لوله آزمایش کاملا مخلوط شده اند.
2. لوله های آزمایشی را در یک آناروستات قرار دهید و پمپ هوا را با وضوح 10-12 میلیمتر Hg پمپ کنید. هنر. برای 2-3 دقیقه. سپس به مدت 24 ساعت در 30 0 ثانیه انکوب کنید.
3. پس از اتمام زمان انکوباسیون، محتویات لوله ها در 3-4 دریافت 25 سانتیمتر 3 اتیل الکل استخراج می شوند. برای انجام این کار، مقدار کمی از الکل به لوله تست اضافه می شود و به مدت 5 دقیقه لرزش تا رنگ قرمز ظاهر می شود. به ایستادن و مایع جمع کردن به فیلتر کردن از طریق یک فیلتر کاغذ. بخش بعدی الکل را به لوله تست اضافه کنید.
4. راه حل رنگ آمیزی Formasan در FEC با یک فیلتر نور آبی (500-600 نانومتر) رنگ آمیزی شده است.
5. مقدار Formasan در میلی گرم برای محاسبه با توجه به منحنی استاندارد. برای انجام این کار، یک راه حل استاندارد Formasan را در الکل اتیل در غلظت 0.1 میلی گرم در 1 سانتی متر آماده کنید. راه حل های کار برای کامپایل کردن منحنی برای آماده سازی با رقت های یک راه حل استاندارد (تقریبا 5 امتیاز). منحنی استاندارد برای ساخت کاغذ میلیمتری در سیستم: تراکم نوری در طول موج 500-600 نانومتر - غلظت فرمازان در الکل.
6. محاسبه فعالیت های دهیدروژناز. جدول. 15 ارزیابی میزان اشباع خاک دهیدروژناز خاک مورد مطالعه قرار گرفت.
پردازش داده ها
فعالیت دهیدروژناز (X) در میلی گرم TFF در 10 گرم خاک در هر روز توسط فرمول بیان می شود:
جایی که V حجم کل فیلتراسیون است، 25 سانتی متر مربع؛
10 - ضریب وزن تخمین زده شده، G؛
v محصول بستر و حجم واکنش، 1 سانتی متر مربع است؛
A مقدار TFF است که بر اساس منحنی کالیبراسیون، Mg / cm 3 به دست می آید. خطای تعریف - تا 8٪.
تعيين فعاليت افزودنی
دستگاه ها، ظروف، معرفها:
فوتوکولور سنج 5٪ راه حل سقز؛ بافر استات (pH 4.7)؛ تولوئن؛ راه حل سقوط: A - 40 گرم Cuso 4 × 5n 2 O در آب حل شده و به 1 دالر 3 تنظیم شده است، فیلتر شده از طریق فیلتر کاغذ، B - 200 گرم نمک فر (C 4 H 4 O 6 Kna × 4n 2 O ) در آب مقطر حل شده است اضافه کردن 150 گرم Con و تنظیم به 1 dm 3
روش انجام کار
1. در فلاسک های با ظرفیت 50 سانتی متر 3 بازی 5 گرم از هر نمونه خاک، اضافه کردن 10 سانتی متر 3 5٪ محلول سقز، 10 میلی لیتر بافر استات (pH 4.7) و 5-6 قطره تولوئن.
2. چک کنید Corks، لرزش، قرار دادن ترموستات در دمای 30 درجه سانتیگراد در هر 24 ساعت و به صورت دوره ای آنها را لرزش.
3. پس از انکوباسیون، محتویات فلاسک به 25 سانتی متر مربع به فلاسک ابعاد تبدیل می شوند. به برچسب بروید
4. از فیلترها به مدت 6 سانتیمتر 3 به لوله های بزرگ، 3 سانتیمتر 3 از نمک جداسازی و 3 سانتی متر 3 محلول گوگرد مس اضافه کنید، به خوبی مخلوط کنید و در حمام آب به مدت 10 دقیقه جوش دهید. به نظر می رسد یک رسوب قرمز.
5. لوله های سرد با یک راه حل در آب، محتویات به لوله های بزرگ فیلتر می شوند. فیلتراسیون شفاف در FEC با استفاده از یک فیلتر نور با طول موج 630 نانومتر، عرض 1 سانتیمتر cuvete، رنگ آمیزی شده است.
6. برای به دست آوردن منحنی کالیبراسیون، یک راه حل استاندارد را آماده کنید: 6 میلی گرم گلوکز در 1 سانتی متر 3. پرورش برای آماده سازی مجموعه ای از راه حل ها. Photocolorimetrate و ساخت یک منحنی: تراکم نوری - غلظت گلوکز در 1 سانتی متر 3.
7. فعالیت و جدول را محاسبه کنید. 15 برآورد میزان اشباع خاک های مورد بررسی.
پردازش داده ها
فعالیت invertase (x) در میلی گرم گلوکز توسط 1 گرم خاک در 24 ساعت با فرمول بیان می شود:
مقدار آن مقدار گلوکز به دست آمده با توجه به منحنی کالیبراسیون چگالی نوری، Mg / cm 3؛
m - خاک پنهان، 5 گرم؛
v حجم کل فیلتراسیون، 25 سانتی متر مربع است؛
v حجم فیلتراسیون گرفته شده برای تجزیه و تحلیل، 6 سانتی متر 3 است.
خطای تعریف - تا 5٪.
تعیین اوره خاک
دستگاه ها، ظروف، معرفها:
فوتوکولور سنج 2٪ محلول اوره در بافر فسفات (pH \u003d 6.7)؛ 50٪ محلول نمک فرش؛ راه حل 50٪ CCL 3 Cooh (اسید تری کلروآکوتیک)؛ 1٪ راه حل KS1؛ Nester Reagent؛ راه حل استاندارد NH 4 C1.
روش انجام کار
1. در 5 گرم خاک خشک خشک، یک فلاسک با ظرفیت 100 سانتیمتر 3 قرار داده و 20 سانتیمتر 3 2 درصد از محلول اوره را در بافر فسفات (pH 6.7) و 200 میکرولیتر تولوئن قرار دهید.
2. فلاسک ها به شدت بسته می شوند و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 4 ساعت در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار می گیرند.
3. پس از قرار گرفتن در معرض، پور 1 سانتیمتر 3 50٪ محلول اسید تری کلروآکوتیک.
4. برای جایگزینی از خاک آمونیاک جذب اضافه کنید 50 سانتی متر 3 1 n. راه حل کلرید پتاسیم.
5. محتویات فیلتر فلاسک.
6. 2 سانتیمتر 3 فیلترها را در فلاسک های ابعاد 50 سانتیمتر 3 قرار دهید تا به 30 سانتی متر برسد، سپس 2 سانتیمتر 3 50 درصد از نمک فر را داشته باشید و 2 سانتیمتر 3 از واکنش غیر حقوق و دستمزد. فلاسک هایی که با آب به برچسب چسبیده اند، مخلوط و محلول نقاشی شده در طول موج 400 نانومتر رنگ می شوند.
8. فعالیت اوره را محاسبه کنید.
9. جدول 15 برآورد میزان اشباع خاک های مورد مطالعه توسط اورتا.
پردازش داده ها
فعالیت اوره آز (X) در میلی گرم N-NH 4 به ازای هر 1 گرم خاک در 4 ساعت با فرمول بیان می شود:
v حجم کل فیلتراسیون، 50 سانتی متر مربع است؛
m - خاک شن و ماسه، 5 گرم
سوالات برای آماده سازی خود:
1. فعالیت کاتالاز چیست؟
2. بی نظیر فعالیت های این افزودنی را بیان کنید.
3. توصیف فعالیت اورهزنی.
4. مخلوط بافر چیست؟
5. اصل و ماهیت روش تعیین فعالیت آنزیم های خاک.
6. روش نمونه برداری از خاک.
برنامه های کاربردی
جدول 1 - فهرست نمونه ای از ارگانیسم ها - شاخص های غم انگیز
| ارگانیسم ها | غمگینی |
| باکتری های نیسید: | |
| SPHAEROTILUS NATANS. | r |
| Beggiatoa sp. | r |
| Thiothrix sp. | r |
| قارچ: | |
| Leptomitus لاکتوس. | α |
| Mucor Rajemosus | α |
| Fusarium Aquaectum. | r |
| جلبک دریایی: | |
| سبز آبی: | |
| Anabaena Flos Aquae. | β |
| microcystis aeruginosa. | β |
| Aphanizomenon Flos Aquae | β |
| Oscillatorla Tenuis | α |
| دیاتوم ها | - |
| Cymbella cesati | در باره |
| oomphonema cevli. | در باره |
| Melostra Granulata. | β |
| Navicula Angustata. | α |
| Navicula Apiculata. | α |
| سندرا acus | β |
| Synedra ulna. | β |
| nitzschia palea. | α |
| evglen: | |
| euglena acus | β |
| euglena viridis | r |
| Euglena Deses. | α |
| سبز و انتقال: | |
| گلبرگور ولسوکس. | o-β |
| Ankistrodesmus falcatus. | β-α |
| Crucigenta مستطیلی. | a-β |
| scenedesmus quadricauda. | β |
| draparnaldia sp. | در باره |
| ulothrix zonata. | در باره |
| دگرگونی STLGECOCLONIUM. | α |
| حیوانات: | |
| Amoebs: | |
| pelornyxa palustris. | r |
| ارگانیسم ها | غمگینی |
| Infusoria: | |
| Colpidium، Campylum | پ. |
| Colpldlum colpoda. | پ. |
| euplotes Charon. | β |
| Chllodon cuculululus. | پ. |
| opercularia coaretata. | α |
| paramecium caudatum | α |
| spirostomum amblguum | α |
| st.entor coeruleus. | α |
| vortlcella convallarla | α |
| میکروستوم Vorticella. | پ. |
| Podophrya Fixa. | α |
| becovants: | |
| Kellcottia longispina (syn. notholca iongispina) | در باره |
| Keratella cochlearls. | β |
| Keratella Quadrata. | β |
| Lunarls Lunarls (Syn. Monostyla Lunarls) | β |
| Rotaria Rotatoria (Syn. Rotifer Vulgaris) | α |
| روغن: | |
| limnodriilus hofmelsterl | پ. |
| وان اگر سابق TuBlfex باشد | پ. |
| stylarla lacustris | β |
| Crustaceans: | |
| daplmla magna | α |
| Daphnla Puless | α |
| Leptodora Kindtli. | در باره |
| Eudiaptomus Gracilis. | O. |
| Astacus Fluviatilis. | O. |
| حشرات: | |
| Caenls Macrura. | O. |
| heptagenia coerulana | β |
| chironomus plumosus. | r |
| ماهی: | |
| برادر: | β |
| باربر | β |
| ماهی قزل آلا | O. |
| تاخت | β-α |
جدول 2 - مقیاس فرکانس برای بازنگری ارگانیسم ها در 100 زمینه در هر فرکانس
| مقدار فرکانس | microbentos | پیوست | |
| شمارش داده ها | مقدار در 100 فیلد | ||
| 1 دسته از اندازه | |||
| بیش از 1 در هر دو میدان دوم از دیدگاه بیش از 2 در نظر بیش از 10 در زمینه مشاهده بیش از 30 در زمینه مشاهده بیش از 60 در زمینه مشاهده بیش از 60 در زمینه مشاهده بیش از 60 در نظر | بیش از 1 در هر میدان دوم از نظر بیش از 2 در زمینه دید بیش از 10 در نظر بیش از 50 در زمینه بیش از 50 در میدان دید بیش از 250 در زمینه مشاهده بیش از 250 در دید | 1-50 50-200 200-1000 1000-5000 5000-25000 بیش از 25،000 | |
| دسته دوم اندازه | |||
| بیش از 1 در هر میدان 20 در هر میدان دید بیش از 1 در هر میدان پنجم از دیدگاه نه بیش از 1 در زمینه دید بیش از 3 در نگاه بیش از 6 در نظر بیش از 6 در نگاه بیش از 6 در دید بیش از 6 در نظر | بیش از 2 در 20 زمینه بینایی بیش از 1 در 5 میدان دید بیش از 1 در نظر بیش از 5 در نظر بیش از 5 در زمینه دیدگاه نه بیش از 25 در نظر بیش از 25 در دید بیش از 25 در نظر | 1-5 6-20 21-100 100-500 500-2500 بیش از 2500 | |
| دسته سوم اندازه | |||
| 1 در 100 زمینه دید 1 در 50 زمینه بینایی بیش از 1 در 10 زمینه بینایی نه بیش از 1 در 4 زمینه دید بیش از 1 در 2 میدان دید تقریبا 1 در دید | 1 در 100 زمینه از دیدگاه 1 در 50 زمینه دید بیش از 1 در 10 در زمینه مشاهده 1B2 زمینه های دید بیش از 2 با توجه به بیش از 2 در نظر | 3-10 10-50 50-200 بیش از 200 |
کاربرد
جدول 13. محاسبه نتایج حسابداری کمی به مقدار فرکانس
کاربرد
مثال محاسبه نمونه برداری
نمونه: رودخانه زیر شهر. تاریخ ________________ انجمن: روزه
| ارگانیسم ها | s. | h. | sft |
| euglena viridis | پ. | ||
| scenedesmus acuminatus. | β | ||
| Spirogyra sygmoidea. | β | ||
| closterium acerosum | α | ||
| closterium moniliierum | β | ||
| Cyclotella Menengiana. | α | ||
| cymbella vesiculosa. | β | ||
| دیاتوما Vulgare. | β | ||
| Melosira Italica. | β | ||
| Melosira Varians. | β | ||
| Navicula Cryptocephala. | α | ||
| Navicula Viridua. | α | ||
| nitzschia acicularis. | β | ||
| nitzschia palea. | α | ||
| SURIRELLA OVATA. | β | ||
| Chilidonella cuculata. | α | ||
| colpoda cuculus. | α | ||
| sh \u003d 41. | s (sh) \u003d 103 |
sh p \u003d 3؛ sh α \u003d 15؛ sh β \u003d 23.
s \u003d s (sh) / (sh) -103 / 41 \u003d 2.51 /
محاسبه خطا:
فاصله دقت برای قابلیت اطمینان آماری 95٪.
S \u003d S ± T 0.05 S S \u003d 2.51 ± 2.02 × 0.1؛
اطلاعات مشابه
