Praktische Arbeit zur Mikrobiologie. Workshop zur Mikrobiologie.
Bundesamt für Bildung
Staatliche Bildungseinrichtung
"Irkutsky. staatliche Universität»
Kleine Mikrobiologie-Workshop.
Lehranleitung
Irkutsk 2009.
UDC 579 (076.5)
Gedruckt von der Entscheidung des Redaktions- und Verlagsrats der Universität Irkutsk
Vilkina Workshop zur Mikrobiologie: Studie.-Methode. Handbuch für Studien Höher. Studien. Institutionen in den Spezialitäten "Mikrobiologie", "Biologie" und "Physiologie".
6. Die mikrobielle Masse sollte keine Hände, Tabelle und umliegenden Elemente verschmutzen. Die verschüttete mikrobielle Suspension wird mit Desinfektionsmitteln neutralisiert.
7. Nach dem Ende der Arbeit der Kultur wird der Lehrer den Lehrer übergeben, die betäubten Reagenzgläser und Tassen in den Thermostat.
8. Bakteriologische Schlaufen, Nadeln, Pinzetten und andere Metallobjekte, nachdem Sie Mikroorganismen kontaktieren, verbrennen Sie die Flamme des Alkohols und legen Sie in ein spezielles Stativ ein.
9. Gebrauchte substantive und Beschichtungsgläser, Pipetten, Spatel usw. Es wird in einer 3-5% igen Lösung von Karbolsäure oder anderen Desinfektionslösungen gelegt.
10. Auspuffkulturen in Reagenzgläsern, Petrischalen usw., neutralisieren Sie mit Hilfe von Desinfektionslösungen während des Tages, dann kochen und waschen.
11. Es ist notwendig, die persönliche Hygiene strikt zu beobachten - nach dem Ende der Arbeit ist es notwendig, Ihre Hände gründlich mit Seife zu waschen.
12. Es ist notwendig, Sicherheitstechniken beim Arbeiten mit elektrischen Geräten und chemischen Reagenzien einzuhalten.
Allgemeine Mikrobiologie.
Kapitel I. Mikroskop- und Mikroskopyre-Technologie
1. Lichtoptische Mikroskopie
2. Mikroskopie in einem dunklen Feld
3. Phasekontrastmikroskopie
4. Lumineszent (fluoreszierende) Mikroskopie
Kapitel II. Allgemeine Ideen zum Anbau, Säenstechniken und die notwendige Ausrüstung für die Arbeit mit Mikroorganismen
Kapitel III. Verfahren zur Herstellung von Medikamenten von Mikroorganismen
Kapitel IV. Studie der mikrobiellen Zelle
1. Formen von Zellen von Mikroorganismen
2. Die Struktur von Zellen von Mikroorganismen (zytochemische Forschungsmethoden)
3. Farbzellen von Mikroorganismen von Gramm
4. Färbungstreit für Bakterien
5. Malkapseln
6. Farbe Zhgutikov.
7. Malerei der Kernsubstanz Bakterien
8. Färbung von Einschlüssen von Zellen von Mikroorganismen
Kapitel V. Ernährung von Mikroorganismen
1. Der Wert einzelner Nährstoffelemente
2. Vorbereitung von Nährmedien
3. Sterilisationsmethoden
Kapitel VI. Buchhaltung für die Anzahl der Bakterien und der Zuteilung der reinen Kultur
1. Buchhaltung für die Anzahl der Bakterien im Boden
2. Bestimmung der Qualität der Bakterien
3. Buchhaltung für die Anzahl der Mikroorganismen in Wasser und anderen Flüssigkeiten
4. Bilanzierung der Anzahl der Bakterien in der Luft
5. Isolierung reiner Bakterienkulturen
Kapitel VII. Bestimmung der Form von Bakterien
Kapitel VIII. Transformation durch Mikroorganismen von bezotischen organischen Substanzen
Fermentationsprozesse
1. Alkoholfermentation.
2. Laminierende Fermentation.
3. Fettige saure Gärung
4. Fermentation von Pektinsubstanzen
5. Fermentation von Cellulose
6. Oxidation von Faser
7. Oxidation von Fett
8. Oxidation von Kohlenwasserstoffen
Kapitel IX. Transformation durch Mikroorganismen aus organischen und mineralischen Stickstoffverbindungen
1. Ammonikierung
2. Nitrifikation.
3. Denitrifikation (Nitratatmung)
4. Biologische Fixierung atmosphärischer Stickstoffe
Kapitel X. Transformation durch Mikroorganismen von Schwefelverbindungen, Eisen und Phosphor
1. Transformation durch Mikroorganismen von Schwefelverbindungen
2. Die Beteiligung von Mikroorganismen bei der Umwandlung von Eisen
3. Transformation durch Mikroorganismen von Phosphorverbindungen
Landwirtschaftliche Mikrobiologie.
Kapitel XI. Allgemeine mikrobiologische Analyse des Bodens
1. Forschungsmethoden
2. Gruppen von Mikroorganismen, Zusammensetzung und Herstellung von Nährmedien
3. Nehmen Sie die mittlere Bodenprobe und die Herstellung der Probe zur mikrobiologischen Analyse
4. Vorbereitung der Bodenfederung
5. Rechnungswesen für verschiedene Gruppen von Mikroorganismen
6. Bestimmung der Gesamtzahl der Mikroorganismen im Boden durch direktes Konto unter dem Mikroskop
Kapitel XII. Studium der Zentren von Mikroorganismen
1. Verfahren zum Zeichnen von Glas auf N. G. kalt
2. Studium der mikrobiellen Cenose im Boden nach der Methode des PEFE und eines Gabs
3. Wählerische Capillaria-Methode in der Modifikation von Aristovskaya
4. Identifizierung der Mikroorganismen der Autochthongruppe, die an der Zersetzung von Humus-Substanzen teilnehmen, gemäß der Traubenmethode bei der Änderung der Wärme
5. Nachweis von Mikroorganismen, die an der Zersetzung von Humus-Substanzen beteiligt sind, gemäß der Wärmemethode
Kapitel XIII. Bestimmung der biologischen Aktivität des Bodens
1. Bestimmung der biologischen Aktivität des Bodens auf der Intensität der Zersetzung der Bahn (Mishtoustina, der Eastore- und Petrova-Methode)
2. Bestimmung der gesamten mikrobiologischen Aktivität des Bodens für Kohlendioxid
3. Bestimmung der ambiatisierenden Bodenaktivität
4. Bestimmen der Ammakumifizierung von Mikroorganismen
5. Bestimmung der Bodennitrifizierungsaktivität
6. Bestimmung der denintischen Aktivität des Bodens
7. Definition der stickstoffösen Mikroorganismenaktivität
Kapitel XIV. Studie der Bakterienwurzelzone und Wurzeln
1. Bachbarung auf Bakterien in der Rhizosphäre durch die Methode des Schönen
2. Bilanzierung der Rhizosphäre und Wurzel-Mikroflora durch die Methode der aufeinanderfolgenden Wäsche der Wurzeln von E. 3. Tepper
3. Isolierung von sauberen Kulturen von Knotenbakterien, quantitativer Bilanzierung im Boden, Bestimmung ihrer Aktivität und Virulenz
Kapitel XV. Analyse von Bakteriendrogen
Kapitel XVI. Mikrobiologie-Futtermittel.
1. Epiphytische Mikroflora von Getreide und seine Änderung beim Speichern von Futtermitteln
2. Analyse von Silos
3. Hefe des Futters
Kapitel XVII. Mikroflora von Milch- und Milchprodukten
1. Bakteriologische Analyse von Milch
2. Verfahren zur Freisetzung von Milchsäurebakterien in die reine Kultur
3. Bekanntschaft mit Mikroflora der Butter
Index der Literatur.
Transkript
1 Ministerium für Bildung und Wissenschaft Russische Föderation Bundesamt für Bildung Moskau State University of Engineering Ökologie Kustova N.A. Laborworkshop zur Mikrobiologie Moskau 2005
2 Mikrobiologie-Labor-Workshops sind für Studierende der Spezialitäten 3207 und 3302 über die Disziplin "Grundlagen der Microbiologie und Biotechnologie" sowie für Studierende der Abteilung "Umwelt- und Industriebiotechnologie" auf der Disziplin "Umwelt- und Industrie-Mikrobiologie" bestimmt. Der Workshop besteht aus drei Abschnitten. Der erste Abschnitt ist den Fragen der allgemeinen Mikrobiologie gewidmet. Die Arbeiten dieses Abschnitts untersuchten die morphologische Struktur verschiedener Gruppen von Mikroorganismen, Methoden mikroskopischer Forschung, mikrobiologischen Säenstechniken, Sterilisationsmethoden und Methoden der quantitativen Rechnungslegung von Mikroorganismen. Der zweite Abschnitt enthält Arbeiten an der Verwendung von Mikroben in der Biotechnologie, um verschiedene Substanzen von organischen Säuren, Alkoholen, Antibiotika, Enzymen zu erhalten. Die Werke des dritten Abschnitts werden Probleme der ökologischen Mikrobiologie studiert. Ein Teil der Arbeit zeigt die Rolle der Mikroorganismen in globalen biogeochemischen Zyklen, und der Rest widmet sich den Problemen des biotechnologischen Umweltschutzes. Jedes Thema enthält theoretische Einführung und ein praktischer Teil, in dem die Beschreibung der verwendeten Methoden, das Verfahren zur Durchführung der Arbeit, den Inhalt des Arbeitsberichts sowie die Kontrollfragen. 2
3 Der Vorwort-Labor-Workshop zur Mikrobiologie ist für Studierende von 3 Spezialitäten der Spezialitäten 3207 und 3302 auf der Disziplin "Grundlagen der Mikrobiologie und Biotechnologie" sowie für Studierende des 4. Jahres der Abteilung "Umwelt- und Industriebiotechnologie" bestimmt Spezialisierung "Biotechnologieschutz der Umwelt" in der Disziplin "ökologischen und industriellen Mikrobiologie. Der Laborwerkstatt basiert auf "methodischen Richtlinien für Laborarbeit" ed. P.I.Nikolaeva, der an der Abteilung "Prozesse und mikrobiologischen Maschinen" verwendet wurde, von dem von dem Moment an der Abteilung erstellt wird. Bei der Lehre der Mikrobiologie in Trainingsingenieure für die mikrobiologische Industrie wurde ein großer Beitrag von S.N., KB. N.v. pomortseva. Methodische Anweisungen wurden unter seiner Führung erstellt forscher Abteilungen: M.A.Bruzadina, d. H. Lomovaova, N. A. Kustova, T.a. Lamatina und K.A.Solovyeva. Der Wechsel lehrplan In Übereinstimmung mit der neuen Spezialität hat der ökologische Ingenieur erforderlich, um den Kurs der Mikrobiologie auszubauen und es mit den Aufgaben auf biotechnologische Methoden des Umweltschutzes zu ergänzen. Laborwerkstatt besteht aus drei Abschnitten. Der erste Abschnitt ist der allgemeinen Mikrobiologie gewidmet: Morphologie von Mikroorganismen, Methoden seiner Studie, mikrobiologischen Säentechniken, Methoden der quantitativen Rechnungslegung von Mikroorganismen. Der zweite Abschnitt deckt einige Beispiele für die Verwendung von Mikroben in der Industrie ab. Der dritte Abschnitt deckt die Fragen der Ökologie von Mikroorganismen, ihrer Rolle in globalen Elementzyklen sowie in biotechnologischen Methoden des Umweltschutzes ab. Die Vorbereitung dieses Workshops wurde von dem Graduiertenstudent der Abteilung N.v. Syabrev und S.N.S. teilgenommen. E. GORSHINA. Der Autor drückt den Arsch tiefe Dankbarkeit aus. Cafe. Microbiology MSU N.N. Baby für wertvolle Kommentare und Tipps sowie S.N.S. P.P. MakeeV zur Hilfe beim Entwerfen von Text und veranschaulichendem Material. 3.
4 4 Allgemeine Arbeitsregeln Im mikrobiologischen Labor Die Regeln der Arbeit und des Verhaltens im Labor der Regeln der Arbeit und des Verhaltens im mikrobiologischen Labor haben mit den Regeln der Arbeit in chemischen Laboratorien viel gemeinsam, haben jedoch ihre eigenen Besonderheiten. Der Mikrobiologe arbeitet in den meisten Fällen mit reinen Kulturen von Mikroorganismen, d. H. Mit Mikroorganismen jeglicher Art, Ansicht und Belastung. Da sich bei allen umliegenden Elementen und in der Luft exfraner Mikroben befinden, werden spezielle Arbeitsmethoden angewendet, um eine Infektion der studierenden Kultur des Mikroorganismus oder der Person selbst zu vermeiden. Dafür sind Nährstoffmedien, Geschirr, Werkzeuge sterilisiert, das Labor und die Jobs enthalten sauber, erfüllen bestimmte Regeln, wenn sie mit Mikroben arbeiten. Im Labor sollten keine zusätzlichen Objekte vorhanden sein. Es ist notwendig, die nasse Reinigung regelmäßig durchzuführen. Verschiedene Oberflächen von Laborraten sind regelmäßig Desinfektion unterzogen. Desinfektion ist Desinfektion, d. H. Zerstörung verursachter Wirkstoffe von Infektionskrankheiten an Objekten außenumgebung. Verwenden Sie dazu 0,5 3% Chlorlösung oder 3 5% Phenollösung (Carbolsäure). Der Desktop sollte mit einer 70% igen Lösung von Ethyl- oder Isopropylalkohol desinfiziert werden. Luftdesinfektion wird durch einfache Belüftung (mindestens Minen) erreicht. Eine effizientere Art der Desinfektionsluftbestrahlung des Raums durch ultraviolette Strahlen mit bakteriziden Lampen. Besonders oft wird Ultraviolett-Bestrahlung zum Sterilisieren von Boxen verwendet. Boxenspezieller kleiner Raum für stille Kulturpflanzen, quantitative Bilanzierung von Mikroorganismen auf Petri-Tassen und einigen anderen Arbeiten, die besonders klare Bedingungen erfordern. Vor dem Arbeiten wird das Boxen innerhalb der Minute bestrahlt. Der Tisch wird mit Alkohol, Wänden und Boden periodisch wischt. Anstelle des Boxens kann das Labor mit laminaren Schränken ausgestattet sein (Abb. 1), die auch von bakteriziden Lampen sterilisiert werden. Zum
5 Die Arbeit beinhaltet einen Lüfter, um einen laminaren Fluss von sterilen Luft durch bakterizide Filter zu schaffen. Die Hauptausstattung des mikrobiologischen Labors umfasst: Mikroskope, Thermostate für wachsende Mikroorganismen, Ausrüstung für die Sterilisation (Autoklaven- und Trockenschrank), Zentrifugen, Distiller, Kühlschrank zum Aufbewahren von Museumskulturen von Mikroorganismen, Schränken zum Aufsetzen von Glaswaren und Reagenzien, notwendige Geräte (Photoelektrolometer, ph-metterer usw.). Jeder Schüler wird an dem Arbeitsplatz fixiert, auf dem sie platziert werden: ein Mikroskop, das durch ein Deckel, bakteriologische Schleife, Subjekt- und Beschichtungsgläser, sterile Pipetten, Alkoholbrenner, Filterpapierstreifen, Glasmarker, ein Gefäß mit Desinfektionsflüssigkeit geschlossen ist. Auf dem Tisch sollte nichts sein, was nicht direkt mit der Leistung der Arbeit zusammenhängt. In Laborunterricht in der Mikrobiologie sollten Sicherheitsvorschriften befolgt werden. fünf
6 6 Sicherheitssicherheit Im Labor in der mikrobiologischen Praxis werden Utensilien aus chemischen Gläsern weit verbreitet. Pflege muss beim Arbeiten mitgenommen werden. Spaltet gebrochene Gerichte sorgfältig sauber. Wenn analysiert, werden häufig starke Alkalis und Säurelösungen verwendet. Es ist notwendig, mit großer Sorgfalt mit ihnen zusammenzuarbeiten, da diese Substanzen schädlich auf der Haut und der Kleidung wirken. Wenn die Säure zufällig ausbillig ist, muss es mit einer großen Menge Soda schweben und dann mehrmals mit Wasser abspülen. Die verschütteten Alkali muss sorgfältig ausgelöscht werden, und die Gegenstände, auf die sie mit einer schwachen Lösung von Essigsäure behandelt werden musste. Bei Säure oder Alkalis auf der Haut einer Person müssen sie sofort mit viel Wasser abgewaschen werden. Im mikrobiologischen Labor befassen sich sie mit Alive-Mikroorganismen. Hauptarbeiten sind steril, d. H. Arbeiten Sie mit einer Kultur von Mikroorganismen, die nicht mit herausragenden Mikroben infiziert werden sollten. Um eine Aussaatverunreinigung zu vermeiden, werden spezielle Sterilisationsmethoden verwendet. Darüber hinaus ist es wichtig, die Reinheit im Labor einzuhalten. Geschirr mit Kulturen von Mikroorganismen sollte nicht offen bleiben. Biomasse von Mikroorganismen, wenn es nicht für Analysen benötigt wird, wird nur nach der Sterilisation im Autoklaven ausgestoßen. Die Kulturen von Mikroorganismen erzeugen einen Gas- oder Alkoholbrenner aus einer Flamme, sodass Brennen beobachtet werden sollten und zunächst lange Haare sanft aufnehmen. Der Brenner sollte nur dann verbrennen, wenn es notwendig ist. Wenn ein Baumwollkorken, Alkohol oder Papier, von einem Handtuch aus einem Handtuch versehentlich umdrehen, drehen sich beim Säen. Mit größeren Fokus verwenden Feuerlöscher Feuerlöscher. Gebrauchte Pipetten, Subjekt- und Beschichtungsgläser, Spatel usw. In einem Gefäß mit desinfizierender Flüssigkeit angeordnet. Die Studierenden müssen sich ständig daran erinnern, dass sie sich mit Mikroorganismen befassen, die weit von immer sicher sind, insbesondere in der Arbeit an der Zuordnung von Mikroben von Umweltobjekten. Daher sollten die Schüler am Ende der Lektion den Arbeitsplatz anbringen und ihre Hände mit Seife waschen.
7 Wenn die Fehlfunktion des elektrischen Netzwerks die elektrischen Geräte und deren zentralisierte Stromversorgung ausschalten muss. Abschnitt 1. Allgemeines Mikrobiologie-Thema 1. Morphologie von Mikroorganismen und Methoden seiner Studienmikrobiologie studieren die Organe mit mikroskopischen Größen, d. H. Gemessene Mikrometer oder Fraktionen von Mikrometern. Ein Mikrometer ist 10-6 Meter und ist als MKM abgekürzt. Mikroorganismen zeichnen sich durch einen intensiven Stoffwechsel aus und können eine Vielzahl chemischer Transformationen durchführen. Verschiedene Mikroorganismen unterscheiden sich in ihrer Struktur und in den biochemischen Prozessen, die sie durchführen. Die Kombination von ihnen in einer Gruppe wird nicht nur durch geringe Größe verursacht, sondern auch die Allgemeinheit von Anbau- und Forschungsmethoden. Um die Struktur von Mikroorganismen zu studieren, ihre Aussehen, Form, Größen, d. H. Verwenden Sie ein Mikroskop, um die Morphologie von Mikroorganismen zu studieren. Die kleinsten Partikel, die in modernen Lichtmikroskopen zu sehen sind, haben mehr als 1/3 der Lichtwellenlänge, d. H. Nicht weniger als 0,2 μm, der mit der Verwendung des sichtbaren Teils des Lichts verbunden ist, mit einer Wellenlänge von 0,4 μm bis 0,7 μm aufweisen. Mikroskopvorrichtung in FIG. 2 zeigt das Erscheinungsbild des MBI-3-Mikroskops, das in der wissenschaftlichen und pädagogischen Praxis üblich ist. Das unter Berücksichtigung des Medikaments, das das Medikament unter Berücksichtigung des Arzneimittels befindet, wird mit den aus dem Beleuchtungsstrahlen aus dem Beleuchtungsstrahler beleuchtet, der auf den Spiegel fällt, und dann durch den Kondensator passieren und sich auf die Zubereitung konzentriert. Hauptstücke des Mikroskops: Okulare, Röhrchen, Drehdüse mit Linsen, Subjekttisch mit Clips für Drogen, Kondensator, Makro-Mikrokörper zum Zeigen auf die Schärfe und schließlich ein Stativ, in dem all dies montiert ist. 7.
8 Überprüfen Sie vor der Mikroskopation die Richtigkeit der Beleuchtungsanlage (von Kelerur). Um dies zu tun, bewegen Sie die Kassette des Beleuchtungskörpers mit einer Glühbirne, erreichen Sie ein klares Bild des Threads 8
9 Die Lampe auf einer geschlossenen Vollmembran des Kondensators glühen, so dass dieses Bild vollständig mit der Kondensatoröffnung gefüllt ist. Erkältung der Membran des Beleuchtungskörpers öffnete die Kondense-Membran und bewegte den Kondensator, erreichen ein scharfes Bild der Membran des Illuminators im Sichtfeld des Mikroskops. Damit das helles Licht keine blinden Augen macht, verringern Sie das Filament der Lampe. Und schließlich ist das Bild des Aperturlochs in der Mitte des Sichtfelds installiert, und die Öffnung des Beleuchtungskörpers wird geöffnet, so dass das gesamte Sichtfeld beleuchtet ist. Das Mikroskop ist ein optisches System mit zwei Vergrößerungsstufen: Die erste Erhöhung erfolgt durch die Linse, das zweite Okular. Die Linse ergibt ein erhöhtes umgekehrtes Bild des Subjekts, das als das Okular betrachtet wird. Infolgedessen sieht die Augen des Beobachters ein stark vergrößertes umgekehrtes Bild des Subjekts. Daher wird die Bewegung des Objekts links durch das Auge als Bewegung nach rechts wahrgenommen. Allgemeines zunehmendes Mikroskop, d. H. Eine Erhöhung, in der das Objekt unter dem Mikroskop betrachtet wird, ist als ein Produkt mit zunehmender Linse und Okular definiert. Die Linse erhebt zeitweise einen Anstieg von 10, 40, 60, 90 Mal, Eyepieces. Wenn eine binokulare Düse angewendet wird, ergibt sich eine zusätzliche Erhöhung. In FIG. Fig. 3 zeigt ein schematisches Diagramm eines optischen Mikroskopsystems. Die Linse um bildet ein gültiges invertiertes Bild in der Ebene des Objekts A. Das von der Linse angegebene Bild nimmt weiter mit dem Okular von E auf. Da Z im Fokus des Okulars E ist, sieht der Betrachter ein erhöhtes imaginäres Bild A in Die X-Ebene, die normalerweise 25 cm vom Auge entfernt ist. In einer Entfernung, am praktischsten für die Nahansicht. Es sollte berücksichtigt werden, dass eine solche Idee des Bildbildungsmechanismus in ist hochgradig Vereinfacht, denn es ignoriert den Effekt der Beugung und eine Reihe anderer Faktoren. Bei der Arbeit mit einem Mikroskop studieren die Studierenden Microbed mit zunehmender Zeit. Der größte Anstieg, der ein optisches Mikroskop, 3000-mal ergibt. Die kleinste Teilchengröße, die in einem solchen Mikroskop betrachtet werden kann, 9
10 ist 0,2 μm, was auf die Wellenlänge des sichtbaren Teils des Spektrums zurückzuführen ist. Morphologie der Mikroorganismen Die Welt der Mikroorganismen umfasst eine Vielzahl von Formen, die keine einzige systematische Gruppe darstellen. Die Hauptobjekte der Mikrobiologie sind Bakterien, aber neben ihnen studieren Mikrobiologen immer noch Hefe, Pilze, mikroskopische Algen und einige einfachste. In FIG. 4 präsentiert die Hauptgruppen von Mikroorganismen (mit Ausnahme des einfachsten); Die Verhältnisse ihrer Größe werden gespeichert. Alle lebenden Organismen außer Viren haben zellstruktur. In Übereinstimmung mit seiner zellulären Organisation sind sie in prokaryotische und eukaryotische Teile aufgeteilt. 10.
11 Der Hauptunterschied zwischen Eukaryoten aus Prokaryoten besteht in Gegenwart von sekundären Hohlräumen, die den Kernel und andere zelluläre Strukturen aus dem Zytoplasma trennen. Es ist das Erscheinungsbild von sekundären Hohlräumen erlaubt, einen Sprung in der Entwicklung der gesamten lebenden Welt durch Erhöhen der inneren Oberfläche von Eukaryot-Membranen zu ermöglichen. Dies ermöglichte es, in Übereinstimmung mit einer Erhöhung der Diffusionsrate gleichzeitig eine größere Anzahl von biochemischen Reaktionen auszuführen, die auf Membranen auftreten. Prokaryotm sind Bakterien, darunter Actinomycetes und Cyanobakterien. Eukariotes sind alle Pflanzen, Tiere, Hefe, Pilze, einfachste. Unter den Prokaryoten wird derzeit eine Gruppe von Archaebakterien zugeordnet, die Methanogen, extreme Halophile (lebt in sehr gesalzenem Wasser) extrem thermopophilen Bakterien, oxidierend und wiederherstellen des molekularen Schwefels sowie des Thermoplasmas, der keine Zellwand, oxidiert und wiederherstellt. Die neue Trennung wurde auf der Grundlage eines Vergleichs von Nukleotidsequenzen in kleinen ribosomalen RNA-Segmenten hergestellt. elf
12 Die Archaebakterien unterscheiden sich in der Zusammensetzung von Zellwänden, Lipiden und einigen anderen physiologischen biochemischen Merkmalen (zum Beispiel haben sie einen anderen Mechanismus zum Fixieren von CO 2). Somit werden in der Struktur der Zellorganisation 3 Gruppen derzeit zugewiesen: Archebakterien (gemäß der neuen Archaea-Nomenklatur, Archaeus), Eubakterien (gemäß der neuen Bakterien Nomenklatur, Bakterien) und Eukaryoten (gemäß der neuen Eukarya-Nomenklatur ). Arbeit 1. Mikroskopische Studie der Bakterien Morphologie Bakterien Theoretische Einführung Diese Gruppe von Mikroorganismen ist am zahlreichen, weit verbreiteten in der Natur und hat einen großen industriellen Wert. Für Mikroorganismen wird die binäre Nomenklatur wie in Zoologen und Botanik verwendet. In Übereinstimmung mit dieser Nomenklatur hat jede Art einen Namen, der aus zwei lateinischen Wörtern besteht. Das erste Wort bedeutet Gattung und die zweite Ansicht. Der generische Name ist immer aus dem Großbuchstaben und der Probe mit der Linie geschrieben. Die meisten Bakterien von einkugelförmigen Organismen kugelförmig, rollenförmig oder verwickelte Form. Unter Bakterien gibt es eine kleine Anzahl von Pifalformen. Bakterien sind sehr klein, der Durchmesser des Käfigs von kugelförmigen Bakterien beträgt 1 2 Mikrometer. Bakterien werden mit der Division multipliziert (unter günstigen Bedingungen erfolgt die Division nach MIN). Einige Bakterien sind beweglich. Die Bewegungsfähigkeit ist mit der Anwesenheit von speziellen Organrella-Flagella verbunden. Das einfachste in Form von kugelförmigen Bakterien (Cockki). Sie sind oder in Form von einzelnen Bällen oder Bällen, die miteinander Glück haben. Durch den Ort der Zellen nach der Unterteilung sind die kugelförmigen Bakterien in Monokokken (einzelne Kokken), Tetracocker (kombiniert 4), Sarcins (kombiniert 8), Staphylokokken (Cluster), Streptokokken (Cockkins Ketten) unterteilt. 12.
13 Hähnchenförmige Bakterien sind die zahlreichste Gruppe von Bakterien. Sie haben eine zylindrische Form von Zellen mit abgerundeten oder spitzen Enden und variieren stark in Bezug auf die Länge zu der Breite. Sie können einzeln platziert werden oder kurze oder lange Ketten bilden. Die Stöcke können unterschiedliche Längen sein, üblicherweise mehrere μm, und die Breite beträgt etwa 1 Mikrometer. Innerhalb der Zelle speziellen Anrufer-Streitigkeiten sind einige riedrige Bakterien ausgebildet. Jede Zelle bildet einen Streit, der zur Übertragung nachteiliger Bedingungen dient. Streit unter den entsprechenden Bedingungen (Temperatur, Luftfeuchtigkeit, Nährstoffe) keimt, in einen Zauberstab. Der Widerstand des Bakterienstreits ist dem Widerstand beliebiger lebender Organismen überlegen. Zum Beispiel stand der Bacillus subtilis Heu-Strickstritte die Temperatur von 100 ° C für 3 Stunden stand. Ein solcher Stabilitätsstreit macht es schwierig, Infektionen zu bekämpfen. Entschuldigung von Mikroorganismen unterscheiden sich in dem Grad des Käfigs von Zellen und durch die Anzahl der Kurven. Sie sind in Vibrium, Spirillas und Spiraketes unterteilt. Wenn die Bakterien eine unvollständige Wickel der Spirale aufweisen, wird es Vibrille genannt. Wenn Bakterium mehrere spiralförmige Locken aufweist, heißt es Spirilli, und Mikroben, die ein Argument mit einer großen Anzahl kleiner Locken aufweisen, werden Spiraketes genannt. Die Nichtigenbakterien sind Fäden, die aus zylindrischen oder Scheibenzellen bestehen. Die Fäden einiger Spezies sind in der Schleimhaut eingeschlossen, die mit Eisenhydroxiden oder Mangansalzen imprägniert werden können. Der Prozess der Ansammlung von Schwermetallen aus Lösungen erfolgt in den Zellen bestimmter Fertrrucks. Große Nichly-Bakterien r. Beggiatoa wird in Schwefelzellen verschoben. Die schönen Bakterien leben in der Regel in Meeres- und frischem Wasser, es gibt auch in Zerlegung von organischen Rückständen, im Darm der Tiere. Die Cyanobakterien beinhaltet eine große Gruppe von Organismen, die die prokaryotische Struktur der Zelle mit der Fähigkeit zur Durchführung der Photosynthese kombinieren. Cyanobakterienzellenpigmente Zusätzlich zu Chlorophyll A (grün) enthalten ein Ficotinpigment 13
14 blau. Auf dieser Basis wurden sie früher als blauer Xeopalalgae genannt. Die meisten von ihnen sind mehrzellige Organismen, die langlebige, meist veränderte Threads (Trichomie) sind. Zellen in den Fäden werden mit einer gemeinsamen Außenwand kombiniert. Manchmal bilden die Schleimhaufen von "Matten" die Schleimhaut. Die Wiedergabe erfolgt durch Abfall des Fadens in separate Abschnitte. Einige Arten bewegen sich mit dem Gleiten (r. Spirulina). Actinomycetes (Verzweigungsbakterien, Radiant-Pilze) Große Gruppe von prozarnierbaren Mikroorganismen, die dünne Verzweigungsgewinde mit einer Länge von mehreren mm und einem Durchmesser von 0,5 1,5 μm bildet. Sie sind eine Art von Mikroorganismen, die in morphologischen Begriffen Ähnlichkeiten mit Formpilzen aufweist (Abb. 5). Zellen Ein erheblicher Teil von Vertretern dieser Gruppe sind in der Lage, ein charakteristisches Zeichen von Pilzzeichen zu verzweigen. Die Länge der Verzweigungsfilamente von Actinomyceten erreicht jedoch mehrere Millimeter, während die Länge des Mycels von Pilzen von mehreren Zentimeterns. Gifs von Pilzen sind normalerweise dicker als Actinomycete-Threads. Gemäß der Morphologie und der Entwicklung von Actinomyceten sind in höhere und untere Formen unterteilt. Die höchsten sind Organismen mit gutem 14
15 entwickelte septische oder unmittelbares Myzel und spezielle Spionageorgane. Streitigkeiten sind in Form von Ketten auf speziellen Gif-Gifs von Luft Miczelia ausgebildet. Die Struktur der spionenden Organe unterscheidet sich in verschiedenen Typen: lang oder kurz, gerade oder spiralförmig (Abb. 6). Gemäß der Anwesenheit des Myzels und der Struktur der Organe des Sputums ähneln die höchsten Actinomycetes Mycel-Pilze. Einige Actinomycetes verfügen über Myzelchen nur in jungen Kultur, die mit dem Alter mit der Bildung von Ropust- und Kokobenzellen zerfallen. Die unteren Formen der Actinomycetes haben kein echtes Mycel. Die Fähigkeit, Mycel zu bilden, ist in ihnen nur in den Trends von Zellen zum Zweig ausgedrückt. Die unteren Aktinomyceten umfassen beispielsweise Spezies der Gattung Mycobacterium, die eine Eigenschaft, die Form von Zellen mit dem Kulturzeiten zu ändern (Fig. 7). Diese Eigenschaft heißt Pleomorphismus. Unter den höchsten Aktinomyceten besetzt der führende Ort in natürlichen Umgebungen die Arten von Streptomyces. Aktinomycetes spielen eine große Rolle in den Prozessen 15
16 Bodenbildung und Erzeugen der Bodenfruchtbarkeit. Actinomycetes zerstören komplexe organische Verbindungen (Cellulose, Humus, Chitin, Lignin usw.), unzugänglich für viele andere Mikroorganismen. Fast alle Arten von Streptomyces erzeugen spezifische Vitalprodukte mit antibiotischen Eigenschaften. Einige Arten sind kauerende Errungenschaften von Pflanzenkrankheiten, Tieren und Menschen. Neben den Grundformen von Bakterien gibt es Produkt- und Bindungsbakterien, die die erhöhten Prozesse tragen. (Abb. 8) 16
17 Schätzfunktionen sind unterschiedlich. Einige Bakterien dienen zur Zucht, in anderen, um die Zelle an dem Substrat anzubringen. 17
18 18 Praktischer Teil Der Zweck der Arbeit besteht darin, die Morphologie der Vertreter von Bakterien zu studieren. Das Verfahren zur Durchführung der Arbeit, die den ersten Job durchführt, studieren die Studierenden den Anziehungskraft mit einem Mikroskop, schauen dann durch fertige Medikamente von Vertretern von Bakterien, dann Sie bereiten die Vorbereitungen von lebenden Bakterien unabhängig und mikroskopieren sie selbstständig vor. Zunächst sind die Studierenden mikroskopisch fertig, fixierte Bakterienpräparate. Feste Zubereitungen sind Mikroorganismen, die in einem wässrigen Medium suspendiert, das auf dem Subjektglas getrocknet ist, und von Anilinfarbstoffen lackiert. Die Zubereitungen einiger lebender Mikroorganismen-Studenten werden unabhängig voneinander zubereitet. Dazu wird ein kleiner Tropfen Leitungswasser auf das reine Glasglas aufgetragen, in das die calcinierte und kalte bakteriologische Schleife aus einer geringen Menge an mikroben untersuchten Mikroben besteht, es wird sorgfältig gerührt und mit Beschichtungsglas bedeckt. Überschüssiges Wasser wird durch Filterpapier entfernt. Das Medikament wird auf den Subjekttisch platziert und an den Klammern fixiert. Zunächst wird das scharfe Bild des Objekts mit einem geringen Anstieg mit der Linse 10x gelöst. Dann wird das Mikroskop auf einen großen Anstieg mit der Linse 40x übertragen. Die Drehung der Schrauben muss mit Vorsicht gemacht werden, da mit einem zu scharfen Absenken die Linsenlinse zerdrückt werden kann. In der Mikroskopation sollte beachtet werden, dass das Mikroskop, insbesondere mit großen Zoomen, nicht die gesamte Tiefe des Objekts erfasst, daher mit einer allmählichen Absenkung des Rohrs mit Mikrovinting das Objekt zuerst sichtbar, und dann in der optischer Abschnitt. 1. Anzeigen von festen Medikamenten von Mikroorganismen. Lactococcus lactis das ursächliche Wirkstoff der Milchgärung; Zellform sphärische Kokken; Zellen sind mit der Kette verbunden. Verwendet, um Milchsäureprodukte herzustellen.
19 Lactobacillus acidophilum reifenförmige Bakterien; Der ursächliche Wirkstoff der Milchgärung. Verwendet, um Milchsäureprodukte herzustellen. Acetobacter Aceti-Rodid-Bakterien, oxidierende Ethanol in Essigsäure. Verwendet, um Lebensmittelesig herzustellen. Streptomyces griseus actinomycete, Form einer Zelle in Form von dünnen verzweigten Threads; Antibiotika-Streptomycin gießen. Saccacharopolyspora Erythrae Actinomycete, Form einer Zelle in Form von dünnen verzweigten Threads; Erythromycin-Antibiotika-Produzent. 2. Anzeigen von Live-Präparaten Bacillus Subtillis-Zellform in Form von feinen bewegenden Stöcken; Forms-Streitigkeiten; Gießen von Enzympräparaten. Spirulina platsensis Cyanobakterien; die Form von Zellen in Form eines einzelnen Fadens, der aus zylindrischen Zellen besteht, die dicht aneinander angrenzt; Es hat eine Gleitbewegung. In Form eines Lebensmittelzusatzstoffs verwendet. Berichtsinhalt 1. Lateinischer Name des Mikroorganismus. 2. Morphologie der Zelle (geben Sie eine Zeichnung mit einem Hinweis auf eine Zunahme des Mikroskops an und halten Sie das Verhältnis der Zellengrößen aufrechterhalten). 3. Die Verwendung von Studienbakterien in der Industrie. Kontrollfragen 1. Beschreiben Sie das Mikroskopgerät. 2. Ermitteln Sie die Erhöhung des Mikroskops? 3. Was ist die Form von Bakterienzellen. 4. Nennen Sie die Merkmale der Morphologie von Actinomycete. 5. Welche Vertreter von Bakterien wissen Sie und was sind ihre? praktischer Wert? Arbeit 2. Morphologie der eukaryotischen Mikroorganismen Theoretische Einführung 19
Zu den eukaryotischen Mikroorganismen, die von Microbiologen studiert werden, umfassen: Pilze, Hefe, Mikroalgen und einige einfachste. Morphologie-Pilze-Pilze, die Mikroorganismen mit einer filamentalen Form von Zellen blasen. Lange verzweigte Fäden, die von ihnen gebildet werden, werden Gifami genannt. GIFs in aggregierter Formularmyzel. Entsprechend ihrer Größe Gifs von Pilzen, viel größere Actinomycetes. Mycelium in einer Reihe von Mold-Pilzen ist durch Partitionen (Septic Mycelium) geteilt, und es gibt keine anderen Arten von Partitionen. In der Biotechnologie als Produzenten werden hauptsächlich Mold-Pilze verwendet. Unter dem Namen "Mold Pilze" werden einige Vertreter von Ficomyzets, Probenahme und unvollkommenen Pilzen kombiniert. Auf dichten Substraten, Formpilze bilden abgerundete flauschige, webartige, wate-ähnliche oder pulverisierte Kolonien von grün, gelblich, schwarz oder weiß. Die Kolonien der Form bestehen aus einer großen Anzahl von Gifs. Die meisten Gifs entwickeln sich in der Luft und teilweise in der Dicke des Substrats. Die Gifs werden häufig von Conidiens gebildet, auf denen Streitigkeiten gebildet werden oder innerhalb des Sporangiums oder in der Form von Exospors, die sich mit Ketten befinden. Konidespora oder Conidia, servieren für faszinierbare Zucht (Abb. 10). Conidia, fällt in günstige Bedingungen, keimen im Myzel aus. Mold-Pilze sind in der Natur sehr verbreitet und haben ein starkes enzymatisches Gerät. Daher sind sie die Hauptzerstörer der organischen Verbindungen in der Natur. Die Formpilze werden auch in der Industrie weit verbreitet, um organische Säuren, Antibiotika und Enzyme herzustellen. zwanzig
21 Die Morphologie der Hefe-Hefe ist eine separate Gruppe von einzelligen mikroskopischen Pilzen, die von großer praktischer Bedeutung sind. Die Hefezellen sind große Zellen einer abgerundeten oder ovalen Form (Fig. 11). Einige Hefe können ein rudimentäres Mycel bilden, das als "Pseudomitelius" genannt wird. Die Größe der Zellen reicht von 3 μm bis 10 μm Länge und 2 bis 8 μm breit. Die meisten Hefe multipliziert mit dem Kill. Zur gleichen Zeit an 21
22 Die Zellflächen erscheinen eine kleine Konvexität der Niere (manchmal nicht eins, und mehrere), die sich allmählich in der Größe erhöhen und schließlich von seiner Zelle getrennt, die sie erzeugt. Die Niere, die von der mütterlichen Zelle getrennt ist, wird zu einer neuen Hefezelle. Einige Hefe multipliziert mit der Division. Im feinkörnigen Gehalt an lebenden Hefe (Protoplasma) sind große Vakuolen gut auffällig. Vakuolen sind Hohlräume im Protoplasma, mit Zellsaft gefüllt. Es besteht aus Elektrolyten, gelöst in Wasser, Proteinen, Kohlenhydraten und Enzymen. In jungen Protoplasma-Zellen der jungen Hefe, ein homogener, und in späteren Entwicklungsstadien in der Protoplaze, wirken Vakuolen mit Mobilfunksaft mit metabolischen Produkten gefüllt. Während der Erschöpfung des Nährmediums kommen viele Hefe Sporen. Bei einigen Arten von Hefestreitigkeiten der abgerundeten Form und mit einer glatten Hülle beschichtet. Zu günstigen Bedingungen keimen die Streitigkeiten. Hefe ist in der Natur weit verbreitet. Sie befinden sich auf Trauben, an anderen Beeren und Früchten, in Milch, in Wasser und Boden sowie auf der menschlichen Haut. Viele Hefe führen eine Alkoholfermentation aus und werden zur Herstellung von Alkohol in Brotmacher, Winzerfahren, Brewing verwendet. 22 Morphologie der einfachsten einfachsten sind Einzelzellorganismen der Tierwelt. Unter den Mikroorganismen sind sie am schwierigsten angeordnet, die primitiven Organe mit multizellulären Tieren sind. Einige von ihnen haben Roben und Anallöcher, Kontraktil- und Verdauungsvakuolen. Die einfachste Nichtzelle (Zellteilung) und sexuelle Mittel werden multipliziert. Die Klassifizierung des einfachsten basiert auf Bewegungsmethoden. 1. Sarkodisch. Bewegen und fangen Sie Lebensmittel mit Hilfe von Pseudoenie oder falschen Beinen. Ein typischer Vertreter ist Amoeba. Die Abmessungen der AMEB überschreiten den MKM nicht.
23 2. Klingen. Haben Sie eine enge Plasmaschale und bewegen Sie sich mit Blinker. Bodenformen von Aromen sind sehr klein (2 5 Mikrometer) und Wasser groß (bis zu 20 Mikrometer). Ein typischer Vertreter ist Euglena. 3. Cartoon Das höchst organisierte einfachste. Zellabmessungen reichen von 20 bis 80 Mikrometer. Ein typischer Vertreter ist ein Paramecium-Infusorianer, der auf Futterfutterfutter kultiviert wird. 4. Sporen Fixe Formen. Viele Pathogennes, wie der Palasmodium Malaria Pathogen. Der einfachste ist in der Natur weit verbreitet. Sie befinden sich in Gewässern, in Ile und Böden. Der Wert der einfachsten Natur ist sehr vielfältig. Sie leben im gastrointestinalen Trakt verschiedener Tiere, die an der Verdauung von Pflanzenfutter teilnehmen, teilnehmen an der Mineralisierung organischer Rückstände im Boden und sind auch ein wichtiger Bestandteil der Biocenose in den Behandlungseinrichtungen. Fütterung durch Bakterien und suspendierte Substanzen beitragen zum Aufhellen von Wasser. Der einfachste führt die Funktion der Indikatoren aus: Bei der Entwicklung bestimmter Formen kann man die Qualität der Reinigung von Abwasser beurteilen. So weist die Prävalenz der AMEB und der Abwesenheit in der Zusammensetzung von aktiven IL-Infusionen eine schlechte Arbeit der Behandlungseinrichtungen hin. Tetrahylena-Infusor ist weit verbreitet für primäre Bewertung. Toxizität. Verschiedene Arten von einfachsten sind in Fig. 2 dargestellt. 12. Die Morphologie von Algenalgen ist eine umfangreiche Gruppe von Pflanzenorganismen. Allgemeines für alle, das Vorhandensein von Chlorophyll und verursacht durch diese photoautorrophische Kraft, um organische Substanzen mit Energie zu synthetisieren sonnenlicht und Kohlendioxid. In vielen Algen wird die grüne Farbe von Chlorophyll als andere Pigmente getarnt. Unter ihnen sind sehr kleine einzellige und mehrzellige Formen, die auf Mikroorganismen, sowie 23 zurückzuführen sind
24 Multicolor-Organismen, die in den Meeren und den Ozeanen leben und manchmal gigantische Größen erreichen. Die Objekte des Studiums der Mikrobiologie sind einige algen mikroskopische Größen. Sie haben eine Vielzahl von Form und wohnen sowohl auf Land als auch im wässrigen Medium (Abb. 13). 24.
25 Praktischer Teil Der Zweck der Arbeit besteht darin, die Morphologie von Vertretern verschiedener Gruppen von Eukaryot zu studieren. Das Verfahren zur Durchführung von Arbeitsstudenten bereiten unabhängig voneinander lebhafte Medikamente von Vertretern von Pilzen, Hefe, Algen und Protozoen vor; Mikroskopieren Sie sie mit der Linse X40 und der Skizze, die einen Anstieg des Mikroskops angibt. Aspergillus Niger-Formpilze Die Form der Zellen in Form von Myzel mit Trennwänden; Bei einigen Gifs gibt es unverzweigte Conidiona mit Streitigkeiten. Die Kondiossen sind einzellig, kugelförmig geschwollen, auf der Oberfläche des Ozeans sind kurze Zellen (Sterigs), von denen jede die in Schwarz befleckte Conidium-Kette ausnimmt. Es wird verwendet, um organische Säuren und Enzyme zu erhalten. Penicillium-Chrysogenum-GIFs haben Trennwände; Bei einigen Gifs gibt es verzweigte Conidiens mit Streitigkeiten. Conidias sind an den Enden der Gewässer von verzweigten Conidionen ausgebildet. Es wird verwendet, um Antibiotika-Penicillin zu erhalten. 25.
26 Hefe Saccharomyces cerevisiae einzelne Hefe mit ovalen und abgerundeten Zellen; Multiplizieren Sie mit dem Töten. Wird beim Brühen, Brotakkumulation, Alkoholproduktion verwendet. In der Natur gibt es auf der Oberfläche von Beeren und anderen Früchten. Saccharomyces vini-Zellenform oval und abgerundet; vermehren sich durch Töten; Nach dem Einsatz ist einige Zeit nicht getrennt, wodurch kleine "Zweige" bildet. In der Winzerierung verwendet. Rhodotorula glutinis elliptische Zellform; einzelne Zellen; Multiplizieren Sie mit dem Töten. In orangefarbener Farbe aufgrund von Inhalten in Carotinoid-Zellen gemalt. Kann in Medien mit Ölkohlenwasserstoffen als Kohlenstoffquelle wachsen. Als Futterhefe verwendet. Candida Tropicalis Hefe mit ovalen und stark länglichen Zellen, die "Pseudomitere" bilden. Kann in einem mineralischen Medium mit Kohlenwasserstoffen als Kohlenstoffquelle wachsen. Als Futterhefe verwendet. Auf einem industriellen Maßstab werden auf den von Alkohol erzeugten Abfall gezüchtet, Papier. Algen Chloorella vulgaris mikroskopische grüne Algen mit abgerundeten Zellen (5 10 μm Durchmesser); Wir multiplizieren Autokraten, die in einer Menge von 4 bis 32 in der mütterlichen Zelle ausgebildet sind und nach der Schalenpause freigesetzt werden. Kann für den Massenanbau verwendet werden, um ein Futterprotein zu erhalten, sowie für die Luftregeneration in geschlossenen Systemen (U-Boote, raumstationen usw.). Senkensmus sp. bezieht sich auf eine Gruppe grüner Algen; hat eine ovale Form von Zellen; Die äußeren Zellen sind oft mit spitzen Enden; Zellen sind vier miteinander verbunden. Es wird verwendet, um ein Lebensmittelprotein zu erhalten. 26.
27 Das einfachste Medikament bereitet sich aus dem aktiven Schlamm von Aeroten vor. Untersuchen Sie die Morphologie der entdeckten Vertreter der einfachsten und skizzierten sie. Der Inhalt des Berichts 4. Lateinischer Name des Mikroorganismus. 5. Zellmorphologie (geben Sie eine Zeichnung mit einem Hinweis auf eine Erhöhung des Mikroskops an und halten Sie das Verhältnis der Zellgröße aufrechterhalten). 6. Die Verwendung studierter Mikroorganismen in der Industrie. Kontrollfragen 1. Beschreiben Sie die Form der Zellen der Vertreter von Pilzen und ihrer praktischen Verwendung. 2. Beschreiben Sie die Form von Hefezellen; NAME-Vertreter und erzählen uns von ihrer praktischen Verwendung. 3. Erzählen Sie uns von der Morphologie von Microalgae und deren praktische Verwendung. 4. Namensvertreter der einfachsten und erzählen von ihrer Verwendung in der Biotechnologie. Arbeit 3. Verfahren zum Studieren der Morphologie von Mikroorganismen Die häufigste Methode des Untersuchungsmisches der Morphologie von Bakterien ist die Mikroskopation von festen Medikamenten, die aus reinen Kulturen von Mikroorganismen oder von der Testprobe hergestellt werden. Die Untersuchung von Mikroorganismen in einem Lebenszustand wird bei der Untersuchung größerer Formen und Beobachtung der Zellmobilität eingesetzt. Herstellung von festen Medikamenten von Mikroorganismen zur Herstellung von festen Medikamenten von Mikroorganismen zuerst herbereiten den Abstrich vor, getrocknet, fixiert und dann gefärbt. Bei perfekt sauberen Glasrutschen werden Hörer hergestellt. Verkleinertes Glas kann ein Ethylalkohol sein, ein Gemisch aus gleichen Volumen von Alkohol und Ether und anderen 27
28 Flüssigkeiten. Der einfachste und praktischste Weg, um das Glas zu fetten, reiben sie auf beiden Seiten von einem Stück Haushaltsseife an. Seife entfernen mit Glas mit einem Stück trockener Wolle oder Serviette. Bei der Herstellung eines Abstrichs aus einer Kolonie von Bakterien, die auf einem Agar-Medium angebaut werden, wenden sie zunächst einen Tropfen Wasser oder physiologische Lösung auf ein Magerglas auf. Kalkinieren Sie dann die bakteriologische Schleife in der Flammenbrenner. Danach kühlen Sie die Schleife an der Innenwand des Reagenz-Tube, den Teil der Kolonie ohne Agar-Schleife erfassen. Die Schleife mit einer Kultur wird in einem Tropfen Wasser oder physiologischer Lösung auf dem Glas hergestellt und machen 2 3 kreisförmige Bewegungen. Ein Teil der Bakterien ist in der Flüssigkeit suspendiert. Der Überschuss an Bakterien, die auf der Schleife bleiben, wird in einer Brennerflamme verbrannt, wobei eine heiße Schleife erhitzt wird. Dann verschmiert die gekühlte Schleife einen Tropfen der Aufschlämmung auf Glas. Der Schmierbereich sollte mit einem Durchmesser von 1,5 2 cm liegen. Der Abstrich muss mit einer einheitlichen Materialverteilung dünn sein. Wenn der Abstrich aus einer auf einem flüssigen Nährstoffmedium angebauten Kultur hergestellt wird, erhalten sie dann die gleichen Sterligkeitsregeln, dadurch, dass sie einen Tropfen einer Schleife oder Pipette erhalten und auf die Mitte von fettarmem Glas auftragen. Die Pipette mit einem Kulturrückstand wird mit einer Desinfektionsmittellösung in ein Gefäß eingetaucht. Der Tropfen ist gleichmäßig auf das Glas bakteriologische Schleife verteilt. Die Schleife brennt in den Flammenbrenner und legte ein Stativ oder in ein Glas ein. Der Abstrich wird in der Luft oder in einem warmen Luftstrahl getrocknet, der ihn für Längsrippen über dem Flammenbrenner hält. Die Grenzen des Abstrichs werden vom Wachsstift auf der Rückseite des Glases abgegrenzt, und auf der Seite des Abstrichs an einem Endglas legte die Anzahl der Droge. Für diese Markierungen ist es leicht, sich auf den Ort des Abstrichs auf dem Glas zu konzentrieren. Getrockneter Abstrich fixiert. Die Fixierung verfolgt folgende Ziele: 1) Töte Microbes, was das Medikament sicher macht, wenn weitere Arbeit; 2) Befestigen Sie Mikroben mit dem Glas, so dass sie sich beim Malen und Waschen mit Wasser nicht abwaschen; 3) Verbessern Sie die Anfälligkeit der Farbe. 28.
29 Die einfachste, am besten geeignete für alle mikrobiologischen Objekte und die häufigste Methode in der Praxis fixiert in der Brennerflamme. Dafür wird das Subjektglas 3 4-fach durch den heißen oberen Teil der Brennerflamme durchgeführt, was verhindert, dass es übermäßige Überhitzung des Arzneimittels verhindert, um die Denaturierung von Protein und Störungen der Struktur und der Morphologie von Bakterien nicht zu verursachen. Unterscheidung einfacher und komplexer Differentialfärbemethoden. Einfache Farbnutzung zur Erkennung von Mikroben im untersuchten Material, bestimmen ihre Menge, Form und Position. Eine einfache Färbung besteht darin, auf ein Medikament einer einzelnen Anilinfarbe anzuwenden. Am häufigsten für diese Zwecke, rotfarbene Farben, sowie eine alkalische Lösung von Methylenblau (Enek Lefball) Blue Malerei. Färbungstechnik: Eine gut feste Zubereitung befindet sich in einem Abstrich auf einer Glasbrücke über dem Bad. Auf der Oberfläche des Abstrichs der Pipette oder vom Tropfer wenden sie eine der angegebenen Farben an. Fuchsin wird an einem Abstrich von 1 3 Minuten aufbewahrt und blau 3 min. Die Farbe mit Abstrich wird abgelassen, das Medikament wird mit Wasser gewaschen, in Luft getrocknet oder vorsichtig mit Filterpapier geklemmt. Ein Tropfen Tauchöl wird auf den getrockneten Abstrich aufgebracht, wobei das Medikament an der Grenzfläche des Mikroskops und der Mikroskopie mit einer Tauchlinse (90) in das übertragene Licht angeordnet ist. Differentialmethoden der Malerei Bakterien. Komplizierte Färbemethoden sind bei der Bestimmung und Differenzierung verschiedener Arten von Mikroben von großer Bedeutung. Sie basieren auf den Besonderheiten der physikochemischen Struktur der mikrobiellen Zelle und werden für eine detaillierte Untersuchung der Struktur der Zelle eingesetzt und das Erkennen von markanten Merkmalen relativ zu einigen Farbstoffen. Mit diesen Verfahren sind Abstrich mit mehreren Farben lackiert und werden zusätzlich mit Kautschuken oder Verfärbungen mit Alkohol, Säure usw. behandelt. Zu diesen Verfahren gehören das wichtigste Färbemethode zur Differenzierung von Bakterien in Gramm. Gleichzeitig ergibt sich das Verfahren 29
30 Die Fähigkeit von Bakterien, den Farbstoff oder Diskussion in Alkohol zu halten, der mit der chemischen Struktur der Zellwand verbunden ist. Alle Bakterien auf der Struktur der Zellwand sind in zwei Gruppen unterteilt: 1) Der gram-positive Gramittist und 2) sind nicht durch gramnegative Gramm lackiert. Die Haltung gegenüber einer Grammfarbe ist ein so wichtiges Differentialzeichen von Bakterien, das notwendigerweise in ihrer Charakterisierung erwähnt wird und als taxonomisches Zeichen dient. 30 Das Färbemethoden in Bezug auf ein Gramm für einen festen Abstrich leitet einen Streifen von Filterpapier, vor einem Gent-GECANE. 3 5 Tropfen Leitungswasser werden auf dem Streifen aufgebracht. Nach 1 2 Minuten wird das Papier von Pinzetten entfernt und die Lösung wird in das Medikament gegossen. Nach 30 Sekunden 1 min ist die Lösung des Lugolas abgelassen. Es werden mehrere Tropfen von 96 oralen Alkohol angewendet. 1 min zum Verschwinden von Sulpure-Pips blühen. Die Zubereitung wird mit Wasser gewaschen. Fuchsin wird auf den Abstrich gegossen und 1 2 Minuten standhalten. Die Farbe wird abgelassen, das Medikament wird mit Wasser gewaschen, mit Filterpapier getrocknet. Mikroskopisch mit Tauchsystem. Gram-positive Bakterien sind in lila-blauem (zum Beispiel einen Zauberstab aus öliger Säuregermentierung Clostridium Pasteurianum) und gramnegativ in pink-rotem (Escherichia Coli's Dintinal Zauberstab) lackiert. Neben dieser traditionellen Färbungmethode in Bezug auf Gramm gibt es eine schnelle und einfache Methode zur Differenzierung von Gramm ohne Färbung. Bakterienzellen (besser als 1 2 Tage) werden in einem Tropfen von 3% KOH auf dem Schlitten platziert, mit kreisförmigen Bewegungen gerührt, und nach 5 8 mit der Schleife mit der Schleife stark erhöht. Die Suspension von gramnegativen Bakterien wird viskosen und streckt sich um die Schleife, wodurch Schleimspeisen bildet. Gramm-positive Bakterien sind gleichmäßig in einem Tropfen Alkali (wie in Wasser) verteilt. Die Reaktion gilt als negativ, wenn die Bildung von Schleimgewichten nicht für 60 s beobachtet wird. Eine Erhöhung der Viskosität wird durch Lyse von Zellwänden von gramnegativen Bakterien in Lösung verursacht
31 Alkalis und DNA-Freisetzung. Das Differenzierungsverfahren von Bakterien durch Gramm ohne Färbung sollte nur zur vorläufigen Diagnose verwendet werden oder das beispielhafte Verhältnis von Kolonien von gram-positiven und gramnegativen Bakterien zählen. Die Identifizierung von lebenden und toten Zellen durch das Verfahren zum Färben von Methylenblau Die Anzahl der lebenden und toten Zellen kann durch die Lösung durch eine Lösung von Methylenblau bestimmt werden. Das Verfahren basiert auf verschiedenen Permeabilität von lebendigen und toten Zellen von Mikroorganismen. Die zelluläre Permeabilität in toten Zellen ist gebrochen, so dass der Farbstoff fließend durch die zytoplasmatische Membran läuft und durch Protoplasma adsorbiert ist. Unter dem Mikroskop sehen tote Zellen blau aus, lebendig mit farblosen oder Palegolubes. Die Farbe ist wie folgt: Ein Tropfen von 2% der methylenblauen Lösung wird auf den Schlitten angelegt, mit Beschichtungsglas bezogen, überschüssige Farbe wird durch ein Stück Filterpapier verzögert. Das Medikament wird unter dem Mikroskop betrachtet, in 10 Sichtfeldern wird die Anzahl der lebenden und toten Zellen berücksichtigt; Die Anzahl der toten Zellen wird in% ausgedrückt. Beispiel: Die durchschnittliche Anzahl der lebenden Zellen in einem Sichtfeld 10, der durchschnittlichen Anzahl der toten Zellen in einem Sichtfeld 5, gesamtzahl Die Zellen in einem Sichtfeld der Zellen 100% 5 Zellen x x 33.3% 15 somit betrug die Anzahl der toten Zellen in der untersuchten Suspension von Mikroorganismen 33,3%. Die Bestimmung der Zellgrößen zur Bestimmung der Größe der Zellen von Mikroorganismen ist erforderlich, um ein spezielles Okular mit einem Skalene (Okular-Mikrometer) und einem Mikrometerobjekt zu haben. Okulares Mikrometer, bei 31
32 Der einfachste Fall ist eine Glasplatte mit einem darauf angelegten linearen Skala, der in das Okular investiert ist (Abb. 14A). Das Mikrometerobjekt ist ein Schieber, in dem in der Mitte mit einer linearen Skala von 1 mm lang graviert ist, mit einer Abteilung von 10 μm. Vor der Messung ist es notwendig, den Preis der Spaltung des Okularmikrometers für jede Erhöhung des Mikroskops zu ermitteln. Dafür wird das Mikrometerobjekt auf dem Probanden des Mikroskops angeordnet und gilt als Medikament; Gleichzeitig wird einer der sichtbaren Abteilungen des Mikrometersobjekts mit einer Nullmarke der Okular-Mikrometer-Skala kombiniert, und es besteht ein Zufall von Divisionen derselben Skala (Abb. 15). Berechnen Sie, wie viel Augen- und Zielbereiche auf dieses Segment fallen, und berechnen Sie den Preis der Spaltung des Okular-Mikrometers. Wenn Sie dann die Drogenmikroorganismen anstelle des Mikrometers anstelle des Mikrometers anstelle des Mikrometers angeben und betrachten Sie es 32
33 Mit der gleichen Vergrößerung können Sie die Größe der mikrobiellen Zelle unter Verwendung des Augenmikrometers als Lineal messen. Bei genauen Messungen wird ein spezielles Okular-Mikrometer mit einer Gleitnull-Marke verwendet, die mit der Messtrommel zugeordnet ist (Fig. 14B). Sie können die Größe der Mikroorganismen mit einer Genauigkeit der Zehntel des Mikrometers bestimmen. Die Nullmarke ist die doppelte vertikale Linie, in der die Kreuzung zweier dünner Linien in Form eines Kreuzes entspricht. Vor den Messungen ist es notwendig, den Preis für die Teilen der Skala der Messtrommel zu kennen. Die Referenz ist das Mikrometerobjekt. Die Drehung der Messtrommel, die Nullmarke, wird mehrere Abteilungen des Mikrometersobjekts anfahren. Die doppelte vertikale Linie zeigt die Anzahl der vollen Umdrehungen der Messtrommel. Durchführen von Messungen von Mikroorganismen, bewegen Sie die Nullmarke entlang des Objekts und berücksichtigen Sie das Zeugnis der Messtrommel. Praktischer Teil Der Zweck der Arbeit, die Hauptmethoden des Studiums der Morphologie von Mikroorganismen zu beherrschen. 33.
34 Verfahren zur Durchführung von Arbeit 1. Bereiten Sie feste Zubereitungen von Milchsäurebakterien aus Biocyphyra und Acidophilin vor. 2. Führen Sie das Gemälde durch das Gramm Bacillus Subtilis-Zellen (Gramm +) und Escherichia coli (Gramm) durch. 3. Bestimmen Sie die Sacchaomyces cerevisiae-Hefezellen. 4. Bestimmen Sie die Anzahl der lebenden und toten Saccharomyces cerevisiae-Zellen in der Hefe-Suspension. 34 Der Inhalt des Berichts 1. Die Morphologie der Zellen von Milchsäurebakterien (Zeichnungen von festen Medikamenten von Milchsäurebakterien mit einem Hinweis auf eine Erhöhung des Mikroskops). 2. Figuren mit festen Zubereitungen von gramnegativen und grampositiven Bakterien. 3. Bestimmung des Preises des Teilens der Augenmikometermesstrommel. 4. Saccharomyces cerevisiae Hefezellengröße. 5. Die Anzahl der lebenden und toten Zellen in der Hefe-Suspension. Kontrollfragen 1. Wie erstellt man eine feste Bakterienvorbereitung? 2. Was ist der Grund für die Unterscheidung von Bakterien in der Farbe des Gramm? 3. Was ist die Farbmethode auf Gramm? 4. Wie erstellt man die Größe der Mikroorganismen? 5. Wie ermittelt man die Anzahl der lebenden und toten Zellen von Mikroorganismen durch die Farbe des stilvollen Blaublau? Thema 2. Kultivierung von Mikroorganismen: Die Prinzipien der Erstellung von Nährmedien; Sterilisationsmethoden; Methoden zur Ernte und Singen von Mikroorganismen. Klassifizierung und Herstellung von Nährstoffmedien kultivieren Mikroorganismen Es bedeutet künstlich, Bedingungen für ihr Wachstum zu schaffen. Für den Kultivieren.
35 Mikroorganismen im Labor oder in der Industrie werden Nährstoffmedien verwendet, die alle Substanzen enthalten, die für die wichtige Tätigkeit von Mikroorganismen erforderlich sind. Von der Umwelt kommen Nährstoffe in die Zelle des Mikroorganismus und tauschen Produkte von der Zelle am Mittwoch aus. Für die lebenswichtige Aktivität von Mikroorganismen, Wasser, Kohlenstoff, Sauerstoff, Stickstoff, Schwefel, Phosphor, Kalium, Calcium, Magnesium, Eisen- und Spurenelemente sind erforderlich. Alle diese Substanzen sollten im Nährmedium enthalten sein. Auch ohne eines von ihnen ist es überhaupt nicht oder es wird unbedeutend sein. Kohlenstoff, Wasserstoff, Stickstoff, Phosphor und Schwefel werden biogene Elemente genannt, da sie etwa 90 95% der trockenen Zellenmasse ausmachen. Kalium, Magnesium, Calcium und Natrium werden Makroelemente oder Ascheelemente bezeichnet. Sie machen bis zu 5 10% der trockenen Masse der Zellen aus. Bügeleisen, Mangan, Molybdän, Kobalt, Kupfer, Vanadium, Zink, Nickel und einige andere Schwermetallkationen werden Spurenelemente bezeichnet und bilden den Prozentsatz der trockenen Masse der Zellen. Der größte Wert Für jeden lebenden Organismus hat Kohlenstoff. Es ist Teil aller organischen Moleküle im Käfig, und seine Aktienkenntnisse entfallen etwa 50% der trockenen Biomasse. In Bezug auf Kohlenstoff sind alle Organismen in autotrophische und heterotrophische. Autotrofa als Kohlenstoffquelle verwenden Kohlendioxid. Heterotrophen benötigen fertige organische Verbindungen. Die Kohlenstoffquelle für die meisten Mikroorganismen kann als verschiedene organische Substanzen dienen: Proteine \u200b\u200bund ihre Spree-Produkte, Kohlenhydrate, Fette, Kohlenwasserstoffe. Stickstoff in seinem Wert ist nach Kohlenstoff an zweiter Stelle. Stickstoff ist Teil von Aminosäuren und anderen zellulären Komponenten, die die Lebensfähigkeit von Organismen gewährleisten. Stickstoff ist 14% der Trockensubstoffe der Zellen. Stickstoffquelle dienen stickstoffhaltigen organischen oder mineralischen Verbindungen. Lösungen von Ammonium- und Nitraten sind am häufigsten Mineralstickstoffquellen. Proteine, Aminosäuren, Nukleotide werden als organische Quellen von Stickstoff verwendet. Einige Prokaryoten können atmosphärische Stickstoff verwenden. 35.
36 Phosphor und Schwefel sind Teil wichtiger Zellbiopolymere. Phosphor (3% der Zellentrockensubstanz) ist Teil des Nukleotids und ATP und Schwefel (weniger als 1%) in einige Aminosäuren. Die Quelle des Leuchtstoffs wird üblicherweise verwendete Phosphate und Schwefelschwefel. Phosphor und Schwefel können auch in organischen Verbindungen eingesetzt werden. Für Mikroorganismen sind Makroelemente in kleinen Mengen erforderlich: Ionen alkali Metalle (NA +, K +) und Erdalkalimetalle (MG 2+, CA 2+), die eine wichtige Rolle im Leben der Mikroorganismen spielen. Makroelemente in mikrobiellen Zellen sind notwendig, um Permeabilität, osmotischer Druck, pH-Werte zu regulieren. Zusätzlich zu diesen Metallen ist eine Anzahl von Elementen in Spurenmengen erforderlich, um Mikroben (Spurenelemente) zu erhöhen. Die mineralische Zusammensetzung des Nährmediums bildet die Verteilung elektrischer Ladungen auf der Zelloberfläche. Das Ändern des elektrischen Zellenpotentials kann ihre physiologischen Aktivitäten ändern. Eine der wichtigsten Funktionen der Spurenelemente zur Teilnahme an der enzymatischen Katalyse. Derzeit ist der vierte Teil aller Enzyme in der Zelle mit Metallen verbunden. Zusätzlich zu den Hauptkomponenten des Nährmediums für die normale Entwicklung einiger Mikroben sind selbst zusätzliche Substanzen erforderlich, die als "Wachstumsfaktoren" bezeichnet werden. Wachstumsfaktoren sind der kombinierte Name verschiedener chemischer Natur Verbindungen. Hauptsächlich diese organischen Substanzen, deren Zugabe in sehr geringfügigen Mengen das Wachstum und die Wiedergabe von Mikroorganismen stimuliert. Sie haben für Mikroben gleich Bedeutung, dass Vitamine für höhere Organismen. Rostow-Faktoren sind hauptsächlich Vitamine der Gruppe B, die die Rolle von Regulierungsbehörden und metabolischen Stimulanzien in Mikroben oder Aminosäuren spielen. Die Wachstumsfaktoren verwenden Hefe-Autolysat, Hefeextrakt, einheimische Proteine \u200b\u200b(Blut, Serum) usw. Die Bedürfnisse nach Mikroorganismen von Mikroorganismen sind sehr unterschiedlich. Aus diesem Grund gibt es keinen universellen 36
37 Medien gleichermaßen geeignet, um jeden Mikroorganismus zu kultivieren. Je nach Zwecke der Kultivierung und den Bedürfnissen dieses Mikroorganismus unterscheiden sich die Nährstoffmedien in drei Zeichen: je nach Zusammensetzung, körperlicher Erkrankung und beabsichtigter Zweck. In der Zusammensetzung sind Nährstoffmedien in zwei Gruppen unterteilt: 1) natürlich (natürlich); 2) künstlich (synthetisch). Natürlich genannte Umgebungen mit einer unbestimmten chemischen Zusammensetzung, da sie Produkte von Pflanzen oder tierischen Ursprungs, Verschwendung von verschiedenen Branchen mit organischen Verbindungen enthalten. Natürliche Nährstoffmedien sorgen für das intensive Wachstum einer Vielzahl von Mikroorganismen. Sie enthalten einen reichen Satz organischer und anorganischer Verbindungen, einschließlich aller notwendigen Elemente und zusätzlichen Substanzen. Zum Beispiel werden im Labor die folgenden Nährstoffe am häufigsten verwendet. 1. Fleisch-Peper-Brühe (MPB) Der Fleischextrakt enthält die Produkte des unvollständigen Zerfalls Pepton-Proteins, in dem es einen organischen Kohlenstoff, einen organischen Stickstoff, ein phosphorhaltiges, schwefelhaltiges organisches Material gibt. MPB enthält auch mineralische Substanzen notwendige Mikroorganismen. MPB wird beim Anbau vieler Bakterienarten verwendet. 2. Der Bierkeilauszug aus Sponame-Körnern von Gerste enthält als Quelle von Zuckerkohlenstoff (hauptsächlich Maltose), stickstoffhaltige Substanzen, Escheelemente, verschiedene Wachstumsfaktoren und Vitamine der Gruppe V. Bier Sushlo ist eine gute Umgebung für die Entwicklung vieler Mikroorganismen, insbesondere Hefe, Mold-Pilze. Gute natürliche Umgebungen sind Milch, Kartoffeln, Rasen von Früchten und Gemüse. Die Industrie wird in der Regel halbynthetische oder natürliche Medien verwendet. Sehr oft wird mikrobiologische Abfälle als Kohlenstoffquelle verwendet nahrungsmittelindustrie: Melassia (Zuckerabfall), 37
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Bundesamt für Bildung
Karatschay-Circassian State Technological Academy
Abteilung für Tierproduktionstechnologie
MIKROBIOLOGIE
Methodische Anweisungen
labor- und praktische Studentenkurse
agrar-Institut.
Cherkessk - 2010.
Auf der Grundlage von ungefähren und arbeitsprogramm im Kurs "Microbiology" in Übereinstimmung mit dem Staat bildungsstandard. Höhere berufliche Ausbildung in der Spezialität 110305 "Technologie der Produktion und Verarbeitung von landwirtschaftlichen Produkten" und 110201 "Agronomie" (2000).
Auf dem Treffen der Abteilungsstühle (Protokoll von 2.07.2009) diskutiert
Genehmigt von der methodischen Kommission des Agrar-Instituts (Protokoll Nr. 6 vom 01.01.2001). Veröffentlicht nach Beschluss des pädagogischen und methodischen Rates der technologischen Akademie Karatschay-Cherkess State (Protokoll vom 01.01.2001)
Compiler:kandidat der biologischen Wissenschaften, assoziierter Professor , kandidat der Agrarwissenschaften, assoziierter Professor , assistent
Rezensenten: – kandidat der biologischen Wissenschaften
assoziierter Professor der Abteilung "Agronomie"
associate Professor der Abteilung "TPPZH"
Editor: K. S.-H. Wissenschaften, assoziierter Professor
Inhalt
Einführung ................................................. .............................................. .. 6.
1. Mikroskopie ............................................... ............................ 7.
1.1. Senkung der Mikroskopie .............................................. ...... .7.
1.1.1. Mikroskopgerät ................................................ ...... 7.
2. Arbeit mit Mikroorganismen ............................................. ........... acht
2.1. Methoden zur Herstellung von Drogen .............................................. . 8.
2.1.1. Sukhnika nimmt Kultur für Drogen ................................. 8
2.1.2. Die Untersuchung von lebenden Zellen von Mikroorganismen durch die Methode
gedrückte Tropfen ................................................ ................................ 8.
2.1.3. Feste Vorbereitungen von Mikroorganismen ........................... 9
Das Beleuchtungssystem befindet sich unter der Titelplatte. Der Spiegel spiegelt das Licht wider, das auf ihn in den Kondensator fällt. Eine Seite des Spiegels ist flach, der andere ist konkav. Bei der Arbeit mit dem Kondensator ist es notwendig, einen flachen Spiegel zu verwenden. Ein konkaver Spiegel wird beim Arbeiten ohne Kondensator mit kleinen Zoomlinsen verwendet. Der Kondensator besteht aus 2-3 Kurzfokusobjektiven, sammelt Strahlen, die vom Spiegel kommen, und lenken sie auf das Objekt. Der Kondensator ist beim Arbeiten mit Tauchsystemen erforderlich. Es gibt eine Iris (Blütenblatt-) Membran im Kondensator, bestehend aus Stahlkugelplatten.
Gemalte Zubereitungen werden mit fast vollständig offener Öffnung betrachtet, unlackiert - mit einer reduzierten Blende der Membran.
Linse - MultiPlay-System, auf deren Qualität das Bild des Objekts abhängt. Die äußere Linse wird als Front bezeichnet, es bietet eine Erhöhung. Die restlichen Linsen führen die Funktionen der Korrektur von optischen Mängeln aus.
Linse sind trocken und eingetaucht (Immersion). Bei der Arbeit mit trockenen Linsen befindet sich Luft zwischen der Frontlinse der Linse und dem Objekt der Studie. Bei der Arbeit mit einer Tauchlinse V \u003d 90er zwischen dem Abdeckglas und der Linsen der Linse ist der Brechungsindex, deren Brechungsindex nahe dem Brechungsindex von 1,515 bzw. 1,52 liegt. Die Linsen erhöhen sich in 8x, 40x und 90x.
Okular Es dient als direkte Fortsetzung der "Linsen" (Linsen) des menschlichen Auges.
Das Okular besteht aus zwei Linsen - das obere Augen und das untere Kollektiv, das im Metallrahmen geschlossen ist. Zweck des Okulars - eine Erhöhung des Bildes, die das Objektiv ergibt. Eine Erhöhung des Okulars ist auf seiner Felge eingraviert. Eine Erhöhung der Augenstaubseiten im Bereich von 4 bis 15x.
Ocaws gibt es verschiedene TypenUnd die Wahl hängt von der Linse ab. Mit einem Langzeitbetrieb mit einem Mikroskop verwenden Sie eine binokulare Düse, da er die Sichtbarkeit des Objekts verbessert, verringert die Bildhelligkeit und behält dadurch die Sicht.
Arbeit mit Mikroorganismen2.1. Methoden zur Herstellung von Drogen
2.1.1. Kultur, die Technik für die Zubereitungen nimmt
Die bakteriologische Nadel aus dem Röhrchen wird in der Flamme verbrannt, eine geringe Menge an mikrobialer Masse dauert. Wenn die Kultur flüssig ist, ist es besser, die Schleife dafür zu nutzen, in anderen Fällen eine Nadel.
2.1.2. Studie von lebenden Zellen von Mikroorganismen durch die Methode des zerquetschten Tropfens
Erkunden Sie lebende Zellen von Mikroorganismen durch das Verfahren von zerquetschten Tropfen, indem Sie das Objekt mit Sanitärfarbstoffen präfänken - lebenswichtige Farbe(Farbstoffe: Methylenblau, neutralrot in Konzentrationen von 0,001 bis 0,0001%).
Mikroskopische Medikamente, leicht dimmendes Sichtfeld; Der Kondensator ist leicht abgesenkt, der Lichtstrom wird durch einen konkaven Spiegel geregelt. Zunächst verwenden sie einen kleinen Anstieg - die Linse 8X, nachdem die Referenzkante erfasst wird, wird die Linse 40x oder das Eintauchen (90x) installiert.
Bei der Verwendung des zerkleinerten Tropfenverfahrens auf dem reinen Glasschieber wird ein Tropfen Leitungswasser aufgetragen. Es macht Kultur und mischen mit Wasser. Überschüssiges Wasser wird durch Filterpapier entfernt. Bei Verwendung einer Tauchlinse auf das Gleitglas von Zedernöl und Mikroskopie.
2.1.3. Feste Vorbereitungen von Mikroorganismen
Feste Präparate beinhalten eine solche Behandlung von lebenden Zellen, wodurch es möglich ist, den Lebensdauer der Lebensdauerprozesse im Objekt schnell zu unterbrechen, wobei seine feine Struktur aufbewahrt wird. Infolge der Fixierung sind die Zellen fest an das Glas und die bessere Punktzahl befestigt. Die Fixierung ist beim Arbeiten mit pathogenen Mikroorganismen (für Sicherheitszwecke) erforderlich.
Erfassen Sie einen Abstrich. Ein Tropfen Leitungswasser wird auf ein sauberes Skimmglas aufgetragen. Zum Entfettung verwenden die Gläser in einem 1: 1-Verhältnis ein Gemisch aus Ethylalkohol und Schwefelether. Die kalzinierte bakteriologische Nadel aus dem Reagenzglas mit Kultur nimmt eine kleine Menge mikrobieller Masse und macht einen Tropfen Wasser. Der Tropfen dornt die Schleife auf das Glas auf dem Quadrat von etwa 4 cm2.
Wenn die Suspension dick ist, wird er zuerst mit Wasser gezüchtet. Dazu dauert die calcinierte Schleife etwas Suspension und transferiert in einen Tropfen Wasser in einen anderen Schieber. Die Suspension der normalen Dicke wird mit einer dünnen Schicht auf dem Glas verschmiert, dann wird der Abstrich in Luft bei Raumtemperatur oder mit schwacher Erhitzung getrocknet, wobei das Medikament hoch über dem Flammenbrenner hält. Die starke Erhitzung des Arzneimittels während des Trocknens wird nicht empfohlen, um eine Koagulation von Proteinen, verzerrenden Struktur und Form von Zellen zu vermeiden. Getrocknete Vorbereitung fixiert.
Den Abstrich fixieren Es wird ausgeführt über Flammenbrenner.oder mit Hilfe von Chemikalienunion. Im ersten Fall wird das Medikament drei- bis viermal langsam von der Unterseite über der Flamme des Brenners durchgeführt, im zweiten Fall werden Chromverbindungen verwendet: Formalin, Osmiumsäure, Aceton. Eine der gängigen Fixiertechniken ist die Verarbeitung des Arzneimittels mit 96% Alkohol oder einer Mischung aus gleichen Volumina Ethylalkohol und Ether (NikiForov-Flüssigkeit). Dafür werden Medikamente mit 10 bis 30 Minuten in eine Fixierflüssigkeit eingetaucht.
Das Medikament färben. Ein paar Tropfen Farbstoffläufe werden auf den Abstrich aufgetragen. Je nach Art des Farbstoffs und dem Zweck der Studie variiert die Färbungdauer von 1 bis 5 Minuten, in einigen Fällen bis zu 30 Minuten. Am Ende der Färbung wurde das Medikament mit Wasser gewaschen, Wasser wird durch Filterpapier entfernt, in Luft und Mikroskopie getrocknet.
Es gibt einfache und differenzierte Farbmethoden.
Zum einfach Die Färbung wird von einem einzelnen Farbstoff (Methylenblau, Fuchsin, gereiztes Lila) verwendet, die gesamte Zelle wird bewertet.
Zum differenziert Farbe separate Zellstrukturen werden durch verschiedene Farbstoffe (Malerei von Gramm, Spore-Malerei) lackiert.
Forschung der Morphologie Mikroorganismen3.1. Form der Zellen
3.1.1. Bakterien
In der Form müssen alle Bakterien in kugelförmige (Kokken) unterteilt werden (Kokken), reizförmig und gewunden.
Kugelförmige Bakterien - Cockki.
1. Micrococci -einzelne sphärische Zellen ( Micrococcus. agilis.).
2. Diplococci -zeichenköche mit zwei verbunden. ( Azotobacter. chroococcum).
3. Tetracokki- Charakter Cocci, mit vier verbunden.
4.Streptokokken- Kugelbakterien, die in Ketten verbunden sind (hauptsächlich palogene, sowie Milchsäurebakterien Lactococcus laktis.).
5. Sarkines - Zeichenbakterien, die in 8 Zellen gruppieren, ergeben sich als Ergebnis der Zellteilung in drei zueinander senkrechten Ebenen. Einige Arten von Sarcin bilden groß-abgebrochene Pakete, in denen sich 4 Sagen in jeder Seite befinden. Typischer Vertreter Sarkina. flava. (Gelbes Sarcin) ist der häufigste Vertreter der Luftmikroflora.
Alle sphärischen Formen von Bakterien, außer Streptoctococcus. laktis., surfen auf festen und lackierten Fuchic-Vorbereitungen.
Roldenförmige Bakterien. Dazu gehören Formulare, die keine Streitigkeiten bilden (Geburt Pseudomonas., Achromobacter., Lactobacillus. et al.) Und Bilden von Streitigkeiten (Geburt Bazillus., Clostridium. usw.).
Unglücklicher Essstäbchen Pseudomonas. stuckeri. – das Zytoplasma ist gleichmäßig blockiert.
Sporenbildende Stöcke Bacillus mycoides.und Bacillus mesenttericus.Unter dem Mikroskop sieht ungleichmäßig aus. Streitigkeiten werden nicht als dichtere Strukturen befleckt. Zellen Bazillus. mycoides Es ist mit Ketten gelegen, es ist Streptobacillia.
Rasierte Bakterien werden auf festen und lackierten Zubereitungen betrachtet.
Kreuzform
1. Vibrionen. – leicht gekrümmte Zellen.
2. Spirillas können in Form eines russischen Buchstabens C, zwei Locken in Form eines lateinischen Buchstabens oder mehrfach - in Form einer Spirale aufweisen.
3. Spiroketes - lange und dünne Zellen mit vielen Locken; Die Länge der Zellen übersteigt die Dicke von 5-200-fachen.
Vibrionen und Spirillas werden zweckmäßigerweise auf eine feste und lackierte Zubereitung aus Dung Alive angesehen, die zuvor innerhalb weniger Tage im Thermostat inkubiert wurden. Aus einer Vielzahl von Mikroorganismen bei dieser Zubereitung stoßen häufig Crevolutionen an.
Mit Spirochtami können Sie sich auf ein festes bemerktes Arzneimittel der Zahnplakette kennenlernen, die Vorbereitungen des Pflasters aus dem kühlsten Zahn sind besonders erfolgreich. Zahnmedizinische Spirochen sind sehr dünn, haarförmig, kurz (nur 2-3 Locken).
3.1.2. Aktinomycets.
Actinomycetes sind strahlende Pilze. Mycelium Actinomycetes auf Nährstoffmedien differenziert: Ein Teil wird in das Substrat (Substrat Myzelium) eingetaucht, der andere über dem Substrat (Luftmyzel) ist.
Viele Vertreter von Actinomyceten produzieren Pigmente, so dass ihr Luftmyzel und vor allem die Kolonien in blauen, blauen, lila, rosa, braunen, braunen oder schwarzen Farben lackiert. Actinomycetes sind in den entsprechenden Farben mit einem Nährmedium lackiert.
Die Folie der Actinomycet-Kolonie wird mit dem Medium auf den Schlitten angelegt. Das zweite obere Glas wird dieses Stück fest auf das Glas gedrückt, zerquetscht und auf dem Glas verschmiert. Das Medikament wird getrocknet, fixiert, Farbe, surfen unter einem Mikroskop, wo mycelische Einzelzellenfilamente teilweise sichtbar sind.
3.1.3. Hefe
Hefe - Einzellell mikroskopische Pilze sind vielfältig in Form: Ellipse, Birne, abgerundet, zylindrisch. Wir multiplizieren sich in vegetativ und sexuell.
Für Laborunterricht verwenden Sie Bäckereihefe. Ein kleines Stück Hefe-Masse ein paar Stunden vor dem Unterricht befinden sich in warmem cremigem Wasser und setzen an einem warmen Ort. Die mittlere Flüssigkeit ist gebildet. Der Tropfen dieses Fluids wird auf das mit Beschichtungsglas bedeckte Schlittenglas aufgetragen, einen Tropfen von Zedernöl auftragen und durch das Medikament mit einem Tauchsystem aussehen. Kerzen- und Trennzellen sind sichtbar.
3.2. Chemische Forschungsmethoden.
3.2.1. Farbzellen von Mikroorganismen von Gramm
Diese Methode der Differenzierung von mikrobiellen Zellen basiert auf dem Unterschied in chemische Zusammensetzung Zellschalen In den Zellen einiger Arten von Mikroorganismen ist ein in Alkohol unlösliches Iod eine Verbindung von Jod mit dem Hauptfarbstoff, und in anderen Spezies erscheint diese Verbindung vorübergehend und nach der Verarbeitung mit Alkohol löst sich auf. Mikroorganismen der ersten Gruppe angerufen gramm-positiv zweite - grammnegativ.
Technik Färbung in Gramm. Drei dünne Abstriche verschiedener Kulturen von Mikroorganismen werden auf das entfettete Glas Mikroorganismen angewendet (zwei davon steuern, mit einer bekannten Haltung gegenüber Grammfarbe). Die Abstriche werden in der Luft getrocknet, über die Flamme des Brenners fixiert und 1 min mit einer Phenollösung eines Genitons (oder kristallinem Purpur) gefärbt, wobei ein Glas in einer leicht geneigten Position hält. Dann wird der Farbstoff abgelassen und ohne das Waschen des Arzneimittels mit Wasser 1 min mit einer Lösung von Lugola (bis zum Abstrich des Abstrichs) darauf auf sie aufgetragen. Glas wird in einer geneigten Position gehalten. Das Medikament ohne Waschen mit Wasser wird behandelt, kontinuierlich schwankend, 96% Alkohol 15-20 s. Es ist wichtig, sich an die Verfärbungszeit einzuhalten, da gram-positive Zellen, wenn der angegebene Zeitraum überschritten wird, verfärbt werden.
Mit Wasser waschen, wird das Medikament 1 min mit Fuchsin pfff gefärbt. Gram-positive Mikroorganismen erwerben eine dunkelviolette Farbe, und die gramnegative Farbe ist in der Farbe der zusätzlichen Färbung (Fuchsin) lackiert.
Die Ergebnisse der Malerei in Gramm hängen vom Alter der Kultur ab: In alten Kulturen werden tote Zellen immer sauber gemalt. Daher ist es besser, junge einzelne Kulturen zu verwenden.
Gute Objekte zum Färben von Zellen von Mikroorganismen von Gramm sind Hefe, Bacillus mesenttericus. oder Bacillus subtilis. (Gramm-positiv) und Escherichia Colis Darmstab (Gram-negativ).
Farbstoffe und Reagenzien zum Färben in Gramm.
1. Phenolische Lösung von Gentian Violet:graycian Violet - 1 g, Alkohol 96% - 10 ml, Phenolkristallin - 2 g, destilliertes Wasser - 100 ml.
In einigen Fällen gelten heciana Alkohol-Lösung.lila:gEZIER Lila (oder kristallines violett) - 1 g, Alkohol 96% (Rectifitis) - 100 ml, Glycerin - 5 ml. Die Mischung wird 24 Stunden in den Thermostat eingesetzt, dann filtriert.
2. Lösung von Lugola.(verursacht Kalium - 2 g, kristallines Jod - 1 g, destilliertes Wasser - 300 ml). Zunächst wird eine konzentrierte Lösung von Kaliumjodis in 5 ml Wasser hergestellt, das Jod wird darin gelöst, dann wird Wasser zu 300 ml zugesetzt.
3. Alkohol96%.
4. Fuche Pfefefefe.(wässrige Lösung von carbolischem Fuchsina-Zerfall): 1 ml carbolisches Fuchsina-Zer- und 9 ml destilliertes Wasser. Es wird wie folgt hergestellt: 1 g Fuche, 5 g Phenolkristallin, 96% des Alkohols - 10 ml, ein paar Tropfen Glycerol, 100 ml destilliertes Wasser, Fuchsin wird in Ethanol gelöst, add-gelöste Phenol in Wasser . Die Lösung wird mehrere Tage gerührt und gelassen. Vor der Verwendung wird es filtriert.
3.2.2. Farbstreit für Bakterien
Die Sporen von Bakterien im Vergleich zu vegetativen Zellen sind sehr widerstandsfähig gegen nachteilige Umgebungsbedingungen. Sie sind abgerundete, ovale oder Ellipse-Formationen. Wenn der Durchmesser des Streits den Durchmesser der Zelle nicht überschreitet, in der der Streit ausgebildet ist, wird die Zelle genannt bacillina, Wenn es je nach Anordnung des Streits in der Mitte oder am Ende der Zelle übersteigt, wird diese Zelle jeweils aufgerufen closeridial. oder plexldial. . In der Bacillina-Zelle kann der Streit in der Mitte der Zelle platziert werden - zentralposition am Ende - terminalund näher an einem der Enden - santreininal.position.
Bei der Beobachtung von lebenden Sporenbildungsbakterien können ihre Streitigkeiten durch eine stärkere Brechung von Lichtstrahlen entlassen werden. Sports säurebeständig, so kaum mit Farbstoffen gefärbt. Dies ist die große Dichte der Schale, die geringe Konzentration in freiem Wasser und hohen Lipiden in Streitigkeiten. In gemalten Zubereitungen einfache Wege oder in Gramm bleiben Streitigkeiten farblos (Negative Farbe).
Alle Methoden des Malenstreits basieren auf einheitliches Prinzip: Zunächst werden die Streitigkeiten mit verschiedenen Substanzen behandelt: Chrom, Salzsäure, Schwefel, Essigsäuren, Ammoniak, Ätzmittel oder Wasserstoffperoxid, dann färben Sie die Zelle mit einem Streit, wenn er erhitzt wird und schließlich ein Zytoplasma erfärben und zusätzlich mit einem Kontrastfarbstoff färben .
Cily-Nielsen-Methode in der Muller-Modifikation.Bevor Sie den Abstrich von Bakterien auf der Flammenvorbereitung fixieren, bereiten Sie sich auf übliche Weise vor. Als nächstes wird eine 5% ige Chromsäurelösung auf ein in der Flamme und das gekühlte Arzneimittel aufgebracht. Nach 5-10 Minuten wird es mit Wasser gewaschen. Das Medikament ist mit einem Streifen von Filterpapier bedeckt und ist reichlich das Papier des Carbolovy Fuchsin zu benetzen. Das Medikament vor der Flamme vor dem Erscheinungsbild der Dämpfe (nicht bis zum Kochen) vorheizen, und nehmen Sie es an der Seite und fügen Sie einen neuen Teil des Farbstoffs hinzu. Dieses Verfahren wird innerhalb von 7 Minuten durchgeführt. Es ist wichtig, dass der Farbstoff verdampft, aber das Papier fütterte nicht. Nach dem Abkühlen wird es entfernt, das Medikament wurde mit Wasser gewaschen und mit Filterpapier gründlich eingeklemmt. Infolge einer solchen Behandlung werden die Zellen mit Streitigkeiten gleichmäßig verkleinert.
Als nächstes erraten das Zytoplasma der Zellen (aber nicht nicht Streitigkeiten), was 1% ige Lösung von Salzlorsi- oder Schwefelsäuren für 15-30 s behandelt. Bei der Herstellung des Wirkstoffstreits Bazillus. mycoides oder Bazillus. mesentericus. Es wird empfiehlt, das Zytoplasma 16-18 C zu verfärben (laut von 21 bis 37-40 lauten). Bei der Überschreitung dieser Zeit können Streitigkeiten entmutigt werden. Dann wurde das Medikament mit Wasser gewaschen und mit Methylenblau mit 2 Minuten gefärbt.
Die Färbung stellt sich darum, dass der Kontrast und die hellen roten Streitigkeiten eindeutig auf einem blauen Cytoplasm-Hintergrund hervorsteht.
Peshkova-Methode. Das Medikament ist in der Flamme, die methylenblaue Lefflera gießen, fixiert, bringt es zu einem Kochen und kochen Sie 15-20 s, hält ein Glas über die Flamme. Der Abstrich wurde mit Wasser gewaschen und für 30 mit einer 0,5% igen wässrigen Lösung von neutralem Rot gefärbt. Wieder einmal gewaschen, getrocknet und weiter erkunden Sie das Medikament mit Öleintauchen der Linse. Streitigkeiten sind blau oder blau, Cytoplasma - in Rosa lackiert.
Für das Studium des Streits können bequeme Objekte dienen Bazillus. mesentericus. oder Bazillus. mycoides Im Alter von 4 Tagen.
Reagenzien für Färbungssporen von Bakterien.1. Carbolic Fuksin.Körnig(Siehe 3.2.1).
2. Methylenblauexfflera.(Siehe 3. 2. .1).
3. Eine gesättigte wässrige Lösung von Methylenblau.2 g Farbstoff und 100 ml destilliertes Wasser.
4. Chromsäure,5% ige Lösung.
5. Salo.(oder schwefelsäure,1% ige Lösung.
4. Kultivierung von Mikroorganismen
4.1. Nährstoffmedien
4.1.1. Nährstoffmedien kochen.
Fleisch-Peper-Brühe (MPB).Zum Kochen von Fleisch-Peper-Media-Gebrauch fleischbrühewas wie folgt erhalten wird: 500 g fein gehacktes frisches Fleisch wird in einen emaillierten Saucepan von 1 l Leitungswasser gegossen, auf 50 ° C erhitzt und 12 Stunden bei Raumtemperatur oder 1 h bei 50-55 ° C gelassen. Fleisch wird gedrückt, der Extrakt ist mit einer Gaze mit einer Watteschicht gefüllt, kochen Sie 30 Minuten, um kolloidale Proteine \u200b\u200bzu koagulieren und zweimal filtriert (erstmals nach Gaze mit Baumwolle, zweiter Durchmesser). Das Filtrat wird mit Wasser bis 1 l gekrönt, in die Kolben gegossen, mit Baumwollstopfen geschlossen und bei 120 ° C 20 Minuten sterilisiert (die Stecker des Kolbens sind auf den Kappen aus Papier geschlossen).
Die Fleischbrühe kann jederzeit zur Herstellung von Medien verwendet werden. Wenn sie auf einmal vorbereitet sind, ist die vorläufige Sterilisation der Fleischbrühe nicht erforderlich.
Zur Herstellung von MPB auf 1 Liter Fleischbrühe addieren 5-10 g peper(Das erste Produkt der Proteinhydrolyse), um den Kaloriengehalt des Mediums und 5 g zu erhöhen crash Salzosmotische Aktivität erstellen. Das Medium wird auf die Auflösung von Pepton erhitzt, das ständig gerührt wird.
Stellen Sie die neutrale oder schwach alkalische mittlere Reaktion ein, steckt eine 20% ige Lösung von Na2c03 auf die Bildung eines nassen roten Lactiumpapiers. Um den pH-Wert der Umgebung zu überprüfen, ist es praktisch, den Indikator zu verwenden bromimolblau:1-2 Tropfen wird in einem Porzellanbecher mit einer Brühe gemischt. In dem neutralen Medium ist Brommat Blama ein Flaschengrün, in saurem Gelb, in alkalischem Blau.
Nach dem Einrichten des pH-Werts wird das Medium 5-10 Minuten wieder gekocht, und Proteine, die gelockt sind, wenn die Reaktion des Mediums geändert wird, durch ein Papierfilter filtriert, ohne die Brühe zu lernen oder mit Protein zu lernen. Dafür sind frische Eiweiß mit Double durch die Wassermenge geschlagen und mit der Brühe mit gekühlt bis 50 ° vermischt. Die Mischung wird auf schwacher Wärme von 10 Minuten gekocht, Rühren, dann filtriert. Transparente Fleisch-Peper-Brühe wird in die Röhrchen gegossen, mit Baumwollkorken abdecken und bei 120 ° C 20 min sterilisieren.
Fleisch-Peper-Agar (MPA).15-20 g Agar werden zu 1 Liter MPB hinzugefügt. Das Medium wird erhitzt, um den Agar (die Temperatur des Schmelzes - 100 ° C, Erstarrung - 40 ° C) aufzunehmen, die schwachalkalische Reaktion des Mediums mit einer 20% igen Lösung von Na2C03 einzugewiesen und durch den Trichter in den Reagenzgläsern verschüttet (ungefähr 10 ml Agar von Petri-Bechern und 5 ml, um abgeschrägte Agar - Pfosten zu erhalten).
Beim Verschütten von Agarkanten sollten die Schläuche trocken bleiben, ansonsten bleiben die Stecker an dem Glas. Reagenzgläser mit einem Medium werden in einem Autoklaven bei 120 ° C 20 min sterilisiert.
4.2. Sterilisationsmethoden
Sterilisation - Dies ist die vollständige Zerstörung von Mikroorganismen in Nährmedien, Geschirr usw.
Es gibt mehrere Sterilisationsmethoden. Wenden Sie häufiger Sterilisation mit Heizung an.
4.2.1. Flammend oder Kalzinieren
Es ist möglich, direkt zu lernen, bevor Platin-Schlaufen, Nadeln, Spateln, kleine Metallgegenstände (Schere, Lanzetten, Pinzetten) sowie Glasstöcke, Subjekt, Beschichtungsgläser usw. lernen.
4.2.2. Sterilisation trockener Hitze
Es wird zum Verarbeiten von Geschirr und trockenen Materialien wie Stärke, Kreide verwendet. In diesem Fall wird das sterilisierbare Objekt 2 Stunden bei 170 ° C gehalten (von dem Moment, dem Aufbau der erforderlichen Temperatur) in elektrischen Trocknungsschränken. Die Temperatur der Temperatur über 170 ° C wird nicht empfohlen: Baumwollkorken und Papier beginnen zu kollabieren.
Vor der Sterilisation werden Glasgerichte mit Baumwollkorken geschlossen und mit Papier umhüllt. Tassen, Röhrchen, Pipetten, Watte, Watte, eingewickelt in Papier oder in speziellen Fällen und Bleistiften, in denen sterile Gerichte nach der Sterilisation gelagert werden können.
Am Ende der Sterilisation wird das Kabinett erst entdeckt, nachdem die Temperatur auf Raumboden sinkt, sonst kann das Glas platzen.
4.2.3. Sterilisation mit der Flüssigkeitsfähre
Die Flüssigkeiten (100 ° C) werden mit trockener Wärme behandelt, und einige Nährstoffmedien, die höhere Temperaturen nicht standhalten (Medium mit Kohlenhydraten, MPH, Milch). Tragen Sie die Sterilisation in Koch kochender Klippe für 30 Minuten täglich 30 Minuten lang. Eine solche Sterilisation wird aufgerufen fraktioniert.
Mit einer einmaligen Erwärmung bei einer Temperatur von 100 ° C für 30 Minuten sind vegetative Zellen sterben, die Streitigkeiten vieler Mikroorganismen bleiben dabei. Nach einem solchen Aufwärmen wird das Medium in 24 Stunden in den Thermostat bei 28-30 ° C gelegt. Streitigkeiten, die bei der ersten Heizung erhalten bleiben, haben Zeit, in vegetativen Formen zu keimen, die mit anschließender Erwärmung sterben. Dann wird dieser Vorgang zweimal mehr wiederholt.
4.2.4. Sterilisation mit einer gesättigten Fähre unter Druck
Dies ist der schnellste und zuverlässigste Weg, um zu sterilisieren, in dem die nachhaltigsten Streitigkeiten sterben. Damit sind die meisten nahrhaften Umgebungen sterilisiert.
Die Behandlung mit einer gesättigten Fähre wird in einem hermetisch geschlossenen dickwandigen Kessel durchgeführt - autoklave.Auf dem Deckel oder auf der Seite des Autoklaven befindet sich ein Kran für den Austrittsdampf, das Manometer und das Sicherheitsventil. Das Manometer zeigt, wie viel der Druck des Dampfdrucks im Kessel höher als normal ist. Um eine Explosion zu verhindern, wenn der Grenzdruck überschritten wird, wird ein Sicherheitsventil ausgelöst, das ein Paar ergibt.
Ein Set von Manometer in physikalischen Atmosphären entspricht einer bestimmten Temperatur.
Die zuverlässige Sterilisation wird mit einem Erhitzen bei 120 ° C und einem Druck von 1 atm 20 Minuten erreicht.
Die Sterilisation wird wie folgt durchgeführt. Gießen Sie Wasser in den Autoklaven, sterilisierte Gegenstände werden darin platziert, den Deckel des Autoklavens schrauben und mit der Erwärmung beginnen. Der Kran wird offen gelassen, bis die gesamte Luft, die sich im Autoklav befindet, nicht mit Wasserdampf erfüllt wird. Wenn Paare den Kran mit einem kontinuierlichen Strahl verlassen, ist der Kran geschlossen, der Druckdruck im Autoklaven wird auf 1 atm eingestellt und auf dieser Ebene 20 bis 30 Minuten aufrechterhalten. Dann wird das Erhitzen gestoppt, warten, bis der Druckmesserpfeil auf 0 fällt, sorgfältig (wenig) den Kran öffnen und den Dampf hinuntergehen. Nur dann den Deckel des Autoklaven abschrauben. Wenn der Kran früher eröffnet als der Druckabfall, kocht die Flüssigkeit in sterilisierten Gefäßen die Stecker von ihnen.
Autoklave wird zur fraktionalen Sterilisation mit Fluiddampf verwendet. In diesem Fall verschraubt der Deckel nicht, um aus einem Paar frei zu sein.
4.2.5. Pasteurisierung
Die Pasteurisierung ist unvollständig oder teilweise, Sterilisation, dh der Erhitzen bei 65 bis 80 ° C für 30 bis 10 Minuten, gefolgt von einer schnellen Abkühlung auf 10-11 ° C. Pasteurize Milch, Bier, Wein und andere Produkte.
Materialien und Ausrüstung
MPB, Agar, Lacmus rot, Brommat Blau, Porzellanplatten mit Brunnen oder Tassen, Glasstöcke, 20% NA2C03-Lösung, Reagenzgläser in Stativen (zum Casting Agar), Trichter, Baumwolle, Petrischalen, Mora Mora Pipetten pro 1 ml, Papier Für Wraps von Becher und Pipetten, Kolben mit einer Kapazität von 250 ml, harten Threads.
5. Bilanzierung der Anzahl und Zuteilung der reinen Kultur von Mikroorganismen
5.1. Methoden zur Buchhaltung der Anzahl der Mikroorganismen
5.1.1. Bilanzierung der Anzahl der Mikroorganismen (CFU) im Boden durch das Verfahren von Nährstoffplatten in Kombination mit dem Verfahren der aufeinanderfolgenden Verdünnungen
Boden ist das günstigste Umfeld für die Entwicklung von Mikroorganismen. Aufgrund der großen Heterogenität seiner Komposition, um die Anzahl der Mikroorganismen darin aus dem untersuchten Bereich zu berücksichtigen mittebodenprobe.
Erste Suspensionen (Verdünnungsmethode), die verschiedene Bodenkonzentrationen in 1 ml Wasser enthalten. Um dies zu tun, auf einem sterilen Uhrenglas, einem sterilen Porzellan-Spatel oder einem Aluminium-Teelöffel, nimmt ein Glas oder einen Beutel Bodenkupplungen in 1 g. Es gibt einen Spatel, ein Löffel, der in einer Brennerflamme oder anliegt Brennen in Alkohol. Beim Wiegen des Bodens ist das Stundenglas mit einer anderen sterilen Uhrmacherei bedeckt.
Schleifenboden, Beobachtung der Bedingungen von Aseptiken, Transfer in den Kolben bei 250 ml mit 99 ml sterilem Wasser. Das Gemisch schüttelt 5 Minuten, ohne den Stecker zu benetzen. Die sterile Pipette wird 1 ml Suspension aufgenommen, die 10-2 g Boden enthielt, und in ein Reagenzglas mit 9 ml sterilem Leitungswasser übertragen. Die Pipette wird wiederholt mit Wasser in der Röhre gewaschen, um die Zellen so weit wie möglich von seinen Wänden zu spülen. Eine andere sterile Pipette wird aus dem Kolben ein weiterer 1 ml Suspension entnommen und in den zweiten Kolben gegeben, der auch 99 ml steriles Leitungswasser enthält. Diese Pipette wird auf dieselbe Weise wie im ersten Fall gewaschen. Das Reagenzglas und der zweite Kolben schütteln 1 min. Die Konzentration des Bodens in der Röhre beträgt 10-3 g in der zweiten Kolonne -10-4. In gleicher Weise ist 1 ml Suspension von den zweiten Kolben in einem zweiten Röhrchen mit 9 ml und 99 ml steriler Tap Wasser und 99 ml steriles Leitungswasser werden in der zweiten sterilen Pipette übertragen. Neue Suspensionen werden hergestellt, die in 1 ml bzw. 10-5 und 10-6 g Boden enthalten.
Praktische Arbeit
Für Studenten des zweiten Jahres
Durch Mikrobiologie.
1. Mikrobiologisches Labor.
2. Mikroskopische Forschungsmethoden. Bekanntschaft mit einem Mikroskop.
3. Methoden zum Färben von Medikamenten. Methoden zur Herstellung von Drogen
zur Mikroskopie.
4. Verfahren zum Sammeln von Material. Nährstoffmedien.
5. Bakteriologische Forschungsmethode im Beispiel von Staphylokokken.
6. Kultivierung und Angabe von Viren.
9. Der Einfluss von Umweltfaktoren auf Mikroorganismen.
10. Seriologische Reaktionen. Agglutinationsreaktion.
11. Hämagglutierungsreaktion.
12. Ergänzende Bindungsreaktion.
13. Wirkstoffreaktion. Raue Reaktion.
14. Immunfluoreszenzreaktion. Immunitätsreaktion (Hautproben).
Operofagokatorische Reaktion.
15. Impfstoffe.
16. Molkepräparate.
Einführung
Toolkit. Es wurde entwickelt, um den Studierenden des Moskauer Medizinstudiums des Eisenbahntransports mitita zur Erstellung von praktischen Arbeiten im Rahmen der Disziplin "Grundlagen der Mikrobiologie, Virologie und Immunologie" zu helfen.
Trainingsmodul.
Thema: Siehe Software
Art der Klassen: Praktisch
Ort der Klassen: Microbiology Laboratory
Zeit: 16 * 2 Stunden
Der Schüler sollte wissen:
ABSCHNITT 1
Medizinische Basen
Bakteriologie und Mikrobiologie.
Praktische Arbeit Nummer 1
Gegenstand: "Mikrobiologisches Labor"
Das mikrobiologische Labor ist mit Krankenhäusern und sanitären und epidemiologischen Stationen organisiert. Es gibt auch spezielle Laboratorien, in denen sie mit Pathogene besonders gefährlicher Infektionen arbeiten.
virologische Laboratorien usw.
Die Aufgabe des mikrobiologischen Labors beinhaltet:
1) Bakteriologische Diagnose von Infektionskrankheiten;
2) Sanitäre und bakteriologische Untersuchungen von Wasser, Luft und Objekten
umfeld;
Das Labor beinhaltet:
1) Laborraum mit glasiertem Box zur Durchführung
mikrobiologische Studien (im Boxen müssen installiert sein
bakterizide Lampe);
2) Waschen;
3) Vorbereitung (Räumlichkeiten zur Herstellung von Gerichten und anderen
hilfsarbeiten);
4) Autoklave;
5) der Raum zur Erhalt von Analysen und Ausgabe von Forschungsergebnissen;
6) Vivarium;
Das mikrobiologische Labor muss ausgerüstet sein:
- thermostat
- kühlschrank
- trocknungskameras,
- zentrifuger
- laborgerichte;
Sowie Ausrüstung:
- alkohol- oder Gasbrenner
- bakteriologische Loops.
- dz. Lösung
