Tatsächliche Probleme moderner pädagogischer Studien. Tatsächliche Probleme der pädagogischen Forschung

Durch Art der katalysierten Reaktionen sind alle bekannten Enzyme in sechs Klassen unterteilt:

1. Oxidoreduktase, katalysierende Oxidationsreaktion.

2. Hydrolasen, katalysierende Reaktionen der hydrolytischen Spaltung von intramolekularen Bindungen in verschiedenen Verbindungen.

3. Übertragungen, katalysierende Reaktionen der intermolekularen oder intramolekularen Übertragung der chemischen Gruppe und Rückstände mit der gleichzeitigen Energieübertragung, die in chemischen Bindungen geschlossen wurden.

4. Ligasen (Synthease), Katalysatorenreaktionen von 2 Molekülenverbindungen, konjugieren mit der Spaltung von Firophosphatbindungen von ATP oder einem anderen ähnlichen Trifhosphat.

5. Verriegelungen katalysierende Reaktionen der nichtgrolitischen Spaltung oder Anbringen verschiedener chemischer Gruppen organischer Verbindungen für Doppelbindungen.

6, Isomerase, katalysierende Reaktionen der Umwandlung organischer Verbindungen in ihre Isomere.

Oxidoreduktasen und Hydrolasen sind im Boden weit verbreitet, der in der Bodenbiodynamik sehr wichtig ist.

Katalase

(H 2 O 2: H 2 O 2-Oxidoreduktase)

Katalase katalysiert die Reaktion der Zersetzung von Wasserstoffperoxid, um Wasser und molekularer Sauerstoff zu bilden:

H 2 O 2 + H 2 O 2 O 2 + N 2 O.

Das Wasserstoffperoxid wird im Prozess des Atmens lebender Organismen und infolge verschiedener biochemischer Reaktionen der Oxidation von organischen Substanzen ausgebildet. Die Toxizität von Wasserstoffperoxid wird durch seine hohe Reaktivität bestimmt, die einen einzelnen Sauerstoff, * O 2 zeigt. Seine hohe Reaktivität führt zu unkontrollierten Oxidationsreaktionen. Die Rolle der Katalysazy ist, dass es giftig für Organismen von Wasserstoffperoxid zerstört.

Katalase ist in Zellen lebender Organismen, einschließlich Mikroorganismen und Pflanzen, weit verbreitet. High Catalase-Aktivität ist auch Boden dargestellt.

Verfahren zur Bestimmung der Katalaseaktivität des Bodens basieren auf dem Messen der Zerfallrate von Wasserstoffperoxid, wenn er mit dem Boden in Bezug auf Sauerstoff freigegebene (gasometrische Verfahren) oder durch die Menge des unglückten Peroxids interagiert, das durch permanganatometrische Titration oder kolorimetrische Menge bestimmt wird Verfahren mit der Bildung von lackierten Komplexen.

Forschung E.V. Dentenko und k.sh. Caseew wurde festgestellt, dass beim Speichern von Proben die Aktivität der Katalase aus allen Enzymen bis insoweit reduziert wird, daher muss seine Definition in der ersten Woche nach der Probenahme durchgeführt werden.

Methode Ash. Galest

Der Verlauf der Analyse. Um die Aktivität der Katalase zu bestimmen, werden die Vorrichtung aus den beiden verbundenen Gummischlauchleisten verwendet, die mit Wasser gefüllt und sein Niveau balancieren. Beibehaltung eines bestimmten Wasserstandes in der Bürette weist auf die Erreichung des Temperaturgleichgewichts im Gerät an. Die Mantel (1 g) des Bodens wird zu einer der Trennungen des Zwergkolbens gebracht. Eine 5 ml 3% ige Wasserstoff-Perikkationslösung wird in eine andere Trennung des Kolbens gegossen. Der Kolben ist mit einem Gummikrohr mit einem Glasröhrchen eng verschlossen, der mit einem Gummischlauch mit dem Messbatterien verbunden ist.

Die Erfahrung wird bei einer Temperatur von 20 ° C durchgeführt, da bei einer anderen Temperatur die Reaktionsgeschwindigkeit unterschiedlich ist, dass er die Ergebnisse verzerrt. Grundsätzlich ist die Temperatur nicht wichtig, und Peroxid, es sollte 20 0 ° C betragen. Wenn die Lufttemperatur deutlich über 20 0 s (im Sommer) ist, wird empfohlen, im Keller oder in einem anderen zu analysieren cooles Zimmer. Wird in solchen Fällen empfohlen, ist die Verwendung von Wasserbad mit einer Temperatur von 20 ° C unwahrscheinlich effektiv wirksam.

Der Beginn der Erfahrung wird in der Stoppuhr oder im Sandrad merkt, wenn das Peroxid mit dem Boden gemischt wird, und der Inhalt des Gefäßshakes. Die Verblendung der Mischung wird während der gesamten Erfahrung erzeugt, die versucht, die Flaschen nicht mit ihren Händen zu berühren, um ihn für den Stecker zu halten. Der freigesetzte Sauerstoff verdrängt Wasser aus der Bürette, deren Höhe nach 1 und 2 Minuten bemerkt wird. Die Empfehlung zur Bestimmung der Sauerstoffmenge jedes Minute für 3 Minuten aufgrund der Rektlosigkeit der Reaktion der Peroxid-Zersetzung erhöht nur die für die Analyse aufgewendete Zeit.

Diese Technik ermöglicht es einem Forscher, die Aktivität der Katalase mehr als 100 Proben pro Tag zu analysieren. Es ist zweckmäßiger, den ersten mit 5-6 Gefäßen zu analysieren. Gleichzeitig tätigte sich eine Person direkt an der Analyse und überwacht den Niveau der Bürette, und der zweite folgt der Zeit, schreibt die Daten und wäscht die Gefäße.

Die Steuerung dient als sterilisiert mit trockener Wärme (180 ° C). Einige Böden, Verbindungen und Mineralstoffe haben eine hohe Aktivität der anorganischen Katalysezögerung von Peroxid auch nach der Sterilisation - bis zu 30 bis 50% der Gesamtaktivität.

Die Katalaseaktivität wird in Milliliter von 2 ausgedrückt, in 1 min von 1 g Boden freigesetzt.

Reagenzien: 3 Prozent Lösung H 2 O 2. Die Konzentration von Perhydras ist notwendigerweise periodisch überprüft, die Arbeitslösung wird unmittelbar vor der Analyse hergestellt. Um eine Perhydronkonzentration auf analytischen Skalen in einem Dimensionskolben mit einer Kapazität von 100 ml Gewicht von 1 g 2 O 2 festzulegen, wird das Volumen auf das Etikett und das Schäkel eingestellt. 20 ml der resultierenden Lösung in konischen Kolben pro 250 ml (3 Wiederholungen) werden aufgesetzt, 50 ml destilliertes Wasser und 2 ml 20 Prozent H 2 SO 4 werden zugegeben. Dann titriert 0,1 n. Lösung KMNO 4. 1 ml KMNO 4 -Lösung entspricht 0,0017008 g H 2 O 2. Nach der Festlegung der Konzentration von Perhydrolin wird eine 3-prozentige Lösung durch Verdünnen mit destilliertem Wasser hergestellt. Die CMNO 4-Titer-Lösung wird aus fixanaler und standhafter Tätigkeit, um den Titer festzulegen.

Dehydrogenase

(Substrat: über (f) -oxidoreduktase).

Dehydrogenase-Katalyse-Oxidationsreaktionen durch Dehydrierung organischer Substanzen. Sie geben das folgende Schema weiter:

Ein 2 + in a + vn 2

Im Boden kann das Dehydrierungssubstrat nicht spezifische organische Verbindungen (Kohlenhydrate, Aminosäuren, Alkohole, Fette, Phenole usw.) und spezifische (Humus-Substanzen) sein. Dehydrogenasen in oxidativen Reaktionsreaktionen als Wasserstoffträger und sind in zwei Gruppen voneinander getrennt: 1) Aerobic, sende mobilisierte Wasserstoff-Sauerstoffluft; 2) anaerobisch, die Wasserstoff an andere Akzeptoren, Enzyme übertragen.

Das Hauptverfahren zur Erkennung von Dehydrogenase ist die Wiederherstellung von Indikatoren mit niedrigem Redoxpotentialtyp von Methylenblau.

Um die Aktivität von Bodendehydrogenasen zu bestimmen, werden farblose Salze von Tetrazolie (2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid - TTX) als Wasserstoff verwendet, der an den roten Verbindungen von Formasanov (Triphenylformasan - TFF) wiederhergestellt sind.

Der Verlauf der Analyse. Die Suspension (1 g) des hergestellten Bodenes, die ordentlich durch den Trichter ist, wird mit einer Kapazität von 12 bis 20 ml auf den Boden des Rohrs angeordnet und gründlich gemischt. Fügen Sie 1 ml 0,1 m der Dehydrierungssubstratlösung (Glucose) und 1 ml frisch hergestellter 1-prozentiger Lösung von TTX hinzu. Reagenzgläser befinden sich in einem Anaerostat- oder Vakuumregenator. Die Definition erfolgt in anaeroben Bedingungen, für die die Luft mit einer Auflösung von 10-12 mm Hg evakuiert wird. Kunst. 2-3 Minuten und 24 Stunden bei 30 ° C in einen Thermostat einfügen. Bei Inkubieren von Böden mit Substraten wird Toluol als Antiseptikum nicht hinzugefügt, weil; Es hemmt stark den Effekt von Dehydrogenase. Steuerung dienen sterilisierte Boden (bei 180 ° C für 3 Stunden) und Substrate ohne Boden. Nach der Inkubation in den Kolben lenken 10 ml Ethylalkohol oder Aceton, 5 Minuten schütteln. Die resultierende lackierte Lösung von TFF wird filtriert und färbelt. Mit einer sehr intensiven Farbe wird die Lösung um 2-3 Mal mit Alkohol (Aceton) verdünnt. Wird 10 mm Küvetten und ein Lichtfilter mit einer Wellenlänge von 500-600 verwendet. Die Form des Formasan in MG wird gemäß einer Standardkurve (0,1 mg pro 1 ml) berechnet. Die Dehydrogenase-Aktivität wird in 24 Stunden in Mg TTF auf 10 g Boden ausgedrückt. Fehlerfinition von bis zu 8%.

Reagenzien:

1) 1-prozentige Lösung von 2,3,5-Triphenylterazolia-Chlorid;

2) 0,1 M-Glucose-Lösung (18 g Glucose wird in 1000 ml destilliertem Wasser gelöst);

3) Ethylalkohol oder Aceton;

4) Triphenylformasan für Standardmaßstab. Um eine Kalibrierkurve zusammenzustellen, werden eine Anzahl von Lösungen in Ethylalkohol, Aceton oder Toluol mit einer Formasankonzentration (von 0,01 bis 0,1 mg FormaSan in 1 ml) hergestellt, und photoloprimetrierend, wie oben beschrieben.

In Abwesenheit von Formasan wird es durch die Wiederherstellung von tth Natriumhydrosulfit (Ammoniumsulfit, Zinkpulver in Gegenwart von Glukose) erhalten. Die anfängliche Konzentration der Lösung von TTX 1 mg / ml. Der Kristall-Natriumhydrosulfit wird auf 2 ml der anfänglichen Lösung von TTX an der Spitze der Lanzette zugesetzt. Der Niederschlag von Formasan wird um 10 ml Toluol entfernt. Dieses Toluolvolumen enthält 2 mg Formasan (0,2 mg / ml). Weitere Zuchtbereiten der Arbeitslösungen für die Skala.

Invertaz

(β-Fruchtfuranosidase, Zucker)

Die Invertase ist Kohlenhydrasse, es wirkt auf die β-Fructufuranosidase-Bindung in Saccharose, Raffinose, Gymnasium usw. Das aktivste dieses Enzyms hydrolysiert Saccharose mit der Bildung von Reduktionszucker - Glucose und Fructose:

invertaz

Von 12 n 22 o 11 + n 2 o c 6n 12 o 6 + c 6h 12 o 6

fructose-Glykose-Saccharose.

Die Invertase ist in der Natur weit verbreitet und befindet sich in fast allen Arten von Böden. Sehr hohe Aktivität Invertase in den Böden der Bergwiesen erkannt. Die Aktivität der Invertase korreliert eindeutig mit dem Gehalt an Humus- und Bodenfruchtbarkeit. Es wird empfohlen, wenn Sie die Wirkung von Düngemitteln studieren, um ihre Wirksamkeit zu bewerten. Verfahren zur Bestimmung der Aktivität der Bodeninvertase basieren auf der quantitativen Rechnungslegung regenerierender Zucker gemäß BERRAN und um die optischen Eigenschaften der Saccharoselösung vor und nach der Enzymbelichtung zu ändern. Das erste Verfahren kann angewendet werden, wenn das Enzym mit einer sehr breiten Amplitude der Aktivität und Konzentration des Substrats untersucht wird. Polarimetrische und photolokalimetrische Methoden sind anspruchsvoller der Konzentration von Zuckern und inakzeptabel für Böden mit hohem Inhalt organischwo lackierte Lösungen erhalten werden; Daher sind diese Methoden auf die Bodenstudien beschränkt.

Der Zweck der Arbeit besteht darin, die biologische Aktivität des Bodens mit unterschiedlicher Entfernung von der Straße in vier Enzymsystemen zu bestimmen: Dehydrogenasen, Katalase, Invertase, Urease.

Grundlegendes Konzept

Boden-enzymologische Verfahren ermöglichen es, den nicht quantitativen Gehalt an Enzymen im Boden zu bestimmen, sondern die Aktivität von Enzymen, die hauptsächlich im adsorbierten (immobilisierten) Zustand auf der Oberfläche von Bodenkolloids und teilweise in der Bodenlösung sind.

Das Prinzip der Bestimmung der Aktivität von Bodenenzymen basiert auf der Anzahl der Reaktionsreaktionen, die während der Reaktion oder dem resultierenden Reaktionsprodukt unter den optimalen Temperaturbedingungen, des pH-Werts des Mediums und der Konzentration von Substraten verarbeitet wurden.

Enzyme im Zusammenhang mit der Klasse von Oxidoreduktase-Katalyse-Oxidationsreaktionen, die in biochemischen Prozessen in den Zellen lebender Organismen sowie im Boden eine führende Rolle spielen. Die häufigsten Oxido-Reduktasen wie Katalase und Dehydrogenase, deren Aktivität ein wichtiger Indikator für die Entstehung von Böden ist.

Katalase des Wassers und des molekularen Sauerstoffs, um für das Zellperoxidperoxid giftig zu giften, das in dem Verfahren der Atmung von lebenden Organismen infolge verschiedener biochemischer Oxidationsreaktionen organischer Substanzen gebildet wird.

Die Aktivität der Katalase wird durch das gasometrische Verfahren durch Volumen ausgewählter Sauerstoff bestimmt, basierend auf dem Messen der Zersetzung der Zersetzung von Wasserstoffperoxid während seiner Wechselwirkung mit dem Boden.

Dehydrogenase - Enzyme, die an dem Atemwegsprozess teilnehmen, glätten den Wasserstoff aus oxidierten Substraten. Einige Dehydrogenasen werden direkt auf den Wasserstoff auf molekularen Sauerstoff übertragen, andere - an beliebigen Akzeptoren, wie Hainons, Methylenblau.

Um die Aktivität von Dehydrogenase als Wasserstoffakzeptor zu bestimmen, werden farblose Salze von Tetrazolie verwendet (2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid (TTX), die an den roten Verbindungen des Formasan (Triphenylformasan (TFF) wiederhergestellt sind.

Hydrolazien führen die Hydrolysereaktionen verschiedener komplexer organischer Verbindungen durch, was auf verschiedene Verbindungen wirkt: Komplexe Ester, Glucosid-Amid, Peptid usw. dieser Klasse umfassen Invertase-Enzyme, Urease usw., deren Aktivität ein wichtiger Indikator für bodenbiologische Aktivität ist und wird weit verbreitet, um die anthropogenen Wirkungen zu bewerten..

Die Invertase wirkt auf die P-Fructufuranosidal-Bindung in Saccharose, Raffinin, Stakhioehea und erzeugt die Saccharosespaltung an den äquimolaren Mengen Glukose und Fructose.

Die fotolokalimetrische Bestimmung der Aktivität der Invertase basiert auf der Bilanzierung von Raining-Zuckern, die während der Spaltung von Saccharose gebildet werden.

Die Zersetzung organischer Stickstoffverbindungen erfolgt mit der direkten Beteiligung extrazellulärer Enzyme. Der während der UREAZNA-Aktivität gebildete Ammoniak dient als Quelle der Pflanzenernährung.

Harnstoff katalysiert Harnstoffhydrolyse. Die ultimativen Hydrolyseprodukte sind Ammoniak und Kohlendioxid. Harnstoff fällt als Teil von Pflanzenrückständen, Mist und als Stickstoffdünger in den Boden; Es ist auch in dem Boden selbst als Zwischenprodukt im Prozess der Umwandlung stickstoffer organischer Verbindungen - Proteine \u200b\u200bund Nukleinsäuren ausgebildet.

Bestimmung der Katalaseaktivität

Ausrüstung und Reagenzien:

System zur Gasometrie (Abb. 8); 10% ige Lösung H 2 O 2; SACO ER.

Feige. 8 - Installation für eine gasometrische Bestimmung der Katalaseaktivität in Bodenproben:

1 - Kolben, 2 - Burette, 3 - Adapter, 4 - Birne mit Wasser

Verfahren zur Arbeit

1. Seite des gezogenen Bodenes 1 g Zugabe in den Kolben bei 100 cm 3, fügen Sie 0,5 g Casso 3 hinzu.

2. Nach unten seien Sie sorgfältig mit einem Pinzetten, einer kleinen Becher mit 1,7 cm 3 10% der Wasserstoffperoxidlösung.

3. Bodenprobe Moof 4 cm 3 destilliertes Wasser.

4. Der Kolben schließt das Gummischrohr fest mit einem mit einer dickwandigen Gummi-Burete verbundenen Röhrchen durch ein mit einer Klemme ausgestatteter T-Stück. Die Bürette wird mit einer Birne kommuniziert. Die Bürette und Birne sind mit Wasser gefüllt. Der Wasserstand in ihnen ist äquilibriert und die Birne ist in einer bestimmten Höhe fixiert.

5. Beginn der Erfahrung, an einer Stoppuhr zu beachten, zu der Zeit, wenn das Gefäß mit Wasserstoffperoxid umgestürzt ist, schütteln Sie den Inhalt des Kolbens. Die Verblendung der Mischung sollte zu allen Zeiten der Erfahrung fortgesetzt werden, ohne den Boden des Kolbens direkt zu berühren. Der exkrassierende Sauerstoff verdrängt Wasser aus der Burette, deren Höhe notiert wird.

6. Die Menge an markierter molekularer Sauerstoff wird 1 min bei einer Temperatur von 18 bis 20 0 ° C berücksichtigt.

7. Katalaseaktivität wird in dem Volumen (cm 3) von Sauerstoff ausgedrückt, der um 1 g Boden pro Minute hervorgehoben ist. Fehlerdefinition bis zu 5%.

8. Ähnliche Verfahren mit allen Bodenproben.

9. Tisch. 15 Bewerten Sie den Grad der Sättigung der Böden der Katalase .

Tabelle 15 ‑ Maßstab zur Beurteilung des Grads der Anreicherung von Bodenenzymen

Der Grad der Anreicherung der Böden	Katalase, 2 cm 3 / g pro 1 min	Dehydrogenase, mg TFF für 10 g für 24 Stunden	Invertase, Mg Glucose pro 1 g in 24 Stunden	Harnstoff, mg NH 4, 10 g 24 Stunden	Phospotase, MG P 2 O 3 pro 10 g pro 1 Stunde
Sehr arm	< 1	<1	<5	<3	<0,5
Arm	1-3	1-3	5-15	3-10	0,5-1,5
Durchschnittlich	3-10	3-10	15-50	10-30	1,5-5,0
Reich	10-30	10-30	50-150	30-100	5-15
Sehr reich	>30	>30	> 150	> 100	> 15

Definition von Dehydroginase-Aktivität

Geräte, Gerichte, Reagenzien:

Photocolorimeter; Diagrammpapier; 0,1 m-Glukose-Lösung; 1% ige Lösung von 2,3,5-Triphenylterazolia-Chlorid (TTX); Saso 3; Ethanol; Triphenylformazan (TFF).

Verfahren zur Arbeit

1. Platzieren Sie den Luft-trockenen Boden 1 g jeder Probe in das Reagenzglas, fügen Sie 10 mg (an der Spitze des Spatels) SACO 3, 1 cm 3 0,1 M-Glucose-Lösung und 1 cm 3 1% TTX-Lösung hinzu; Der Inhalt jedes Testrohrs ist gründlich gemischt.

2. Legen Sie die Reagenzgläser in eine Anaerostat und ziehen Sie die Luftpumpe mit einer Auflösung von 10-12 mm Hg aus. Kunst. Für 2-3 Minuten. Dann inkubieren Sie dann 24 Stunden bei 30 0 s.

3. Nach Ablauf der Inkubationszeit werden der Inhalt der Röhrchen in 3-4 aufgenommenen 25 cm 3 Ethylalkohol extrahiert. Dazu wird dem Reagenzglas eine kleine Menge Alkohol hinzugefügt und 5 Minuten sackt, bis die rote Farbe erscheint. Gib dem Stand und die Addiererflüssigkeit, um durch einen Papierfilter zu filtern. Fügen Sie den nächsten Teil des Alkohols zum Reagenzglas hinzu.

4. Die resultierende lackierte Lösung von Formasan ist auf dem FEC mit einem blauen Lichtfilter (500-600 nm) kolorimetriert.

5. Die Menge an Formasan in Milligramm, um gemäß der Standardkurve zu berechnen. Um dies zu erreichen, bereiten Sie eine Standardlösung von Formasan in Ethylalkohol in einer Konzentration von 0,1 mg in 1 cm 3 her. Arbeitslösungen zur Erstellung von Kurven zur Herstellung von Verdünnungen einer Standardlösung (ca. 5 Punkte). Standardkurve, um auf Millimeterpapier im System zu konstruieren: optische Dichte bei einer Wellenlänge von 500 bis 600 nm - die Konzentration von Formasan in Alkohol.

6. Berechnen Sie die Dehydrogenase-Aktivität. Tabelle. 15 Bewerten Sie den Grad der Sättigung der untersuchten Bodendehydrogenase.

Datenverarbeitung

Die Aktivität von Dehydrogenase (X) wird in den Milligramm von TFF auf 10 g Boden pro Tag von der Formel ausgedrückt:

wobei V das Gesamtvolumen des Filtrats, 25 cm 3 ist;

10 - Geschätzter Bodengewichtskoeffizient, G;

v ist das Produkt von Substrat- und Reagenzvolumen, 1 cm 3;

A ist die Menge an TFF, die gemäß der Kalibrierungskurve, mg / cm 3 erhalten wird. Definitionsfehler - bis zu 8%.

Bestimmung der invertalen Aktivität

Geräte, Gerichte, Reagenzien:

Photocolorimeter; 5% ige Lösung von Saccharose; Acetatpuffer (pH 4,7); Toluol; Fehllösung: A - 40 g Cuso 4 × 5n 2 O wird in Wasser gelöst und auf 1 DM 3 eingestellt, filtriert durch ein Papierfilter, B - 200 g eines ferronetischen Salzes (C 4 H 4 O 6 KNA × 4n 2 O ) wird in destilliertem Wasser gelöst, um 150 g CON hinzuzufügen und auf 1 DM 3 einzustellen

Verfahren zur Arbeit

1. In den Kolben mit einer Kapazität von 50 cm 3 spielen 5 g jedes Bodentropfens mit 10 cm 3 5% Saccharose-Lösung, 10 ml Acetatpuffer (pH 4,7) und 5-6 Tropfen Toluol.

2. Schecks schließen die Korken, schütteln, in einen Thermostat bei einer Temperatur von 30 0 ° C pro 24 Stunden einsetzen und sie regelmäßig schütteln.

3. Nach der Inkubation werden der Inhalt des Kolbens um 25 cm 3 in Dimensionskolben filtriert. Zum Label bringen.

4 von Filtraten, um 6 cm 3 auf große Röhrchen zu nehmen, 3 cm 3 des Trennsalzes und 3 cm 3-Lösung von Kupferschwefel hinzuzufügen, gut zu mischen und 10 Minuten auf einem Wasserbad zu kochen. Es stellt sich einen roten Niederschlag heraus.

5. Kühle Röhrchen mit einer Lösung in Wasser, der Inhalt wird in große Röhrchen filtriert. Das transparente Filtrat wird an der FEC mit einem Lichtfilter mit einer Wellenlänge von 630 nm, einer Kuvettenbreite 1 cm, farbigimetriert.

6. Um eine Kalibrierungskurve zu erhalten, bereiten Sie eine Standardlösung vor: 6 mg Glucose in 1 cm 3. Züchtung, um eine Reihe von Lösungen vorzubereiten. Photocolorimetration und Konstruieren einer Kurve: Optische Dichte - Glukosekonzentration in 1 cm 3.

7. Berechnen Sie die Aktivität und Tabelle. 15 schätzen den Grad der Sättigung der untersuchten Böden.

Datenverarbeitung

Die Aktivität der Invertase (X) wird in 24 Stunden in Milligramm Glucose um 1 g Boden ausgedrückt:

wobei a die Menge an Glukose ist, die gemäß der Kalibrierungskurve der optischen Dichte der optischen Dichte, mg / cm 3 erhalten wird;

m - Bodenverblendung, 5 g;

V ist das gesamte Filtratvolumen, 25 cm 3;

v ist das Volumen des Filtrats für die Analyse, 6 cm 3.

Definitionsfehler - bis zu 5%.

Bestimmung des Bodens Harnstoff

Geräte, Gerichte, Reagenzien:

Photocolorimeter; 2% Harnstofflösung in Phosphatpuffer (pH \u003d 6,7); 50% ige Lösung des ferronetischen Salzes; 50% ige Lösung CCL 3 COOH (Trichloressigsäure); 1% ige Lösung von KS1; Nester Reagens; Standardlösung NH 4 C1.

Verfahren zur Arbeit

In 5 g Luft-trockenem Boden, in einen Kolben mit einer Kapazität von 100 cm 3 eingesetzt, gießen Sie 20 cm 3 2% der Harnstofflösung in Phosphatpuffer (pH 6,7) und 200 μl Toluol.

2. Die Kolben sind dicht geschlossen und in einem Thermostat bei einer Temperatur von 37 0 ° C für 4 Stunden angeordnet.

3. Gießen Sie nach Belichtung 1 cm 3 50% Lösung von Trichloressigsäure.

4. Um vom Boden des absorbierten Ammoniaks zu verdrängen, fügen Sie 50 cm 3 1 N hinzu. Kaliumchloridlösung.

5. Der Inhalt des Kolbenfilters.

6. 2 cm 3 Filtrate setzen in die Dimensionskolben von 50 cm 3, um bis zu 30 cm aufzulösen, um bis zu 30 cm 3 aufzulösen, dann 2 cm 3 50% des Ferronetikums und 2 cm 3 des Nicht-Gehaltsreagens zu gießen. Die Kolben, um mit Wasser auf das Etikett zu befestigen, mischen, mischen und die lackierte Lösung werden mit einer Wellenlänge von 400 nm farblich erfasst.

8. Berechnen Sie die Aktivität von Urease.

9. Tisch. 15 Schätzen Sie den Grad der Sättigung der von Ureta untersuchten Böden.

Datenverarbeitung

Die Aktivität von Urease (X) wird in den Milligramm von N-NH 4 pro 1 g Boden in 4 Stunden von der Formel ausgedrückt:

V ist das gesamte Filtratvolumen, 50 cm 3;

m - Schleifboden, 5 g

Fragen zur Selbstvorbereitung:

1. Was ist Katalaseaktivität?

2. Geben Sie die Korrektheit der invertalen Aktivität an.

3. Beschreiben Sie die ursachyische Aktivität.

4. Was ist eine Puffermischung?

5. Prinzip und Wesen des Verfahrens zur Bestimmung der Aktivität der Bodenenzyme.

6. Die Methode der Abtastung von Böden.

Anwendungen

Tabelle 1 - Vorbildliche Liste von Organismen - traurige Indikatoren

Organismen	Traurigkeit
Nieße Bakterien:
Sphaerotilus natans.	R.
Beggiatoa sp.	R.
Thiotrix sp.	R.
Pilze:
Leptomit-Lacteus.	α
Mucor Racemosus.	α
Fusarium Aquaectum.	R.
Seetang:
Blau Grün:
Anabaena Flos Aquae.	β
Microcystis Aeruginosa.	β
Aphanizomenon Flos Aquae.	β
Oszillatorla Tenuis.	α
Diatome	-
Cymbella Cesati.	Über
Oomphonema cevli.	Über
Melostra-Granulata.	β
Navicula Angustata.	α
Navicula Apiculata.	α
SYNEDRA ACUS.	β
Synedra Ulna.	β
Nitzschia Palea.	α
Evonglen:
Euglena Acus.	β
Euglena viridis.	R.
Euglena deses.	α
Grün und Transfers:
Volvox-Globator.	O-β.
Ankistrodesmus falcatus.	β-α
Crucigenta rectangularis.	A-β.
Senkensmus quadricauda.	β
Draparnaldia sp.	Über
Ulothrix Zonata.	Über
STLGEOClonium-Tenue.	α
Tiere:
Amobs:
Pelornyxa palustris.	R.

Organismen	Traurigkeit
Infusoria:
Colpidium, Campylum	P.
Colpldlum colpoda.	P.
Euplotten Charon.	β
Chllodonkukululus.	P.
Opercularia-Coaretata.	α
Paramecium Caudatum.	α
Spirostomum amblguum.	α
St.entor coeruleus.	α
Vortlcella convallarla.	α
Vorticella Microstoma.	P.
Podophrya-Fixa.	α
Becovants:
Kellcottia longispina (syn. Notholca iongispina)	Über
Keratella cochlearls.	β
Keratella Quadrata.	β
Leucane-Lunarls (Syn. Monostyla-Lunarls)	β
Rotaria Rotatoria (syn. Rotifer vulgaris)	α
Öle:
Limnodrilus Hofmelsterl.	P.
Wanne, wenn Ex tublfex	P.
Stylarla lacustris.	β
Krebstiere:
Daplmla magna.	α
Daphnla peulne	α
Leptodora Kindtli.	Über
Eudiaptomus gracilis.	Ö.
Astacus Fluviatilis.	Ö.
Insekten:
Caenls Makrura.	Ö.
Heptagenia Coerulana.	β
Chironomus Plumosus.	R.
Fisch:
Brachsen:	β
Barbe	β
Forelle	Ö.
Schleie	β-α

Tabelle 2 - Frequenzskala, um Organismen in 100 Feldern pro Frequenz neu zu berechnen

Frequenzwert	Mikrobentos.	Anhang
Datenzählung	Betrag in 100 Feldern
1. Kategorie der Größe
	Nicht mehr als 1 in jedem zweiten Sichtfeld nicht mehr als 2 in Sicht von nicht mehr als 10 im Sichtfeld nicht mehr als 30 im Sichtfeld nicht mehr als 60 auf dem Sichtfeld mehr als 60 in Sichtweite	Nicht mehr als 1 in jedem zweiten Sichtfeld nicht mehr als 2 im Sichtfeld nicht mehr als 10 im Hinblick auf höchstens 50 im Sichtfeld von nicht mehr als 250 im Sichtfeld mehr als 250 in Sichtweite	1-50 50-200 200-1000 1000-5000 5000-25000 Mehr als 25.000
2. Kategorie der Größe
	Nicht mehr als 1 in jedem 20. Sichtfeld nicht mehr als 1 in jedem fünften Sichtfeld nicht mehr als 1 im Sichtfeld nicht mehr als 3 in Sicht von nicht mehr als 6 in Sicht von mehr als 6 in Sichtweite	Nicht mehr als 2 in 20 Sichtfeldern von nicht mehr als 1 in 5 Sichtfeld nicht mehr als 1 angesichts nicht mehr als 5 im Sichtfeld nicht mehr als 25 in Sicht von mehr als 25 in Sichtweite	1-5 6-20 21-100 100-500 500-2500 mehr als 2500
3RD-Kategorie
	1 in 100 Fachgebiete 1 in 50 Sichtfelder nicht mehr als 1 in 10 Sehbereiche nicht mehr als 1 in 4 Sehbereiche nicht mehr als 1 in 2 Sichtfeldern ungefähr 1 in Sicht	1 in 100 Fachgebiete 1 in 50 Sichtfelder nicht mehr als 1 in 10 im Bereich der Ansicht 1B2-Sichtfelder nicht mehr als 2 im Hinblick auf mehr als 2 in Sichtweite	3-10 10-50 50-200 mehr als 200

Anwendung

Tabelle 13. Neuberechnung der Ergebnisse der quantitativen Bilanzierung auf den Frequenzwert

Anwendung

Beispiel zur Berechnung der Probenahme

Probe: Fluss unter der Stadt. Datum ________________ Community: Fasten.

Organismen	s.	h.	Sbst
Euglena viridis.	P.
Senkensmus acuminatus.	β
Spirogyra SYGMOIDEA.	β
Clowerium Acerosum.	α
Closeium moniliierum.	β
Cyclotella Menengiana.	α
Cymbella Vesiculosa.	β
Diatomeen vulgare.	β
Melosira Italica.	β
Melosira-Varianer.	β
Navicula Cryptocephala.	α
Navicula viridua.	α
Nitzschia acicularis.	β
Nitzschia Palea.	α
Surirella-Ovata.	β
Chilidonella Cuculata.	α
Colpoda Cuculus.	α
		Sh \u003d 41.	S (sh) \u003d 103

Sh p \u003d 3; Sh α \u003d 15; Sh β \u003d 23.

S \u003d s (sh) / (sh) -103 / 41 \u003d 2,51 /

Fehlerberechnung:

Genauigkeitsintervall für statistische Zuverlässigkeit 95%.

S \u003d s ± t 0,05 s s \u003d 2,51 ± 2,02 × 0,1;

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