Лабораторна работа по микробиология и канализация. Методическо развитие на темата: Методически инструкции за лабораторна работа по основите на микробиологията

Урок № 1.

Изготвяне на хранителни среди и методи за тяхната стерилизация

Характеристики на отглеждането на микроорганизми

Предназначение: Разгледайте правилата за работа в микробиологичната лаборатория, характеристиките на отглеждане на микроорганизми, методи за приготвяне на хранителни среди и методи за тяхната стерилизация.

Задачи

Да се \u200b\u200bзапознаят с правилата на поведение при извършване на микробиологичен семинар.

Разгледайте характеристиките на отглеждане на микроорганизми.

Разгледайте методите за подготовка и разливане на хранителни среди.

Разгледайте методите за стерилизация на ястия и хранителни среди.

Подгответе се и изсипете MPA хранителната среда.

Вземете натрупващата култура на сено и картофени пръчки.

Литература

Anikeev v.v., Lukovskaya K.A. Ръководство за практическа работа по микробиология. М.: Просвещение, - 1983.

Гусев M.V. Микробиология: Урок за университети / M.V. Гусев, Л.А. Минеев. - Москва, 2004

Emtess v.t. Микробиология: учебник за университети / V.T. Emtess, напр. Mishoustin. - m.: Drop, 2005.

Луковска к.а. Микробиология с вирусологични бази. М.: Просвещение, - 1983.

Основи на микробиологията, вирусологията и имунологията. / Под. Редактиран от Воробиев A.A. и Krivoshein Yu.S. - m.: Mastery, 2001.

Пименова M.N. Ръководство за практическа работа по микробиология. Москва, 1971 година.

Семинар по микробиология. Ед. Neturova a.i. - м.: Академия, - 2005.

Tepper E.z. Семинар по микробиология. - m.: Drop, 2004.

Материали и оборудване. Стерилни ястия петри, стерилни конични колби на 100-150 ml, Агар питателен, пептон, сено, картофени клубени, тебешир, плочки, алкохол, колби, вълна, марля, пипети, люспи, множество, термостат.

Основни понятия.Култивиране, култура, култивиране на повърхността, дълбоко култивиране, периодично култивиране, непрекъснато култивиране, чиста култура, акумулативна култура, сеитба, инкубация, преминаване, електрическа среда, кумулативни носители, оптимални носители, естествени носители, синтетични носители, полусинтетични носители, агар, Стерилизация, запалване, тиндализация, пастьоризация, автоклавиране, MPA.

Прогрес

Номер 1. Разгледайте правилата за работа при извършване на микробиологичен семинар.

Номер 2. Разгледайте класификацията на хранителните среди, характеристиките на тяхното приготвяне и разливане, методи за стерилизация на хранителни среди и ястия.

Номер 3. Пригответе се и изсипете MPA хранителната среда в стерилни петриеви ястия.

Номер 4. Получете хранителна култура на сено(Bacillus subtilis).

Сеното е фино нарязано и поставено в колба с обем от 500 ml, напълвайки го на една четвърт обем, добавете щипка от тебешир и варете 15-20 минути, докато околната среда придобие цвета на некомния чай. Отвара за сено се излива в стерилни конични колби на 100-150 ml слой от 1.0-1,5 cm, затворен с памучни тапи и поставени в термостат при температура 22-25 ° С.

Два дни на повърхността на средата се развива белезникав филмВие. Субтилис което при стареене, на 3-4-ия ден, става сиво-зеленикаво. Други микроорганизми рядко растат в малки количества.

Номер 5. Получете хранителна култура на картофените пръчки (Ти. Субтилис var. Mesenttericus).

Измити картофени клубени, не почистване, нарязани на кръгове. Повърхността се втрива с тебешир, за да неутрализира средата и се поставя в стерилни петриеви блюда на двоен слой от филтърна хартия, навлажнена с дестилирана вода. Час с картофена среда се съхраняват в автоклав при 0.5 atm за 10 минути и се поставят в термостат с температура 27-30 ° С в продължение на 3-4 дни.

На повърхността на картофените филийки се образува плътна набръчкана култура на културата на картофената пръчичка. Оцветяването на филма може да бъде различно: бяло-сиво, розово, жълто-кафяво, черно, което зависи от разнообразието на културата, която е получила преференциално развитие.

Контролни въпроси

Класификация на хранителни среди.

Методи стерилизация на лабораторни ястия и хранителни носители.

Методи за приготвяне на отделни хранителни среди (MPB, MPA, MPH, CA, KA и др.) Фокусиране на хранителни среди.

Характеристики на отглеждането на микроорганизми (повърхностни и дълбоки, периодични и непрекъснати). Кумулативни и чисти култури.

Методи за приготвяне на местни и фиксирани лекарства на микроорганизми.

Разгледайте основните етапи на развитието на науката за микробиология, приноса на руските и чуждестранните учени за неговото развитие. Попълнете таблица № 1.

Таблица номер 1. История на развитието на микробиологията

Урок номер 2.

Изготвяне на живи и фиксирани наркотици на микроорганизми и запознаване с тяхната морфология

Предназначение: Разгледайте методите и техниките за приготвяне на микрооргруси в изследването на микроорганизмите и ще се запознаят с тяхната морфология.

Задачи:

Разгледайте характеристиките на морфологията на бактериалните клетки.

Пригответе синтез и фиксирани микроорганизми.

Материали и оборудване. Слайд стъкло, бактериологичен контур, алкохол, филтърна хартия, кристализатор с мост за препарати, промиване с вода, водни разтвори на багрила - фуксин, метиленово синьо (наричан по-долу - оборудване за приготвяне на микрокраги); потапяне масло, микроскоп; Месни вода, дрожди, сушени и картофени пръчици.

Прогрес

Номер 1. Провеждане на продължителност на живота на бактериалните клетки със следните методи, нарисувайте снимки:

Метода на натрошен спад.Микробиологичната верига се прилага с капка една от течностите. Покритото стъкло, поставено на ръба на ръба на капка и постепенно го намалява.

Метод за окачване на капки.В центъра на стъклото на покритието се прилага малка капка от изследваната течност и го преобърне над задълбочаването на специално стъкло.

Подготовка. От агарната среда, върху която микроорганизмите растат със солидна трева или под формата на отделни колонии, изрязват малък куб и го прехвърлят към слайдното стъкло, така че повърхността с микроорганизми да бъде изготвена. След това чистото покритие се нанася върху тревата или колонията, леко натискаше цикъла или пинсети върху него и веднага премахване, опитвайки се да не се движи. Полученото лекарство се поставя отпечатък в капка вода или метиленов син (1:40) върху слайда.

Номер 2. Подгответе фиксирана подготовкаВие. Субтилис, ти. субтилис.var. mesenttericus, св. Lactis, s. cerevisiae, e.coli(Фиг. № 1, 2, 3, 4 приложения), Направете снимки.

Приложение. Стъкленият плъзгач е сух на пламъка на алкохола. Бактериологичен контур, стерилизиран върху пламъка на горелката, намазването на изследвания материал се прилага в центъра на стъклото. Ако културата на микроорганизма се отглежда на гъста хранителна среда, водата пада върху стъклото, малко количество материал е направен в бактериологичен контур и намазка.

Сушене и фиксиране. Лекарството се изсушава във въздуха и след това се фиксира. Конвенционалните микроорганизни четки са фиксирани термично, провеждайки стъкло 2-3 пъти през горелката за пламък с намазка.Фиксирането на намазването води до смъртта на микроорганизмите, плътната залепване към повърхността на стъклото и по-лесната чувствителност на микробите към багрилото.

Оцветяване. Изсипете повърхността с разтвор с разтвор на всяка багрило в продължение на 2-3 минути (метиленов син, ентеневиолетов, фуксин). Разграничавампросто и диференциално Оцветяване на микроорганизми. В първия случай цялата клетка е надраскана, така че неговата форма и размери стават ясно видими. Диференциалното оцветяване разкрива само определени клетъчни структури и резервни вещества.

Зачервяване. След това багрилото с намазка се измива с вода от охлаждането, долната страна на лекарството избърсва филтърната хартия с лента, горната леко суха и микроскопия.

Общите характеристики на микроорганизмите. Отличителни признаци на прокариотна и еукариота.

Формата и размера на бактериалните клетки. Морфологични типове бактерии.

Основи на систематиката на микроорганизмите. Позицията на бактериите в системата на организмите и тяхната вариабилност. Признаци на бактерии, използвани при определяне на вида.

Кратко описание на реда на шизомицетале.

Кратко описание на реда на актиномицетале. Нокардия. Mycobacteria.

Кратка характеристика на реда на миксобактериалите.

Гъби. Кратко описание на зиг-, accoo и deuteromycetes.

Попълнете таблица номер 2.

Таблица номер 2. Отличителни признаци на еукариот и прокариоти

Линейни хромозоми

Въпроси за самообучение

Кратко описание на хотелските групи бактерии (според детерминанта на Berdygia бактерии).

Морфологични характеристики и систематика на водораслите.

Морфологични характеристики и систематика на най-прости.

Урок номер 3.

Оцветяване на включвания, капсули и ендоспори, живопис от грам

Предназначение: Разгледайте методите за оцветител, капсули и включвания на бактериалната клетка; Разгледайте нейните цитологични свойства върху примера на цвета в грам.

Задачи:

Откриват липидни гранули в дрождеви клетки.

Откриване на полизахариди с гликоген в дрождеви клетки.

Откриване на бактериални клетъчни капсули чрез отрицателен контраст (при примераAzotobacter).

Диференциален срив спор и цитоплазма по метода на Ozhechki.

Провеждане на цвета на бактериите от грам.

Материали и оборудване. Слайд стъкло, бактериологичен контур, алкохол, филтърна хартия, кристализатор с мост за препарати, водопровод с вода, микроскоп. Водни разтвори на багрила - фуксин, метиленов син, Gentianviolete, Carbolic Fuchsin CILY, Судан III. Потапящо масло, сярна киселина 1%, спирала, солна киселина 0.5%, разтвор на Лугол. КултураYou.subtilis, you.mycoides, s.cerevisiae, е. coli.

Основни понятия.Moerein, volusutin, нуклеид, гликоген, капсули, клетъчна стена, полизахариди, полифосфати, метаммерни зърна, монотрилс, пренапрежения, лофтриха, бастиломна форма, клетъчна форма, плътна форма, екшон, интамус, метахромосия.

Прогрес

Номер 1. Откриване на включването на полифосфати (Volutin) в дрождеви клетки. Volusutin в гъби и дрожди клетки са локализирани във вакуоли, в бактерии и актиномицети в цитоплазмата. Е резервен фосьор и азотсъдържащо веществопроизводни на нуклеинова киселина. Характерно имущество е метахромосия, т.е. способността да се придобият друг цвят, отколкото да оцветяват веществата.

Оцветяване volyutin според метода на Omeliansky.На субектното стъкло се приготвя тънък поток на културата на микроорганизма, изсушава се във въздуха, фиксиран на пламъка, оцветени с карболови фучин 30-40 s и се измива с вода. Разграничете, потапянето го в колба с 1% разтвор на сярна киселина с 20-30 s и се промива веднага с вода. Сярна киселина Декориране на цитоплазмата и зърната на колиба остават боядисани фуксин. Лекарството е оформена с метиленов син (1:40) 20-30 s, промива се с вода, суши се във въздуха и микроскопията. При получаването на зърно Volyutin, боядисан в червено, цитоплазмено-клетки - в син (фиг. № 1, 2 приложения).

Номер 2. Откриват липидни гранули в дрождеви клетки. Резервните липиди в дрожди и мицелни гъби са представени от неутрални мазнини; В бактериите тази функция извършва хидроксималалава киселина.

Оцветяване на мазнини включвания.Към капка водна суспензия от микроорганизми върху стъклото се добавя капка судан III разтвор, покрита с покритие и микроскопия, използвайки лещата VI-40. Судан III се разтваря в мазнини при включване на бактериалната клетка, рисувайки ги в оранжево-червено. Клетъчната цитоплазма остава безцветна.

Номер 3. Откриване на полизахариди с гликоген в дрождеви клетки. Резервни вещества от въглехидратна природа в бактериални клетки се натрупват под формата на гранули. Гранулез - нишестено вещество, когато взаимодейства с реагента на Лугол, оцветявайки в син цвят; Гликоген - полизахаридно оцветяване в същите условия в червено-кафяв цвят. Гранулезите се срещат само в прокариотни клетки.

Гликогенна боядисване и гранули. Към капка суспензия на микроорганизма върху слайдното стъкло добавя капка слаб разтвор на лугола, покрит с покритие и микроскопия, като се използва обективът VI-40.

Номер 4. Откриват бактериални клетъчни капсули чрез отрицателен контраст (Azotobacter).

Откриване на капсули на отрицателна препарат за цял живот.Микробиологичната верига на микробиологичната верига се нанася с голяма капка черен труп и се разпределя в изследваната култура на микроорганизма, като се използва чрез слайд и изсушен. Помислете с потапяща система. На тъмен фон на карата, прозрачните зони на капсулите около рязко очертаните клетки (фиг. 8. Приложения).

Номер 5. Диференциален срив на спор и цитоплазма (yВие. Mycoides).

Метод на яйсване. Изсушен препарат се излива 0.5% солна киселина И се нагрява 2 минути преди появата на пари. Размазването се промива с вода, покрита с филтърна хартия и се изсипва карболова фуца. Оцветени за 5 минути, когато се нагрят, докато се появят пари. Промива се с вода и се разграничава в 1% сярна киселина 0.5-1 минути (времето се определя от експерименталния начин). Измийте с вода и пълнени за 30 с метиленово синьо. Отново се измиват, изсушават и микроскопия. Спорите са боядисани в розов цвят, цитоплазма - в синьо (фиг. № 2 приложения).

Номер 6. Провеждане на цвета на бактериите от грам. Разликата в химическия състав на клетъчните стени на бактериите влияе върху тяхната способност да бъде боядисана в грам. На тази основа бактериите са разделени на грам-положителен и грам-отрицателен (таб. № 3). Грам-положителните черупки съдържат повече полизахариди, меси и учителски киселини; Грам-отрицателните черупки имат многослойна структура с високо съдържание на липид (липопротеини и липозахариди). Грам-положителни микроорганизми по време на оцветяване образуват неразтворим в алкохолна връзка на йод с основното боя, грам-отрицателно съединение се разтваря в алкохол.

Оцветяване в грам.Прилага се към стъклото на кожата и след това трима намазвания се третират едновременно: от културата на бактериите, съзнателно грам-положително, от културата на бактериите е съзнателно гравитално и между тях се намазват от културата на микроорганизма. Използвайте млади едногледални култури.

Намазванията се изсушават във въздуха, фиксирани върху горелката на пламъка и оцветени с 1% воден разтвор на 1 min gecianliete. Боята се измива с разтвор на Лугол и се излива намазанията със същия разтвор за 1 min. Лекарството се промива с вода и се диференцира в колбата с 95% етанол (0.5-1.0 min). След диференциацията на намазката лекарството веднага се промива с вода и се подпечатва с допълнително багрило - 0.1% воден разтвор на фуксина 2-3 минути. Лекарството най-накрая се промива с вода, суши се във въздух и микроскопия с потапяне на масло. На приготвянето грам-положителните бактерии са боядисани в лилав-пурпурен цвят, грам-отрицателен - в розово-малина (фиг. 2 от приложението).

Таблица номер 3. Отношението на бактериите да оцветяват в грам

Staphyloccocus aureus.

Ешерихия коли.

Streptococcus.

Proteus vulgaris

Bacillus subtilis.

Pseudomonas aeruginosa.

Sacharomyces.

Shigella sp.

Проверете въпроси и задачи

Структурата на обвивката на бактериална клетка. Образователни капсули.

Съотношението на бактериите да оцветяват в грам. Отличителни черти на грам-положителните и грам-отрицателните микроорганизми.

Клетъчна мембрана и вътреклетъчни мембранни структури.

Ядрен апарат, състав, организация и репликация.

Рибозоми, газови вакуоли и други бактериални органели; тяхното значение.

Включване на бактериалната клетка (полизахариди, полифосфати, липиди, приобщаване на сяра).

Методи за развъждане на бактерии. Образуване на гъба от бактерии.

Флагела. Движение на бактериите. Таксита.

Въпроси за самообучение

Наследствени фактори на микроорганизми.

Механизми, причиняващи промяна в генетичната информация на микроорганизмите.

Урок № 4.

Количествена счетоводна микрофлора въздух и вода

Определение за микробен номер

Предназначение: Провеждане на количествен разказ за въздушни и водни микроорганизми.

Задачи

Разгледайте методите за количествено измерване на микрофлора въздух и вода.

Провеждане на микробиологичен анализ на въздух и санитарен и бактериологичен преглед на водата.

Материали и оборудване.Петрични ястия със стерилен MPa, стерилни пипети на 1 ml, водна баня, електрическо покритие, термометър, вода, вода от воден клон, алкохол, мачове.

Основни понятия.Номер на обща микробна вода,общ микробен въздушен номер, индекс на пробата, цветове, санитарни и по-ниски микроорганизми, автохтонна микрофлора, алкохолна микрофлора, зони за вземане на проби.

Прогрес

Номер 1. Използван с определението за OMCH (общ микробен номер) въздух.

За да заразявате петричните ястия, отворени в помещенията по време на обучение или на улицата за 5 минути. Покритието на Купата на Петри се отстранява и без обръщане, сложи го наблизо. На капака на петричните ястия посочват опита, дата на сеитба. Инфектираните петрични ястия се поставят в термостат при температура 25-28 ° С.

След 2-3 дни, броят на колониите на микроорганизмите, разработени върху агарната плоча от ястия Петри.В същото време се вземат предвид следното: при приблизителни оценки (омлийски) на площ от 100 cm2 за 5 минути, толкова много микроорганизми и спор са уредени, колко от тях се съдържат в 10 литра въздух. Позволяват всяка колония да произхожда от една клетка или спор. Д.този метод дава само приблизителни данни, но относителният брой микроорганизми във въздуха на различните помещения ви позволява да откриете съвсем точно. Попълнете таблица № 4, направете заключения.

Например: 5 колонии са открити в петричката, чаша от 2 см. Районът е s \u003d πr2 \u003d 3.14 * 4 \u003d 12.5. След това в 10 литра съдържат

Таблица номер 4. Общият микробен номер (OMCH) на въздуха на помещенията.

Колониите на микроорганизми, изолирани от въздух върху MPA плочите, могат да се използват за работа при идентифициране на вида. Най-често от въздуха се отличава с колония от микрококи, саркин, някои бацили и бактерии.

Номер 2. Да се \u200b\u200bопредели опит в определянето на OMCH вода.

За изследване на стерилните колби се приемат вода. От колбите приемат 1 ml вода със стерилна пипета и допринася за петрие с полирана среда (MPA) (температурата не трябва да бъде над 45 ° С). Чашата е затворена и внимателно накланяйте, разбърквайте хранителната среда, придайте плоча към замръзнала, поставена в термостат. След 3-5 дни, Petri Colonies, разработени в чаши, се изчисляват и определят от броя на бактериите в 1 ml вода.

След преброяване на колониите, се определя микробният брой вода - броят на микроорганизмите на 1 ml от изследваната вода, като се вземат предвид развъждането, ако е произведено.

Данните се издават под формата на таблица номер 5, дават заключения.

Таблица номер 5. Общ микробен номер (OMCH) питейна вода

Водна вода

Контролни въпроси

Характеристики на микрофлора въздух. Разпространяване на микроорганизми във въздуха.

Норми на санитарно състояние на въздуха на помещенията.

Санитарни и микробиологични изследвания на въздуха.

Микрофлора питейна вода.

Микрофлора на естествени води. Разпределение на микроорганизми във вода.

Санитарни индекси на питейна вода. Обща микробна вода номер. Коля индекс, воден титър.

Замърсяване и самопочистване на водни тела. Ролята на микроорганизмите в процесите на самопречистване на водните тела.

Биологично пречистване на пиенето и канализацията.

Санитарен и бактериологичен преглед на водата. Определение на OMCH, RAL-индекс, Coli-Titer.

Санитарни микроорганизми на въздух, вода, почва.

Изисквания за санитарни микроорганизми.

Микрофлора на храна (кисело мляко, риба, месо, колбаси, консервирани храни).

Характеристики на групи микроорганизми, използвани при оценката на безопасността на хранителните суровини и хранителните продукти.

Санитарни и бактериологични стандарти за различни хранителни продукти.

Методи за санитарни и бактериологични изследвания на хранителни продукти.

Почвата като местообитание на микроорганизми.

Екологични фактори за разпространението на почвени микроорганизми.

Връзка между почвите микроорганизми.

Участие на почвената микрофлора в процесите на минерализация на органични вещества и образуването на хумус.

Санитарно и бактериологично изследване на почвата.

Урок номер 5.

Получаване на чиста култура на микроорганизми

Нефелометричен метод за количествено отчитане на микроорганизмите

Предназначение: За да се изолират чистите култури на микроорганизмите, овладеят човешкия метод за отчитане на броя на микроорганизмите.

Задачи

Провеждане на пускането на чиста култура по метода на "изчерпване" инсулт.

Провеждане на количествена оценка на микроорганизмите с афилометър

Материали и оборудване.Петрични ястия със стерилен MPA, риба, камера за гори, микроскопи, микробиологични контури, алкохол, мач.

Основни понятия. Чиста култура, растеж, възпроизвеждане, двоично разделение, рода, клетъчен цикъл (мономорфен, диморфен, полиморфен), време на генериране, специфичен растеж, добив на биомаса, икономически коефициент, стационарна фаза на растеж, фаза на забавяне, фаза на експоненциално възпроизвеждане, стационарна фаза , Фаза на пълнене, продължаваща култура, течаща култура, синхронна култура.

Прогрес

Номер 1. Получаване на чиста култура на микроорганизми

Освобождаването на чисти култури на аероби се извършва чрез претегляне на акумулативна култура на повърхността на твърда хранителна среда. Сеитбата се извършва чрез изчерпване на инсулт. След като колониите растат, те вярват в чистотата на избраните колонии визуално и микроскопски. След 3-6 дни те избират и описват изолирана колония от микроорганизми (използвайки появата на приложението).Колонията е описана съгласно следната схема:

Количеството на колонията: точка (d е по-малка от 1 mm), малка (d - 1-2 mm), средна (d - 2-4 mm) и голяма (d - 4-6 mm или повече).

Формата на колонията е заоблена, амебобоид, ризовиден.

Оптични свойства - прозрачни, матови, флуоресцентни, полупрозрачни (полупрозрачни), непрозрачни, блестящи.

Цвят - празнуват цвета на колонията и избора на пигмент в сряда.

Повърхност - гладка, груба, сгъната, бъги.

Профил - плосък, изпъкнал, кратер, отглеждане в агар и др.

Ръбът на колонията е дори, вълнообразен, гребло, ризодия и др.

Структурата на колонията е хомогенна, фино или груба.

Консистенция - масло, здрава, вискозна, филм.

Номер 2. Провеждане на количествена оценка на микроорганизмите с афилометър.

а) нефелометричен метод. Клетъчна плътностS. cerevisiae. В течната среда се определя от маслена метрометрична (FEC) с помощта на кювета с дължина на оптичния път от 0.5 cm и зелен светлинен филтър (A \u003d x 540 nm). За да се получат надеждни резултати, плътността на клетката трябва да бъде в диапазона от 0.1-0.6. При концентрации на клетки над 0.6 се появява вторично разсейване на светлината, което води до по-ниски резултати. Следователно, суспензията на големи плътност преди измерване на светлината трябва да се размножава с вода в 2, 4, 6, 8 и 10 пъти. Резултатите от измерванията на оптичната плътност на всяка суспензия (се използват вода) са записани в таблица № 6.

б) броене на клетки в камерата за гореща обем. За да се преместят от показанията на фотоелектроколориметъра (FEC) към броя на клетките на микроорганизмите в средата, техният брой изчислява, използвайки броя на топлинната обем и разреждания на дрождената суспензия, които се използват за определяне на тяхната плътност с маслоометричен метод. Клетките се броят в големи квадрати на мрежата, като се използва лещата 8 *. Общият брой на изчислените клетки трябва да бъде най-малко 600. Броят на клетките в 1 ml от съответната суспензия се изчислява с формулата m \u003d 1000 * А * п / h * s, където m е броят на клетките в 1 ml на суспензия; А е средният брой клетки на големия квадрат на мрежата; H - дълбочината на камерата (1/10 mm); S - квадратен квадратна мрежа (1/25 mm2 ); n е степента на гнездене; 1000 mm.3 - 1 ml. Получените резултати, милиони клетки в 1 ml се записват в таблица. № 6.

Таблица номер 6. Броя на клетките от дрожди в суспензии, монтирани с горещата камера и съответните Fack показания

Четене на FEC.

Изграждане на крива на калибриране въз основа на таблицата с данни. 6, полагане на оста на абсциса броя на дрождевите клетки и върху ординаталната ос оптичната плътност на съответното суспензия. Изградена е калибрационна крива бърза дефиниция Броя на клетките на определен тип микроорганизми според показанията на FECS.

Проверете въпроси и задачи

Акумулативни култури и принцип на тялото. Чисти култури, методи за получаване и стойност.

Възпроизвеждане на микроорганизми.

Бактерии за клетъчни цикли. Растеж на отделните микроорганизми и популации. Балансиран и небалансиран растеж.

Параметри на растежа на културите: време за генериране, специфичен темп на растеж, доходност на биомаса, икономически коефициент.

Криви на растежа, характеристики на отделните фази. Растежа на микроорганизмите с непрекъснато култивиране. Синхронни култури.

Урок номер 6.

Санитарни и бактериологични изследвания на храната

Предназначение: Провеждане на санитарна и бактериологична оценка на състоянието на храната.

Задачи

1. Определете цялостния микробен брой някои храни.

2. Определете наличието на bgpp (бактерии за чревни стик).

Материали и оборудване. Петри, петри, петриеви ястия с ендо среда, 1 ml пипети, хоросан ступи, скалпели, тръби с 9 ml стерилна вода, тестови епруветки с цеплер среда, стерилни колби със 100 ml вода, скали.

Основни понятия. Специфична хранителна микрофлора, неспецифична микрофлора на храни, BGPP, санитарни микроорганизми.

Прогрес

Номер 1. Определете наличието на BGPP и общия хранителен сектор, изпълнявайки следните стъпки в серия:

1. Изготвяне на хранителни продукти за изследване.

Той се стрива в стерилен порцеланов разтвор на 10 g хитове (взет стерилен от различни места), постепенно добавяне на 90 ml изотоничен разтвор на натриев хлорид и се оставя при стайна температура в продължение на няколко минути. Стерилната пипета с широк нос се нарязва чрез суспензия за култури и разреждания (1 ml). Предполага се, че 1 ml от приготвената суспензия съдържа 0.1 g от изходния продукт (развъждане 10)-1 ). Продуктите на течната консистенция се посяват и отглеждат за култури без предварително подготовка.

2. Подготовка на хранително-вкус за сеитба.

За консистенция на храната, продуктите за разреждане се получават както следва: 1 ml от продукта се приема със стерилна пипета и се довежда в епруветка, съдържаща 9 ml стерилен изотоничен разтвор на натриев хлорид, разбърква се. Рецепция (10. \\ t-2 ) Ние сме подложени на по-нататъшно размножаване до необходимия брой пъти (множество 10).

Фигура 1. Приготвяне на разреждания и почвената суспензия на твърда хранителна среда

3. Определяне на обикновени семена.

Избран за засяване на разрежданията са 1 ml в стерилни петристи ястия с разтопено на 45-500 MPa, след което те се разбъркват. Средата се оставя да замръзна, културите се отглеждат за един ден при 37 ° С, след което се изчислява броят на отглежданите колонии (код). Определете общия брой бактерии в 1 ml или 1 g от продукта.

4. Определяне на наличността на BGPP.

Засяването се използва тогава количеството на продукта, при което в съответствие с установените норми е предвиден за отсъствие на BGPP. От избраните разреждания на изследваните проби проби, 1 ml се вземат и попадат в тестовите тръби със средата на Kessler. Запаметените епруветки се инкубират при 37 ° С 24 часа. При липса на признаци на растеж (образуване на газ или промяна на околната среда) направете заключение за спазването на продукта в процес на проучване. Ако има признаци на растеж, той се основава на ендо сряда. Sevings се инкубират 18-20 часа при 37 ° С. При гледане на сеитба се отбелязват колонии, подозрителни или типични за BGKP (образуват червени, розови, бледо коронарни колонии с метален блясък или без него). От тях, лекарствата от живи и фиксирани клетки са боядисани в грам, микроскопия. Откриването на грам-отрицателни, не-образуващи спори на пръчки със заоблени краища, показва възможната наличност на BGPP.

В таблицата са включени данни за цялостното засяване и наличието на чревни пръчки. Направете заключения за микрофлората на различни храни, използвайки санитарни и микробиологични стандарти (Sanpine 2.3.2.560-96) (раздел. № 7).

Таблица номер 7. Някои санитарни и бактериологични стандарти (Sanpine 2.3.2.560-96)

Руското сирене

0,001

Сладолед

1*10 5

0,01

Проверете въпросите вж. Урок № 4.

Урок номер 7.

Микробоценози на почвата

Предназначение: Разгледайте състава на видовете и разпределението на почвите микроорганизми.

Задачи

1. Поддържа характера на почвата микрофлора и доминиращи видове.

2. произвеждат количествено и висококачествено отчитане на микрофлората на почвата.

Материали и оборудване.Очила на кожата, стерилни петриеви ястия с MPA,люспи, множество, скалпел, хоросан, гумена ръкавица, колба със стерилна дестилирана вода 90 ml, стерилна колба с обем от 250 ml, тръби с 9 ml стерилна вода, пипети на 10 ml и 1 ml, микропипети за 0.1 ml, стъкло шпатули.

Прогрес

Номер 1. Разгледайте естеството на почвата и ризосферните микробоноценози по метода на завъртане на стъклото (на студ).

На плоска повърхност на почвата, рязането е направено от нож, чиято дълбочина зависи от изследвания хоризонт. Смесено и нискомаслено стъкло (едновременно вземане на няколко чаши) плътно притиснати към вертикалната стена на рязане и заспиване на почвата. Очилата се държат в почвата от седмицата до няколко месеца.

След време на експозиция, експозицията се отстранява от задната страна на очилата, експерименталната повърхност на очилата се изсушава във въздуха и се оправя три пъти, като прекарва гърба на пламъка на горелката. След фиксиране, стъклото е потопено във водата с опитна повърхност надолу, без да я доведе до дъното. След промиване, лекарството се потапя в карболен разтвор на еритроин за период от 30 минути до 24 часа. Рисувани лекарства се изследват под микроскоп с потапяща система. В микроскозацията се отбелязват характерът на микрофлората, плътността на завъртането на стъклото и доминиращите форми.

Номер 2. Да се \u200b\u200bопредели омчът на почвата.

Подготовка на суспензия на почвата чрез развъждане.Чрез наблюдение на стерилност, 10 g почва се зашиват и носят в стерилен хоросан. Почвената проба в хоросан се овлажнява до пастообразна държава, добавяйки 2-3 ml вода от първата колба, съдържаща 90 ml стерилна вода и 5 минути са лъжливи в гумената ръкавица. След триене на почвата от хоросан, той се прехвърля с вода към втората суха колба, първото разреждане се получава - 1/10. Суспензията на почвата в колбата се разклаща в продължение на 5 минути, възможно е да се престои 30 ° С и след това стерилната пипета се пренася до 1 ml суспензия на почвата от колбата в епруветката @ 1 с 9 ml стерилна дестилирана вода, \\ t Получава се второто разреждане - 1/100. По същия начин приготвя редица последващи разреждания на почвената суспензия -1/1000, 1/10000, 1/100000 и повече в зависимост от предвидения брой микроорганизми (Фиг. № 1, Урок № 6).

За разпределението и количественото счетоводство на бактериите, суспензията на почвата се засява към една от хранителните среди (MPA, KAA, почвен агар, ESBI среда; за счетоводство на актиномицети, среда на KAPA или Chapeca). Колониите на бактериите върху петрични ястия се изчисляват след 3 - 5 дни, гъби и дрожди - след 5 - 7, актиномицети - до 7 - 15. Съдържанието на микроорганизмите в 1 g почвата, за да се определи по формулата: \\ ta \u003d b * в, къде и. \\ t - броя на микроорганизмите в 1 g почви, \\ tб. - средни колонии,в - размножаване. Сравнете видовия състав и разнообразие от микрофлора, вода и въздух и заключете.

Проверете въпроси и задачи, вижте Урок № 4.

Урок номер 8.

Трансформация от микроорганизми на азотни съединения

Предназначение: Да изучава особеностите на трансформацията на микроорганизми на органични азотни съединения.

Задачи

Проверете микроорганизмите, участващи в процесите на протеинови амонификация.

Проверете микроорганизмите, участващи в процесите на урея.

Материали и оборудване: Сряда за възпроизвеждане на процеса на амонизация на протеини и карбамид, микроскопи, оборудване за подготовка на микроприготвяне.

Основни понятия. Амонификация, протеази, пептидази, уреаза, дезалина, декарбоксилиране.

Прогрес

Номер 1. Проверете микроорганизмите, които извършват амонификация на протеина, направете чертеж. За да изследва амонификацията на протеинови вещества с хранителна среда, може да служи месен бульон с добавяне на 3% пептон.30 ml среда се излива в колба на 100 ml и се добавят с 1/3 чаена лъжичка на почвата. Колбите са затворени с памучни тапи. Над средната, два документа са окачени - червена лактация или универсална индикаторна хартия, навлажнена с дестилирана вода, за откриване на освободения амоняк и филтър, навлажнени с алкален разтвор на оловен ацетат, за откриване на сероводород и меркаптан. Фиксирайте ги между корк и стените на врата на колбата. Хартията не трябва да докосва средата. След 3-5 дни инкубиране при 28-30 ° С, се анализира съдържанието на колбата. Определете патогените на процеса на амонизация на протеини и техните продукти на препитанието им.

Микроскопично.За откриване на патогени на гниещото разпадане на протеинови вещества, лекарството на живите бактерии се приготвя в натрошен спад, както и фиксирано и боядисано лекарство. Повече от други, има подвижни клетки върху лекарството.Proteus vulgaris (Фиг. № 4 приложения)преобладаващи в първите етапи на колапса на протеините. Те са разграничени, неравномерни дължини на пръчката. В допълнение, на подготовката има много клетки, образуващи споровеBacillus mycoides и clostridium sp. (Фиг. № 1, 4 приложения). Последните спорове се намират най-крак и диаметърът им надвишава ширината на клетката.Вие. Mycoides. причинява амонификация на протеинови вещества в аеробни условия иS. Putrificus. - В анаеробна, но може да се развие и в аеробни условия, ако има аеробни микроорганизми, които абсорбират кислород.

NH-атмосфера3, оцветяване на окачена лента от червена лактатна хартия в синия цвят. Олово хартиено черно под действието на сероводород, ако е покрит със сребърна цъфтеж, това означава, заедно с h2 S все още се отличават с меркаптани (например метилмеркаптан ch3ч).

Номер 2. Проверете микроорганизмите, участващи в процесите на урея, направете чертеж. За да спазвате процеса на амонификация на карбамид, е възможно да се използва хранителната среда от следващия състав (g / 1 дестилирана вода): калиев тартарат или натрий (Wincase, може да соли на ябълчена киселина) - 5.0; карбамид - 5.0; ДА СЕ2 НРО 4 - 0.5; MgS04 · 7H2O - 0.2.

Средата се разпръсква в 30 ml в колбите на 100 ml, заразявайки почвата и се поставя в термостата при 25-30 ° С. За откриването на амоняк, лентата на червената лакмус се суспендира под памук. След 3-5 дни, културата се анализира. Инсталирайте селекцията на амоняк върху образуването на червена лактатна хартия.

Микроскопично.За да изследват нарушените амонификационни патогени от едва забележителния филм на повърхността на средата, препаратът се приготвя и оцветено с фуксин. Най-често клетките се наблюдават под микроскопаUrobacillus pasteurii (ти. Пробатус), по-рядко - planosarcina ureae (Фиг. 5 от заявлението).

Проверете въпроси и задачи

Минерализация на азота. Бактерии, участващи в протеинови амонификации.

Разлагане на нуклеинови киселини.

Разлагане на урея, пикочни и хиприви киселини.

Характеристики на нитрификационните процеси. Микроорганизми, които образуват нитрати в почвата.

Възстановяване на нитрати и нитрити в природата.

Денитрификация (разсейване на нитратно генериране).

Асимилация нитраекултура.

Azotfixation Безплатни микроорганизми.

Асоциативно азотиране.

Симбиотично азотизиране. Характерно за бактериите на нодула.

Взаимодействието на бактериите на нодула с собственик на растение. Образуването на бактерии.

Симбиотично азотиране на не-растения.

Химия на азотни процеси.

14. Попълнете таблица номер 8.

Таблица номер 8. Характеристики на процесите на цикъла на азот и микроорганизми, включени в трансформацията на азотни съединения

Амонификация на урея

I фаза нитрификация

Symbiotic Azotfixation

Урок номер 9.

Трансформация на азотния микробразъм

Предназначение: Да изучава особеностите на трансформацията на микроорганизми на азотни минерални съединения.

Задачи

1. Да изучава особеностите на потока на нитрификационни процеси (I, II фаза) и микроорганизмите, участващи в тях.

2. Да изучава особеностите на процесите на денитрификация и микроорганизмите, участващи в тях.

3. Да изучава особеностите на потока от азотни процеси и микроорганизмите, участващи в тях.

Материали и оборудване. Колби с течна ESHBI среда за култивиране на нитрофиси, среда на грозде за отглеждане на нитрицири, Hority сайт за култивиране на денитрицери, микроскопично оборудване за боядисване, микроскопи.

Основни понятия. Нитрификация (I и II Фаза II), азотна имобилизация, асимилантно генериране на нитрати, генериране на нитра от дистрибулация (денитрификация), азотирани азотификационни азотификации, симбиотична атрогеназа, легехоглобин, нитрогеза, нитратеразаза.

Прогрес

Номер 1. Проверете микроорганизмите, участващи в процесите на нитрификация, направете чертеж. За натрупване на нитрифициране на бактерии те използват хранителната среда S. N. Vinogradsky (g / l дестилирана вода):

Средствата се стеслизират и се изливат в колби със слой от 1.0-1,5 см и се заразяват с гарнирната почва с бучка. Колбите са затворени с памучни тапи и се поставят в термостат при температура 25-28 ° С за 14-21-те дни.

Микроскопично. Проучване на нитрифицирането на бактерии от течността в колбите приготвят микроспекти. В областта на изгледа на микроскопа се вижда натрупването на овални или наклонени клеткиНитрозомона (първа фаза) и къси нарязани клеткиNitrobacter (втора фаза). Представители на натураНитрозомони. (Фиг. 6 Приложения) Те имат овална форма, в някои случаи се приближават към топката, притежават мобилност и са оборудвани с една дълга флагела. Различни видовеНитрозомони. много широко разпространен в почвата и се различават един от друг по величина или форма на клетки, както и съотношението към активната реакция на средата. Най-изучаванитеНитрозомонас Европа. Корполи, или овални, 0.5-1.5 μm, подвижни, с дълга полярна, разположена флагела.Nitrobacter. - малки заоблени, яйцеобразни или крушовидни пръчки, единични, единични или свързани в малки групи, заобиколени от лигавична капсула(Фиг. 7 от заявлението). Сред бактериите от този вид е обичайно да се прави разлика между два вида:Nitrobacter Winogradskii и Nitrobacter agilis.

Окисляването на амониева форма в нитрита също се извършваНитрозоцистис и нитроспоспира. нитрит до нитратиНитроспина.

Номер 2. Проверете микроорганизмите, които извършват процесите на денитрификация, направете чертеж. За натрупване на дентирични бактерии се използва следната среда (в G / L): SEGNETOVA сол - 20; Kno.3 - 2.0; До 2 НРО 4 - 0.5; MgS04 · 7H20 - 0.2; FESO 4 · 7N 2 О, следи. Средата се разля с висок слой в големи тръби до ръба и стерилизира. Разбъркайте внимателно с почвата, за да отстраните въздушните мехурчета и затворете гумената тръба, в която стъклената тръба, отворена от 2 страни, е подобрена в средната част. Щепълта измества част от течността в стъклената тръба. Под щепсела не трябва да бъдат мехурчета въздух. Вазелинното масло се излива в тръбата над средата за създаване на анаеробни състояния, поставени в термостат при температура 30 - 35 ° С в продължение на 5-6 дни.

Микроскопично.От средата на субстрата се приготвя чиста пипета и се приготвя фиксирано и боядисано лекарство, което след това се разглежда под микроскоп с потапяща система. За приготвянето преобладават нещастни сферични клетки или къси пръчициПаракокски денитрефифики (бактериален денитрифийс ) (Фиг. 7 от приложението). На средата с феронетична сол по-често се развиваP. Stutzeri (Achromobacter Stutzeri - палкоидни клетки в размер 2.0 - 4.0 μm, подвижни) (фиг. 7 от приложението). В този случай културата образува зелено-жълт флуоресцентен пигмент. Също така свързани с денитрицейстите:Pseudomonas aeruginosa. - малки пръчки (размер 1.0 - 1.5 цт), единични или свързани с двойки, подвижни, носят 1 - 2 полярни фасада. Често се наблюдава със среда за зелено, особено когато се използва въглерод от лимонена киселина, което показва развитиетоPseudomonas флуоресценции. - Малки пръчки (1,0 - 2.0 μm по размер), подвижни, имат 3 - 4 полярни фасада.

Номер 3. Проверете микроорганизмите, участващи в фиксирането на атмосферния азот, направете чертеж. За натрупване на свободен жизнен азот се използва Eshbi сряда. Състав на хранителната среда (G / L дестилирана вода):маннит, глюкоза или захароза - 20.0; ДА СЕ2 NRA 4 - 0.2; MgS04 - 0.2; NaCl - 0.2; K2S04 - 0.1; Sasoz - 5.0.

Хранителната среда, която не стерилизира, се бутилира в колби от 100-150 ml, слой 1 - 1,5 cm и инфектиране с оранжерийна почва (1/3 от чаена лъжичка). Колбите са затворени с памучен тампон и се поставят в термостат при температура 28 - 30 ° С.

След 5 - 7 дни на повърхността на средата се образува кафяво-кафяв нитотобактерно фолио. Флуидът в колбата се разпенва и прави мирис на маслена киселина, която показва развитието в бактериалната средаCl. Pasteurianum.

Микроскопично. Пригответе фиксирана микрокрап от повърхностния филм. Най-често срещаните два вида Azotobacter са най-често срещаните:Azotobacter Chroococcum - При млада култура има изоставащи, подвижни, 3-7 микрона по размер.(Фиг. 8 от заявлението). В старата култура, наклонените клетки са свързани с двойки и сарци-подобни пакети, обикновено заобиколени от капсула за размяна. В клетките много блестящи зърна на волута. Колонии на плътни подхранващи меки лигавици, разпръскващи или изпъкнали, безцветни или боядисани в тъмнокафяв до черен цвят;Azotobacter Vinelandii. - В младата култура на клетките на лепкави, в размер 2-3 микрона. В старата култура формата на клетките сферични. От капка течност приготвя подготовкаClostridium pasteurum - мобилни хакерцини, 3 - 7 микрона, единична или двойка и къси вериги(Фиг. № 1.10 Приложения). Овалните спорове се формират ексцентрично, а клетките на пионера приемат формата на лимон. Много гранули се натрупват в клетки. Колонии белезникави, гладки, лъскави.

Проверете въпроси Вижте Урок № 8.

Урок номер 10.

Предназначение:

Задачи:

Разгледайте механизма за изтичане на ферментация на алкохол и морфология на патогените.

Разгледайте механизма на потока и видовете ферментация на млечната киселина, морфологията на причинителите му.

Разгледайте характеристиките на превръщането на алкохол в оцетна киселина и морфология на бактериите на оцетната киселина.

Разгледайте механизма на потока на маслините и морфологията на неговите патогени.

Материали и оборудване. Саламура, кефир, хлебни дрожди, бира, среда за отглеждане на мазна кисели бактерии, оборудване за боядисване на наркотици, микроскопи.

Основни понятия. Ферментация на алкохол, ефект на пастьорство, хомоформативна лактатна ферментация, хетероформен ферментация на млечната киселина.

Прогрес

Номер 1. Проверете микроорганизмите, участващи в алкохолната ферментация, направете чертеж. 50 ml от 20% разтвор на захароза се излива в колбата за 250 mers и около 1 g дрожди, разведени в 10 ml захарозни разтвори (20%). Затваряне и поддържане на температура от около 35-40 ° C в продължение на няколко дни.

Микроскопично.Повечето от видовете културни дрожди, използвани на практика, принадлежат на семействотоSaccharomyces (Saccharomices cerevisiae, \\ t фиг. № 1, 2 приложения) иSchizosaccharomyces. Тези дрожди се различават от дивата природа, че те могат да издържат на големи концентрации на захар (до 70%) и алкохол (до 14%), да се развият при рН 4-6, образуват по-малко ко-продукти на ферментация.

Номер 2. Прегледайте микроорганизмите, включени в ферментацията на млечната киселина, направете чертеж.За да се запознаете с бактериите на ферментацията на млечната киселина (хомофермарментална ферментация), можете да използвате готови млечни продукти (яре, ацидофилен, кефир) и солен разтвор (хетероферментативна ферментация). Тези продукти се нанасят с цикъл на плъзгача и правят тънка намазка. Оцветени за 3-5 min воден разтвор на метиленово синьо.

Микроскопично.При продукти на млечна киселина, най-често срещаните патогени на хомофермарменталната ферментация са най-често срещани -Streptococcus lactis. (Фиг. 9 от приложението), с вид овални кокци с диаметър 0.5-1.0 цт, са разположени в културата на двойки (диплококи) или къси вериги (стрептококи), по-рядко от единични клетки;Lactobacillus bulgaricus. (Фиг. 9 от приложението) е голям стик (дълъг 4-5 цт), фиксиран, грам-положителен, е разположен под формата на отделни клетки и къси вериги, оптималната температура на развитие от 40-45 ° C ШпакловкаLactobacillus acidophilus - морфологията е близо до български, но има още едно оптимално развитие на температурата - 37 ° C.

Сред патогените на хетероформен ферментацията са често срещаниLactobacillus brevis, lactobacillus brassicae, leuconostoc mesenteroides et al. (микрофлора солев разтвор). Бяла или сметана кадифтна набръчкана филм на повърхността на солевия разтвор или на кефир говори за присъствиетоGeotrichum candenum ( OIDIUM LACTIS.(Фиг. 9 от приложението) е млечна форма, която винаги придружава ферментация на млечна киселина.

Номер 3.Проверете микроорганизмите, участващи в превръщането на алкохола в оцетна киселина, направете чертеж.Коничните колби изляха тънък слой бира (0.5-1.0 cm). Колбите са затворени с памучни тапи и поставят в термостат при температура от 30 ° С. След 5-7 дни, естеството на формираните филми, микроскопични боядисани удари, описват.

Микроскопично. Бактериите на оцетната киселина се комбинират в родAcetobacter., типичен изгледAcetobacter Aceti. (Фиг. 9 от приложението) е представено от слабо движещи се лепкави елиптични клетки с ширина 0.6-0.8 с дължина 1.0-3.0 цт, единична, по двойки или вериги. Често образува инвелюционни форми под формата на подути, разклонени или нишковидни образувания. Бактериите на оцетната киселина се осветяват лесно от бира.

Номер 4.Проверете микроорганизмите, участващи в ферментацията на мазна киселина. Суров картофите се нарязват на филийки, напълнени с епруветка на 1/3 обем, добавете щипка от тебешир и се пълни с вода до ръба. Изпитваните тръби се поставят върху водна баня при температура 80 ° С в продължение на 10-15 минути. След това тръбите са затворени с тапи и се прехвърлят към термостат с температура от 250 С след 2-3 дни в течността се открива бактериите на ферментацията на мазна киселина.

Микроскопично.Открити са фиксирани препаратиCl. Rasteurianum, cl. Бутирум. (Фиг. 1, 10 от приложението) - мобилни пръчици със заоблени краища, единична и парна баня. В старите култури един от краищата на клетките открива спор.

Контролни въпроси

Алкохолна ферментация.

Дрожди. Форма, структура, възпроизвеждане и класификация.

Оксидификация на етилов алкохол в оцетна киселина.

Химия и причинно-следствени агенти на млечна ферментация (Homofermental тип).

Химия и причинно-следствени агенти на млечна ферментация (хетеротенен тип).

Мазна киселинаи ацетобутил ферментация.

Мазна киселина ферментация на пектинови вещества.

Декомпозиция на анаеробна фибри.

Окисляване на микроорганизми на влакна.

Попълнете таблица № 9 "Характеристики на процесите на ферментация".

Таблица номер 9. Характеристики на въглеродните процеси (ферментация и окисление на азотни съединения)

Въпроси за самообучение

Методи за хранене и прием на хранителни вещества.

Хранителни нужди на микроорганизми.

Видове хранителни микроорганизми.

Метаболизъм на микроорганизмите. Ферментация, дишане, фотосинтеза.

Урок номер 11.

Трансформация от микроорганизми на въглеродни съединения

Предназначение: Да изучавате особеностите на различни видове ферментация и морфология на техните патогени.

Задачи:

Проверете ферментационния механизъм на пектинните вещества и морфологията на патогените.

Да проучи особеностите на превръщането на целулозата в аеробните условия и морфологията на патогените.

Разгледайте характеристиките на ферментацията на целулоза в анаеробните условия и морфологията на нейните патогени.

Материали и оборудване. Акумулативни култури на микроорганизми, които извършват ферментацията на пектин вещества, декомпозиция на влакна, микроскопи, оборудване за боядисване на наркотици.

Основни понятия. Ферментация на мазна киселина, пектин, пектиназа, целулоза, целулаза.

Прогрес

Номер 1.Разгледайте микроорганизмите, участващи във ферментацията на пектинните вещества, направете чертеж. За изолиране на пектинуклеарни бактерии се използва ленено или зрелищна хранителна среда. От стъблата се приготвят лапенци с дължина 5-7 cm, поставена в тестови тръби, излива се с чешмяна вода и се вари 10-15 минути. Извличащи се вещества, които могат да служат като въглероден източник за съпътстващи маслени киселинни бактерии. Водата се излива, камъните се изливат с нова част от вода, тръбите са плътно затворени с памучни тапи и стерилизират в автоклав при 1 atm 20 минути. Когато епруветките се охлаждат, средата се заразява с парче прясна лен. Инфектираните тръби се поставят в термостат при температура от 35 ° С. След 3-5 дни започва процесът на ферментация на пектин, течността е изтънена и разпенване.

Микроскопично.За да се изследва морфологията на бактериите на ферментацията на пектин, се подготвят за продължителност. Маратонки се отстраняват от тръбата, натискайте капка течността върху слайдното стъкло, пригответе фиксирани и продължителни препарати (в разтвор на Лугол). Клетките се виждат на препаратаClostridium pectinovorum. иClostridium Felsineum., вегетативен и спешен, боядисан от йод върху грануин в тъмно синия цвят (фиг. 9 от приложението).

Номер 2.Изследване на микроорганизмите, участващи в разграждането на фибри (анаеробни условия), направете чертеж.Да се \u200b\u200bполучи акумулативна култура на анаеробни формибактерии от целулозиизползвайте Imchenhetsky сряда. В Около 1-2 g филтърна хартия или памук, кръгло плоско дъно, и се излива необходимостта от следващия състав към средата (в g / l): knh4 HPO.4 - 1.0; KN.2 Ro.4 - 0.5; ДА СЕ2 АТРО4 - 0.5; CAC1.2 - 0.03; Пептън - 5; MgSo.4 - 0.4; Sacoo.3 - 2.0; NaCl - 0.5; MNSO.4 и Фесо.4 следи;рН на средата 7.0-7.4. Средата е заразена с малко количество почва, затваряне на колбата с кортикален корк с отвор за освобождаване на газове и се поставя в термостат при 30-35 ° С. Избирателните условия в този случай се определят чрез наличието на целулоза - въглероден източник, който може да се консумира само чрез специфични целулозоризиращи бактерии, които имат ензимна целулаза, както и анаеробни условия. Пептън, въведен в сряда в малка сума, силно стимулира процеса на ферментация. След 7-10 дни започва ферментацията на целулозата, която продължава 2-3 седмици. Филтърната хартия като ферментира е леко разтопена, пожълтяваща и постепенно се сгъва.

Микроскопично. Микроскопия лист хартия. При анаеробните условия процесът на декомпозиция на фибри се извършва от бактериите на родаClostridium.. Cl. Omelianskii. (Фиг. 9 от приложението) има формата на дълги грешки клетки до 8 цт, в стари култури от около 10-15 цт дължина, са разположени поотделно или свързани с нишките. Спорите са сферични, образуват в края на клетката, клетката приема формата на барабана. Тя се освобождава от почвата и водата. Оптимална температура на растеж от 30-35 ° C.

Номер 3.Изследване на микроорганизми, участващи в разлагането на фибри (аеробни условия), направете чертеж.За изолиране на аеробни клетъчни разпръскващи бактерии се използва захранващата среда на хтетеринсон. Съставът на средата (g / l): до2 АТРО4 - 1.0; NaCl - 0.1; SASL2 - 0.1; FECL3 - 0.01; MgSo.4 - 0.3; Нано.3 - 2.5; РН на средата 7.2-7.3. Стерилната хранителна среда се излива в конурираните колби със слой от 1.5-2.0 cm, средата е заразена с бучка почва и на повърхността на средата се намалява засмукващ се филтър с конус. Колбите са затворени с памучни тампони и се поставят в термостат при температура 25-30 ° С в продължение на 10-14 дни. На границата на хранителната среда и въздуха се създават оптимални хранителни условия и аеробното дишане на клетъчните неразричащи бактерии. В тази зона, процесът на унищожаване на филтърна хартия е най-интензивно. След 8-10 дни на филтъра се появяват жълто-оранжеви петна от колониите на клетъчни разпространени бактерии. Хартията се разлага и филтърът постепенно се установява на дъното.

Микроскопично. От унищожените маси на фибри в колба микробиологичната верига се приготвя намазка в капка течност. Най-често на лекарството, открити представители на поръчкитеFlybacteriales. иЦитофагали. Групи от плъзгащи бактерии (фиг. 10 от приложението).. \\ TЦитофага. Представлява се от дълги халоидни клетки със заострени краища, няколко извита (2-10 цт). Колонии от жълто, оранжево, кафяво-кафяви, гладки, лигавици.

. \\ TSellvibrlo. Представлява се от малки, леко извити движещи се пръчки (2-4 микрона). Колониите са скрити лигавични мембрани. РолкаCellfalcula. Тя има формата на къси дебели извити пръчки със заострени краища (2,0 * 0,7 микрона).

. \\ TСорагиум. При младата култура има форма на дебели леко извити лепкави клетки със заоблени краища (2-5 микрона). При стареенето на културата се образуват плодови тела, състоящи се от микроцист. Комбидоидните клетки се скъсяват, покрити с дебела обвивка, закупуване на грешни очертания. Колонии на ярко оранжев, лилав цвят.

. \\ TПолиегиум. Той е представен от почти прав движещи се клетки със заоблени краища (3,5-8 микрона). При стареене се образуват овални микрохини, които са свързани и плодовите тела на крушовата форма. Плодовите тела от жълт, оранжев цвят, седнете директно върху субстрата.

В допълнение към бактериите, мухъл гъбите участват в аеробното унищожаване на фибри.Aspergillus, Penicillium, Fusarium, Cladosporium, Trichoderma И някои актиномицети.

Проверете въпросите вж. Урок № 10.

Урок номер 12.

Екология на микроорганизмите

Предназначение: Разгледайте влиянието на факторите на околната среда върху растежа и развитието на микроорганизмите.

Основни понятия.Свързани психоризми, психотрофни микроорганизми (по избор психорици), термофили, инспектиращи микроорганизми, халобили, лиофилизация, свързани аероби и анаереоби, микроерейофи, аеро-ореароби, антисептици.

Контролни въпроси

Ефекта на температурата върху растежа и развитието на микроорганизми. Екологични групи от бактерии по отношение на температурата.

Ефекта на влажността върху растежа и развитието на микроорганизми.

Ефекта на светлината и различните радиация върху растежа и развитието на микроорганизми. Ефект на магнитното поле.

Ефекта от концентрацията на кислород върху растежа и развитието на микроорганизми.

Ефекта на реакцията на средатавърху растежа и развитието на микроорганизми. Съединения и йони токсични за бактерии.

Адаптивни реакции на микроорганизми.

Урок номер 13.

Определяне на чувствителността на бактериите към антибиотици

Предназначение: Да се \u200b\u200bопредели чувствителността на микроорганизмите към антибиотици.

Задачи:

1. Определяне на чувствителността на микроорганизмите към антибиотици чрез дифузия в агар, използвайки хартиени дискове

Материали и оборудване.Петрични ястия с MPa, стерилни дискове, навлажнени с антибиотични разтвори, чисти култури на сапросните бактерии и мухъл гъби, пипети, алкохол, шпатули.

Основни понятия.Антибиотици, бактериостатични и бактерицидни ефекти, R-фактори, съпротивление.

Прогрес

Номер 1. Определяне на чувствителността на микроорганизмите към антибиотици чрез дифузия в агар с хартиени дискове.

Методът на дискотека за определяне на чувствителността на микроорганизмите към антибиотици се основава на регистрация на диаметъра на зоната на растеж около хартиения диск с антибиотик. На повърхността на хранителния агар в петри, ходене с тестови микроби, хартиени колела, импрегнирани с антибиотици и Чашите се инкубират при 37 ° С. Наличност на зона за забавяне на микробното растениедискютките показват чувствителността на патогена към лекарството, липсата на зона за забавяне на височината при стабилност.

Хода на дефиницията. Културата на микроорганизмите се прилага за стерилни петриеви ястия с MPA. Като сеитба се използва като сеитбен материал - 0,2 ml бактериална суспензия се нанася върху повърхността на MPA и е равномерно разпределена чрез разклащане на чаша с последващо всмукване на излишната течна пипета.

Чашите се изсушават в продължение на 30-40 минути при стайна температура. След това повърхностите, импрегнирани с различни антибиотици, се отнасят върху повърхността на засадната среда с пинсети. Дисковете се нанасят върху повърхността плътно за близък контакт със средата. Дисковете се поставят на еднакво разстояние един от друг и около 2 см от ръба на чашата. Чашите, поставени в термостата, обърнаха с главата надолу дъното или поставете под капака на филтърната хартия, за да се избегне замъгляване на тревата чрез кондензационна вода и се инкубира при 37 ° С в продължение на 18 часа.

Оценка на резултатите.Използвайки линейката, диаметърът на микробните зони за забавяне на растежа се определя около дисковете, включително диаметъра на самия диск. Единични колонии или филм за растеж на тънък филм в зоната за забавяне на растежа не се вземат предвид. Липсата на зони за забавяне на растежа на микроби около дисковете показва липсата на микробна чувствителност към този антибиотик. С зоната за забавяне на растежа на микроби с диаметър до 10 mm, щамът се счита за малко чувствителен. Зоната за забавяне на растежа на микробите повече от 10 mm показва чувствителността на напрежението. Колкото по-голям е зоната за забавяне на растежа, толкова по-висока е чувствителността на микроорганизмите към антибиотиката. Резултатите да се прилагат за таблица номер 10.

Таблица номер 10. Чувствителност на микроорганизмите към антибиотици.

Антибиотични свойства на стрептомицин.

Антибиотични свойства на пеницилин.

Урок номер 14.

Основи на медицинската микробиология

Предназначение: Изследват микроорганизмите - патогени на животни и хора.

Литература

Лебедева m.n. Микробиология. - m.: "Медицина", 1969.

Основи на микробиологията, вирусологията и имунологията / под. Редакционен съвет Вобиев A.A., Krivoshein YU.S. - m.: Mastery, 2001.

Въпроси за дискусия

Характеристиката на патогенните кокс върху примера на стафилококи. Възпалителни-гнойни кожни заболявания. Септицемия.

Характеристики на патогенните кошчета при примера на стрептококи. Локализирани гнойни възпалителни инфекции, тонзилит, аретлин.

Характерно за патогенните кости при примера на пневмокок. Пневмония.

Характеристики на патогенните кошчета върху примера на менингококи. Менингит.

Характеристики на патогенните кошници върху примера на гонокок. Гонорея, Бленоррея.

Характеристики на грам-негативните не-относителни бактерии върху примера на пръчка за чума. Чума.

Характеристики на грам-отрицателни не-относителни бактерии върху примера на тулевите пръчки. Толара.

Характеристика на грам-негативните не-относителни бактерии върху примера на Brucell. Бруцелоза.

Семейство на чревни бактерии при примера на чревна пръчка.

Характеристики на групата на тифовид и паратифозните бактерии. Коремни тифове и паратитен.

Причинителни агенти на храната токсикоинструмент. Салмонелоза.

Характеристики на патогените на дизентерия. Видове дизентерия.

Характеризиране на холера вибрира.

Структурата на капсулните бактерии върху примера на Klebsiell.

Характеризиране на ясилните сибирски язви. Форми на сибирски язви.

Характеристики на хемофилни бактерии при примера на кашлица.

Патогенен анарос при примера на патогените на газовата гангрена.

Патогенен анарос върху примера на тетанус.

Патогенен анарос върху примера на патогените на ботулизма.

Характеристика на дифтерийната пръчка.

Характеристики на киселинно-устойчиви бактерии върху примера на туберкулозни пръчки и пръчки от проказа.

Характеристики на патогенни гъбички върху примера на актиномицети. Дерматомикоза.

Характерно за патогенните спирохети върху примера на бледо трепонам. Сифилис.

Характеристики на патогенния Spitochete върху примера на спирочет за връщане титър.Това ръководство накратко обобщава теоретичните основи на санитарната микробиология, както и някои експерименти, свързани с определянето на различни показатели за въздушна микрофлора, вода и почва. Различният се състои от две секции - обикновено събрана медицинска микробиология и клинична микробиология. В първия участък основните методи на микробиологични изследвания, методите на специфична терапия и предотвратяване на инфекциозни болести, във втория - методите на тяхната лабо ...

  • 1.32 MB.
  • добавено 11.06.2011.

Ръководител. Cemetype. - КЕМЕРОВО, 114 p.
Темата и задачите на микробиологията. Основните свойства на микроорганизмите
Историческо егато на микробиологично развитие. Перспективи за развитие и постигане на съвременна микробиология в националната икономика, \\ t хранително-вкусовата промишленост.
Принципи на систематиката. Структурната организация на микроорганиза ...

Насоки

да извърши практическа работа

за професия:

19.01.17 Готвач. Сладкарница

Разработчик:

Veretennikova Om. Учител

Valuyki, 2016.

Обяснителна бележка

Реални насоки за прилагане на практическа работа по дисциплината "основи на микробиологията, канализацията и хигиената в производството на храни »Са разработени въз основа на федералния държавен образователен стандарт (наричан по-нататък - GEF) по професия:

01/19/17 Кук. Сладкарница

Методически инструкции За практическа работа са предназначени за студенти от първа годинаИзпълнението на практическа и лабораторна работа е насочена към решаване на следнотозадачи:

    увеличаване на информираността и силата на изучаването на знания;

    развиват способността да се анализира, сравнява изучаваните обекти, провеждане на изследвания, да правят таблици, схеми, клъстери, да се направят изводи;

    разработване на ученици логично мислене, информативни способности, независимост;

    научете използването на знанията и уменията в живота.

Когато изучавате, закрепването на материала използва следните видове независима работа:

    Работа с текстов текст.

    Работа с презентация.

    Работа с изучавания обект.

    Работа с маса.

    Работа по компилиране на клъстера, схеми.

    Работете с готови микрореми. Подготовка на микро-препарати.

Структурата на насоките:

1. Тема
2. Целта на работата
3. Оборудване за работа
4. Производство
5. Контрол и актуализиране на познанията на учениците, необходими за извършване на работа
6. Условия за изпълнение

Всяка практическа и лабораторна работа трябва да бъде оформена в преносими компютри за практическа работа в съответствие с препоръките.. (Приложение 1)

Наблюдението на резултатите от завършената работа се извършва въз основа на писмен доклад и резултатите от наблюдението на учениците в хода на работата в съответствие скритерии за оценка на изпълнението практическа работа.

Списък на практическата работа

Практически работен номер 1

Микроскопско устройство и правила за работа с нея.

Практическа работа # 2 проучване под микроскопа на морфологията на дрождите и мухъл

Практически работен номер 3 схеми на структурата на бактериалните клетки, дрожди, гъби.

Практически номер 4-5

Практически номер 6Схеми за подготовка на дезинфекциращи решения и тяхното съхранение

Практическа задачаумения за наука за прилагане на теоретични знания чрез дисциплина на практика

Практически работен номер 1 микроскопско устройство и правила за работа с нея.

Цел на работа: Разгледайте устройството на лекия биологичен микроскоп и овладете правилата за работа с нея.

Оборудване, материали: Микроскоп; Готови микрокредити

Микроскоп (от гръцки.micros. - малък I.скопио. - Гледам) е оптично устройство, състоящо се от три основни части: механично, оптично и осветление.

Схемата на лекия биологичен микроскоп е представена на фиг. един.

Механична част или стативът се състои от крака, бази, държач за тръби, материална таблица, монокулярна дюза (тръба), револвиращо устройство, груб фокус (винт на макрометъра) дръжки, тънък фокус (микрометричен винт) дръжки.

Тубус - визуалната тръба на микроскопа. В горния отвор на тръбата свободно вмъкнат окуляра, в долния край на тръбата има револвно устройство (револвер), което се завинтва в долния край на оста. Завъртане на револвера, можете бързо да промените лещите, докато работите с микроскоп, строят всеки обектив за тръба. Обективът трябва да бъде центриран, т.е. Инсталиран на оптичната ос на микроскопа. За това револверът се обръща около оста, докато щракне.

Таблицата на субекта служи за настаняване на проучването на лекарството. Лекарството е фиксирано на масата с скоби (терминали). В центъра на темата маса е дупка за преминаването на светлината и осветяването на лекарството. В някои микроскопски дизайни, масата може да се движи с винтове, разположени по периферията на темата. Това дава възможност за разглеждане на лекарството в различни области на виждане.

1 окуляр

2 – монокуларна дюза

(Тубус)

3 - револвиращо устройство

4 - лещи

5 - Тематична таблица

6 - кондензив

7 - колекторни лещи

8 - покровител с лампа

9 - панта

10 - дръжка за движение на конденза

11 - Тънка дръжка на фокусиране (микрометричен винт)

12 - груба дръжка на фокуса (макрометричен винт)

13 - Държач за тръби

14 - винт за прикрепване на дюзи

Фиг. единСхема на устройството на лекия биологичен микроскоп

Дръжки от груб и фин фокус (макро- и микроновинтци) се използват за преместване на тръбата нагоре и надолу, което ви позволява да го настроите на необходимото разстояние от лекарството. Когато въртят винтовете по посока на часовниковата стрелка, тръбата се понижава и при въртене обратно на часовниковата стрелка, тя се издига. Когато винтът на макромера се завърти, лещата се монтира приблизително на фокуса, т.е. На това разстояние от лекарството, при което се извършва видимо. Оборотът Macrolint ви позволява да преместите тръба с 20 mm. Микрометричният винт служи за точно инсталиране на фокуса. Пълният ред се движи с тръба с 0.1 mm. С микрокрап, трябва да се свържете много внимателно: въртенето на microvint не е повече от 180 0 По един или друг начин.

Оптична част това е най-ценната част от микроскопа. Състои се от лещи и окуляр.

Okular (от лат.окула. - окото) се състои от две плоски лещи, затворени в обща метална рамка. Горната леща - око (увеличаване), по-ниско събиране. Разстоянието между лещите е равно на половината от фокусното разстояние на тяхната фокусно разстояние. При окуляри с голямо увеличение фокусът е по-къс, толкова по-малък и дължината на окуляра. Между лещите има диафрагма, която ограничава полето на видимост и забавяне на крайните лъчи на светлината. Вътрешните микроскопи са оборудвани с три сменяеми окуляри, увеличаването на която е показано върху корпуса на окуляра (X7; X10; X15).

Лещите са завинтени в жаковете на въртящото устройство и се състоят от система от лещи, затворени в метална конструкция. Предната (предна частна) леща е най-малка и само тази, която дава увеличение. Останалите лещи в лещата правят само недостатъците на получения образ (явления на сферична и хроматична арекция) и се наричат \u200b\u200bпоправителни.

В турбинните жакове четири леща се завинтират, което е показано на корпуса на лещата (X8; X20; X40; X90 или 100). Всяка леща се характеризира с нейната фокусно разстояние (разстоянието между стъклото и предния обектив): лещата X8 има фокална дължина от около 9 mm, лещата X40 - 0.65 mm, лещата X90 - 0.15 mm.

Осветление микроскопът се състои от двойно осветен кондензатор, ирис-диафрагма и нисковолтова касета с нажежаема жичка, подадена през понижаващ трансформатор от мрежата на напрежение 120 ... 220 V.

Кондензаторът служи за по-добро осветяване на лекарството. Той събира светлинни лъчи в сноп и ги насочва през дупката на темата за лекарството. Използвайки дръжката, за да преместите конденза на кондензато, тя може да бъде преместена нагоре и надолу, поради която ъгълът на сближаване на лъчите и следователно, степента на осветяване на обекта се променя. Колкото по-висока е позицията на кондензатора, толкова по-добра е лекарството.

Ирис-диафрагмата се намира под конденза и служи за регулиране на лек поток, който влиза в кондензатора. Състои се от метални сърповидни плочи. Можете да разширите или стеснете отвора на диафрагмата, като използвате специален лост. Когато се въртят по посока на часовниковата стрелка, отворът на ирис-диафрагмата се увеличава и следователно, степента на осветяване на обекта се увеличава.

Когато работите с потапящи лещи, степента на осветяване на лекарството трябва да бъде максимална, поради което завесата на ирисовите диафрагма е отворена и кондензаторът се повдига до крайната горната позиция.

Когато работите със сухи лещи, като правило, изследвайте неоцветените обекти. За да се постигне контраст, кондензаторът е намален и дупката на ирисовите диафрагма се намалява.

Условия за работа с микроскоп

    На работния плот микроскопът постави тръбата за себе си на разстояние 3 ... 5 см от ръба на масата;

    Включете микроскоп в мрежата и задайте правилното осветление

    Изследваното лекарство е поставено на масата на темата и го закрепва с терминали;

    Необходимият обектив се поставя под тръбата и използването на макрос и микроновинтци инсталират фокална дължина. Така, когато работите с потапящи лещи, лекарството е предварително нанесено капка масло и внимателно спуснете държача на тръбата към контакт със стъкло. След това внимателно гледайте в окуляра, много бавно вдигнете тръбата, завъртете го обратно на часовниковата стрелка, докато се вижда изображението. Точното полагане на лещата върху фокуса е направено от микрометричен винт. Когато работите със сухи лещи, лекарството първо се разглежда с лещата X8. Вдигане с макролинт на държача на тръбата и внимателно разглеждане на окуляра, задайте фокусното разстояние (около 9 mm) и постигане на дефиницията на изображението, използвайки микрометричния винт. След това премествайте масата или стъклото на обекта, инсталирайте областта на лекарството в центъра на полето, което е по-добре видимо за изучаването на обекта. След това завъртане на въртящото се устройство около неговата ос, обективът на X20 или X40 се поставя под тръбата. В същото време под тръбата не трябва да получавате лещата x90. В револвиращото устройство лещите са подредени по такъв начин, че ако е намерено изображение с лещата X8, след това, когато се има предвид лекарството с по-големи лещи за мащабиране, е необходимо леко да се регулира яснотата на изображението, използвайки винтове за макро и микрометър Шпакловка

    По време на микроскоза трябва да поддържате и двете очи да ги отворите и да ги използвате последователно;

    След края на работата трябва да премахнете лекарството от масата, да изключите кондензатора, поставете лещата X8 под тръбата, отстранете мека кърпа или манометри, напоени в алкохол, потапяне от предната леща на лещата X90, За да сложите леща за марля, пропуснете тръбата.

    Какво е устройството на биологичен микроскоп?

    Какви части и механизми са механичната част на микроскопа?

    Каква е оптичната микроскопска система?

    Какво е част от системата за осветяване на микроскопа?

    Как да настроите системата за осветление при работа с потапящ обектив?

    Избройте основните правила за работа с микроскоп.

Условия за завършване на задачата
1. Място (време) Изпълнение на задачите
Клас за биология

Практически номер 2. Обучение под микроскопа на морфологията на дрождите и мухъл.

Цел на работата : Да се \u200b\u200bзапознаете с морфологичните особености на гъбите и дрожди, намерени в производството на храна. Овладяване на техниката на микроскопското изследване на гъби и дрожди в натрошени капки.

Оборудване, материали: Микроскоп; Подготовка игли, подчинени и покривни очила; филтърна хартия; алкохол; Култура на гъби на ражданетоMucor., Aspergillus., Penicillium., Алтеррейска.Шпакловка Чиста култура на дрождиSaccharomyces.cerevisiae..

    1. Кратки теоретични разпоредби

      1. Морфология и културни признаци на микроскопични гъби

Се нарича вегетативно тяло на гъбимицел . Mycelium се състои от множество преплитащи се тръби, наречениgifami. . Диаметърът на хифи варира от 5 до 50 микрона. В зависимост от сградата, мицелките са разделени на по-високи и по-ниски. Най-високият GIF гъби се разделя чрез прегради (септември) в центъра на който има голямо време. Те растат и се появяват основните дивизии, но не се появяват клетъчни разделения. Така, вегетативното тяло на гъбата е една голяма мулти-клетка. Всички микроскопични гъби могат да размножават вегетативно парче мицел.

В краката на възпроизвеждане се образуват Фикомизецsporangiennostsy. и askoomycetes -konidiyosians. .

Културни признаци на микроскопични гъби

Колонията на микроскопичните гъби по размер е многократно по-висока от колониите на едноклетъчните организми (бактерии, гъби) и често растат по цялата повърхност на хранителната среда в ястия Петри. Консистенцията на колониите с гъби е различна. Фуро-оформени и кожести колонии са оформени, по-рядко приковани. Повърхността на колониите може да бъде пухкава, като памук, кадифена, прахообразна, уеб-форма, резба, кожа или гладка. Когато растат на гъста и течна среда, част от GIF файла, събрани в хранителната среда, образувайкисубстрат мицел, а другата част от GIF файловевъздух мицел под формата на пухкава плака очевидно с просто око. Mycelium може също да бъде безцветен (бял, сисш) или боядисан (черен, кафяв, зелен, жълт и др.). Пигментиран само плодотворен мицел.

Характеристики на микроскопични гъбички на различни класове

Морфологичните особености на гъбите на различни класове са представени на фиг. пет.

. \\ TMucor. . Те могат да бъдат умножени с нематериални и сексуално чрез образуването на спорангизи (фиг. 5). Отвън, спорангите са покрити с тънки шипове от кристалите на калций. При узряване, спорангиите са счупени, раменете на споради се освобождават и отварят от въздушни потоци. На Споранкино след освобождаването на спорангий от спора остава колоната и в долната си част - яката. Цветът на мицелките мукорови гъби е първият бял, после сиво-маслинен, гледка - почувствуващ.

но

б.

в

г.

Фиг. петМорфологични характеристики на гъби от различни класове:

но - Mucor; б. - пеницил; в - Aspergillus; г. - Алтеррейска.

Mukorovaya гъби растат на повърхността на мокро зърно, малц, rooteploods, на хранителни продукти, по стените на сурови помещенията под формата на сивоподлъстен пулс.Mucor.нигикани. Това е причинителят на Kagatnut на захарно цвекло. Много mukorovaya гъби се използват в индустрията за производството на различни органични киселини и алкохоли (видове гъбиMucor.javanicus., Mucor.рацемос.), ензимни препарати, каротеноиди, стероиди.

Представители на ражданетоAspergillus. и Penicillium. Позоваване на класа Ascomettes, който съчетава най-високите микроскопични перфектни гъби. С куп репродукция с помощта на спора, тези гъби образуват кондидиоза (фиг. 5). Аспергилите и пенисила принадлежат към плодовите гъби. Това означава, че по време на сексуалното възпроизвеждане те се формират в специални плодови тела (торби), в които има 8 аскоспори.

Да въже.Penicillium. отнася се около половината от всички гъбички. Те са широко разпространени в почвата, във въздуха на лошо вентилираните помещения и причиняват увреждане на различни продукти и материали. Тази гъба има разклонителен септичен мицел (диаметърът на GIF файлове - 2 ... 3 цт) и септични кониди (приличат на четки), които са в тясно разклонени под формата на процеси - стериги. Конидида, състояща се от трионни вериги от тях. В зависимост от вида на конидията, може да има различен цвят (Бяло, зелено и др.). Много пеници се използват в индустрията, за да получат различни ценни продукти. Сред разпределените щамове от този вид, 25% имат антибиотична активност и такива видовеPenicillium.notatum., Penicillium.хрибогенеум. Използвани като производители на пеницилин. Някои видове пеницило се използват като производители на ензими и липиди. При производството на меки сирена рокфор и камембер използва благородна формаPenicillium.роквифор. иPenicillium.камамбърти..

Гъби РодаAspergillus. има повече от 200 вида. Тези гъби имат добре развит разклонен мицел с многобройни преграда. Отразяват се кодидиентезийците, горните краища на круша и рязко се разширяват под формата на малка глава. На главата има кумулативни стериги с вериги на конидиум, които приличат на водните хребети, изливайки от полирането. От тук имаше име "дори мухъл" (aspergere. на латински - вода, спрей). Conidia Aspergillov, при узряване, придобиват различен цвят, който заедно с други признаци определя тяхната аудилие.

Както и пенисила, представители на видаAspergillus. Широко разпространени в природата и играят важна роля в минерализацията на органични вещества. Те причиняват формоване на много хранителни продукти. Тези гъби се произвеждат от много ценни вещества и се използват широко в индустрията. Така,Aspergillus.нигер.прилагане в промишлеността за производство на лимонена киселина;Aspergillus.terreus. - Итаконова киселинаAspergillus.флавус. иAspergillus.терикола. образуват най-активния комплекс от протеолитични ензими;Aspergillus.oryzae. иAspergillus.awamori. са най-добрите производители на амилолитни ензими.

Гъби РодаАлтеррейска. Обърнете се към класа на несъвършените гъби - Deuteromycetes. Това са най-високите гъби. Те имат септични мицела и къси неадхезивни конидион, които съдържат многоклетъчни състове на круша или лимонната форма (фиг. 5). Гъбата е причинителят на черното гниене - заболявания на корените и плодовете, както и причинителят на увреждане на хранителните продукти.

Морфология на дрождите и техните характеристики

Мая - Това са най-добрите униклуларни гъби. Повечето дрожди се позовават на двата класа гъби - Ascomycets и Deuteromycetam.

Дрождите по отношение на кислород се разделят на допълнителни анарози (в аеробни условия, дишането се извършва и активно натрупаната биомаса и в анаеробни условия те причиняват ферментация на алкохол) и аероби.

Морфологично дрождите са разнообразни. Те се различават един от друг с размери и форма на клетки. Размерите на дрождеви клетки зависят в следните граници; От 2,5 до 10 микрона в диаметъра и от 4 до 20 микрона по дължина. Морфологичното разнообразие от дрожди е показано на фиг. 6.

но

б.

в

г.

д.

д.

й.

z.

Фиг. 6.Форми на дрождеви клетки: A - овален яйцеклетка;

б - цилиндрични; в - апликулант; лимонов; g - seutshop;

d - триъгълна; e - сърп; Добре - флашкоидален; s, и - micpical

Формата и размерите на дрождените клетки зависят от вида, възрастта, хранителната среда, метода на култивиране.

В зависимост от вида на дрождите, тя може да расте вегетативно, за да се размножава чрез убиване (мая на овална форма), двоично разделение (характеристика на дрождена цилиндрична или подвижна форма) или отдел. В допълнение към вегетативната репродукция, дрождите - Ascomycetes могат да бъдат разбити по секс с формирането на askospor.

От дрожди, свързани с класа комети, дрождите-захаромицети на рода са от голямо значениеSaccharomyces. че широко използван в хранително-вкусовата промишленост. Основната биохимична характеристика на тези дрожди е, че те фергат на захари, за да образуват етилов алкохол и въглероден диоксид. Мройги, използвани в индустрията, се наричаткултурни дрожди. Така, в пекарна и в производството на алкохол, конят дрожди се използва в производството наSaccharomyces.cerevisiae.. ДрождиSaccharomyces.незначителен Намерихме използването в производството на ръжен хляб и квас. Пивоварната използва долните дрождиSaccharomyces.carlsbergensis.. Yeast-Superomycetes имат овална форма, вегетативно се умножават от убийството, в неблагоприятни условия се умножават от сексуалната Askospoda.

Някои триони садива природа мая . Тези дрожди са както култивирани, способни на ферментация на алкохол, но в допълнение към алкохол образуват много странични продукти (като алдехиди, по-високи алкохоли, етери и т.н.) и следователно влошават органолептичната производителност на продукта. Тези дрожди са вредители, произведени от различни напитки (бира, вино, безалкохолни напитки), както и патогени на определени храни.

Дрожди - Deuteromycetes могат да се умножат по вегетативен начин. Някои от тези дрожди (например, марояCandida.) Използва се в промишлеността за получаване на захранващ протеин, органични киселини, витамини и други продукти за микробни синтез. ДрождиTorulopsis.кефир. Част от симбиотично стартиране - Kefir Fungus. Други представители на несъвършени (хидродични) дрожди са диви дрожди и причиняват увреждане на много хранителни продукти. Дренажните вредители включват човешка маяПичия., Hansenula., Candida., Родотрола,Торула., Torulopsis., Mycoderma., Trichosporon. и други. Сред кофирните дрожди се намиратлъжливи мая които образуват псевдомицери и растат върху течни субстрати под формата на филми.

    1. Процедура за извършване на работа

    На стъклото с тръба или пипета се прилага голяма капка вода;

    Изберете малко количество мицел от тестова тръба или ястия Петри, наблюдавайки правилата на асепта

    Мицелът е спретнато в капка, нанесена върху слайда и с помощта на две игли го постави във вода;

    Лекарството е покрито с покрито стъкло и леко натиска. Излишната вода се отстранява чрез филтърна хартия.

    Микроскопи Лекарството "смачкано капка" първо с лещата X8 и след това X40 в затъмнено зрително поле (кондензаторът е пропуснат, завесата на ирисовите диафрагма е покрита).

При подбора и микроскопията на наркотиците на гъбите се вземат предвид следните препоръки:

а) род на гъби Mucor. . Изберете BlackName-Grey Fluffy Air Mycelium. По време на микроскопия привлечете вниманието към GIF файловете с спорите на спорите и колоните, които се образуват, когато се освобождава спорантът;

б) род Aspergillus. . Изберете малко пухкав мицел с боядисани конидии, леко задълбочавайте иглата в хранителната среда. Обърнете внимание на незавършени кондиденти;

в) род род Penicillium. . Когато селекцията се опитва да вземе един млад мицел (на границата на боядисания и бял мицел), задълбочавайки иглата в сряда. Обърнете внимание на септични GIF файлове с пискюли.

г) род на гъби Алтеррейска. . Вземете гъбичките в черни места, задълбочавайки се в иглите й. Обърнете внимание на септични мицели, слабо развити кондиоси и голям конфидиум, с вид кръгли или заострени многоклетъчни образувания, наподобяващи "лимонови гранати".

При изучаване на мая Към стъклото се нанася суспензия на дрожди, покрита с покритие, излишната вода се отстранява с филтърна хартия. Микроскопско лекарство и леща X8 и X40.

Регистрация и анализ на резултатите от научните изследвания

Накратко абстрактен теоретичен материал. Те скицират микроскопични модели на изследваните култури от гъби и дрожди, като се вземат предвид морфологичните характеристики на всеки микроорганизъм. Под всеки рисун знак латинското име и увеличаване на лекарството. Опишете културните свойства на изследваните гъби.

Отговорете на тестовите въпроси

    Как се подготвят микроскопичните гъби и дрожди?

    Опишете морфологичните и културните свойства на микроскопичните гъби.

    Какви гъби се използват в промишлеността, за да произвеждат органични киселини, ензими, антибиотици и други ценни продукти?

    Описват морфологичните свойства на дрождите.

    Какви са културните дрожди? В коя индустрия на хранителната промишленост се използват?

Условия за завършване на задачата

Клас за биология

2. Максимално време за изпълнение на задачите: 90 min

Практически работен номер 3: Схемите на структурата на клетките на бактериите, дрожди, гъби.

Цел на работа: Изследва структурата на клеткатабактерии, дрожди, гъби

Материална подкрепа: поучителни карти за практическа работа, учебник, моливи

Упражнение 1.

Изучава учебник материал. Според резултатите от проучването:

Начертайте в преносимия компютър структурата на клетките на бактериите, дрожди и гъби и уточнете отличителните черти

Написани, за да отговарят на въпроси:

1. Каква форма има ли бактериалните клетки?

2. Какви са размерите на бактериите?

3. Какво е възпроизвеждането на бактерии, скоростта на възпроизвеждане?

4. по какъв начин и в какви условия е формирането на спор с бактерии?

5. Дали бактериите са независимо движение?

Вземете резултати от резултатите.

Условия за завършване на задачата

1. Място (време) Изпълнение на задачите

Клас за биология

2. Максимално време за изпълнение на задачите: 90 min

Практическа работа по темата №4 работа с регулаторна и техническа документация: Sanpine 2.3.6. 1079-01. \\ t

Цел на работа: Проверете санитарните изисквания за устройството и поддръжката на кетъринга

Материална подкрепа: инструкции за практическа работа, Sanpine 2.3.6. 1079-01. \\ t

Упражнение 1.

Изучава учебник материал. Sanpine 2.3.6. 1079-01. Според резултатите от проучването:

1. Извличане на фрази: парцел, където е построена кетъринг компания, трябва да бъде

Производствените помещения включват:

Складовите помещения са проектирани в ____________________ части от сградата.

Качествената питейна вода трябва да съвпада

Вентилацията се използва за пречистване на въздуха

Тип.

Всички производствени мощности трябва да бъдат покрити

Светлина.

Нарича се месечно почистване на помещенията

2. Дайте дефиницията на следните понятия:

Дезинфекцията е -

Деризацията е -

Дезинсекцията е -

3. Използване образователен материал, Попълнете таблицата:

Зеленчуков магазин

Месо магазин

Рибен магазин

Горещ магазин

Студен магазин

Сладкарски магазин

Дистрибуция

Условия за завършване на задачата

1. Място (време) Изпълнение на задачите

Клас за биология

2. Максимално време за изпълнение на задачите: 90 min

Практически номер 5 Работа с регулаторна техническа документация: Sanpine 2.3.6. 1079-01. \\ t

Цел на работата : Разгледайте санитарните изисквания за оборудване, инвентаризация, ястия, контейнери. Транспорт и съхранение на хранителни продукти.

Материална подкрепа. : Поучителни карти за практическа работа, Sanpine 2.3.6. 1079-01. \\ t

Упражнение 1.

Разгледайте учебника за материали, Sanpine 2.3.6. 1079-01. Според резултатите от проучването:

1. Отговор писмено на въпроси:

Какво принадлежи на кухненската прибори?

Какви са обозначени ястия?

Какво принадлежи към ястията за трапезария?

Какви материали са разрешени за производство на оборудване и инвентар

за кетъринг предприятия?

Каква е принципната разлика при измиване на трапезарията и прибори за хранене?

2. Избройте правилата и изискванията:

2.1. Санитарни правила за транспортиране на полуготови продукти:

2.2. Санитарни правила за съхранение на храни:

3. Извличане на фрази:

Преди разпределението, качеството на готовите ястия трябва

Когато подавате първите ястия и горещите напитки трябва да имате температура

_______ ° С, втори ястия и странични ястия ______ ° С, порции ястия

температура ______ ° C, студени ястия и напитки ______ ° C.

В терапевтични и превантивни и детски институции през зимния пролетен период поради липса на зеленчукови ястия ___________________ Необходимо е да се обогатят тези ястия.

За качеството на готовите продукти и спазването на правилата на своите празници в кетъринг предприятия са отговорни ________________

Условия за завършване на задачата

1. Място (време) Изпълнение на задачите

Клас за биология

2. Максимално време за изпълнение на задачите: 90 min

Практически работен номер 6 Приготвянето на дезинфекциращи решения и тяхното съхранение

Предназначение: Разгледайте името на дезинфектанти, методи за получаване на дезинфекционни разтвори в зависимост от дестинацията. Подгответе разтвор на дадена концентрация.

Материална подкрепа. : Поучителни карти за практическа работа, Sanpine 2.3.6. 1079-01, учебник

Упражнение 1.

Изследване на материала литература, Sanpine 2.3.6. 1079-01. Според резултатите от проучването:

1. Отговор на въпроси:

Какви решения се отнасят до дезинфектант?

Каква е целта на дезинфекциращите решения?

Какви лекарства се използват като дезинфектатори?

Как да разпознаваме какви ястия са били лекувани с дезинфектитори?

2. Проверете приготвянето и целта на дезинфектанти. Попълнете маса.

3. Подгответе 1 литра 0.2% разтвор на хлор Б.

4. Направете заключение, основано на резултатите от работата.

Условия за завършване на задачата

1. Място (време) Изпълнение на задачите

Клас за биология

2. Максимално време за изпълнение на задачите: 90 min

Критерии за оценки за практическа работа:
Рейтинг "5" е зададен, ако :
1. Правилното самостоятелно определя целта на тези произведения; Извършва работа в пълно съответствие с необходимата последователност от поведение.
2. независимо, рационално избира и подготвя необходимото оборудване за извършване на работа; Провежда данни за работа по отношение на получаването на най-точни резултати.
3. компетентно, логично описва хода на работа, правилно формулира заключения; Именно и внимателно изпълнява всички записи, маси, рисунки, рисунки, графики, изчисления.
4. Излага организационни и трудови умения: подкрепя чистотата на работното място, реда на таблицата, икономично прекарва материалите; Спазване на правилата за безопасност при извършване на работа.
Оценка "4" е зададена, ако :
1. Извършва изцяло лабораторна операция в съответствие с изискванията за оценка на резултатите от "5", но позволява изчисления, измерванията на две са три липса на една или една грешка и едно дефекти.
2. при изпълнение на работата, тя позволява неточности в описанието на хода на действие; Прави непълни заключения при обобщаването.
Рейтинг "3" е зададен, ако :
1.1 Правилно извършва работа не по-малко от 50%, но обемът на завършената част е такъв, който ни позволява да постигнем истински резултати и да направим заключения по основните, основни важни задачи на работата.
2. Избира оборудване, материал, започва работа с помощта на учител; Или по време на измервания, изчисления, наблюдения, прави грешка, неточно формулира заключения, обобщения.
3. извършва работа в ирационални условия, което води до резултати с големи грешки; Или в доклада допускат общо не повече от две грешки (в номера, резултати от измерването, изчисления, изготвяне на графики, таблици, схеми и др.), Които нямат основна стойност за тази работа, но това повлиял на резултата.
4. Позволява брутната грешка по време на работа: в обяснение, в проектиране, в съответствие с правилата за безопасност, които ученикът поправя по искане на учителя.
Рейтинг "2" е зададен, ако :
1. не определя целта на самата работа, не може да подготви подходящото оборудване без помощта на учителя; Тя не работи напълно, а обемът на изпълнената част не позволява да се правят правилните заключения.
2. позволява две и по-груби грешки по време на работата, които не могат да бъдат коригирани по искане на учителя; Или произвежда измервания, изчисления, наблюдавани неправилно.

ПРИКАЧЕН ФАЙЛ.

Приложение 1.

Студент по мени

При извършване на работа ученикът трябва:

    Това е предварително подробно с теоретичния материал и да се разберат микробиологичните модели и процесите, които трябва да бъдат научени на практика.

    Извършването на експеримент, отговаря на всички предпазни мерки, поредица от операции, извършване на необходимите наблюдения.

    Запишете резултатите от опита в преносимия компютър съгласно предложената в работата схемата:

    След края на работата, поставете на работното място и го предайте с лаборатория и учител.

Предговор

В истински учебник представи лабораторна работа по микробиология за учениците педагогически университети От специалитети 1-02 04 01 Биология с допълнителни специалитети и 1-02 04 05-01 География. Биология.

Целта на лабораторния семинар е задълбочаването на теоретичните разпоредби на списъята на микробиологията и развитието на метода на микробиологичния експеримент. Наръчникът включва лабораторна работа по секциите на дисциплината: "Морфология и структурна функционална организация прокариотна", "физиология и метаболизъм на прокариотиката", "растеж и култивиране на прокариот", "систематика и класификация на прокариот", "екология на" prokaryotic ". В края на всяка работа се дават въпроси на осигуряването на теоретичен и експериментален материал. Тези произведения се изчисляват за 4 часа.

В всяка от предложените работи осигурява списък на материалите.

и оборудване, кратки теоретични обяснения, описание на работата, препоръки за проектиране на резултатите. Лабораторните работи съдържат референтен материал, който позволява на ученика да разбере по-добре съдържанието на лабораторната работа.

Работите се извършват споделяне (2 души). Изпълнението на работата се предхожда от запознаване с теоретични разпоредби и работа, формулирането на целта и целите на проучването. Използвайки ползата, учениците извличат резултатите от експеримента в съответствие с учебната карта на класовете. Работите предвиждат независима формулировка на заключенията с обосновката на получените резултати. Анализът на записите и асимилацията на изследвания материал се контролира от учителя на всяка професия.

Изисквания за съдържанието и проектирането на лабораторни упражнения

1. Лабораторната работа се изготвя в тетрадката от всеки ученик поотделно. Лабораторният лаптоп е подписан от студент преди извършване на първата лабораторна работа.

2. Всяка лабораторна работа трябва да съдържа следните структурни елементи:

1. Име на лабораторната работа.

2. целта на класовете.

3. Списък на основните материали и оборудване.

4. Резултати и дискусия: а) Име на задачата.

б) експерименталните материали, посочени в раздела, получени от лично студент в хода на лабораторната работа.

5. Заключения.

Лабораторната работа, декорирана в съответствие с тези изисквания, се подава в края на всяка класа на подписа на учителя.

{!LANG-61047080f658d342b7250e2536acf827!}

1. {!LANG-c64aa83f2c67beba07da802c97785982!}

2. {!LANG-7200c27514c4a192dcaaa04336420f8a!}

3. {!LANG-707522781343d7a9a6b7280c68023ee8!}

4. {!LANG-bfafa594afd5942841bb8d2335c2cdac!}

{!LANG-48543746e1ab164f32064ae8ef56014d!}

5. {!LANG-7806e7f1e3a174f4fff3ba0c50bf9d77!}

6. {!LANG-da5f930e1e3373d6543929285d411496!}

7. {!LANG-4dfeb3c3dffc307342658e8ece080c40!}

8. {!LANG-0af2dd8df2ea82eb5837bf4550e5e74f!}

9. {!LANG-e6c5b243c44761baf79d4dac3f1c2f6d!}

{!LANG-7260f2916547eb5a25827f4e96295ecd!}

{!LANG-7f826f0d90def5910f0a0cb1e9d57fda!}

11. {!LANG-ae7989d43ac9f985b833e5580c2c0bff!}

12. {!LANG-9832a81183bb1770958718d3eaa7bc81!}

13. {!LANG-c59deebd0d1bb3eef8d932fc5570729e!}

{!LANG-c15de4a131fc08960eed8c6b4adf96d9!}

{!LANG-cc680324df0f48a6566aabb1935b21f5!}

{!LANG-521415b8abe3667b5c23aa96301a4777!}

Материали и оборудване:{!LANG-1c80f9bbd845af772ace0456117a5f77!}

1. {!LANG-2c65bd7cc0b211c7a17d9162f6a0a5c8!}

2. {!LANG-279ed05a34bf573cf4765d5fa02068bd!}

3. {!LANG-4f9ae803ba8360ba8252a67541046afc!}

4. {!LANG-afde6c3bae7e3ce8dad77a334e206cc1!}

5. {!LANG-c4eb091c4078d38c4ed19fc7453a2783!}

{!LANG-17a5db5f56d73e25d9274389cb1fb4f3!}

{!LANG-d3f5209a74a12e5ee74deae9a94fe694!}

{!LANG-d25dc63416a48282a59abac5f433efea!} {!LANG-cda4c1570403384cb609b5bcba49b253!}{!LANG-98fb088a68fadada0493e0003c87f29b!} {!LANG-bdfe54e7786b4096d58c0b8a554f2748!}{!LANG-ef0777e60cb8a43a97c01b8d68b333c3!}

{!LANG-2675480a23b9843308c5d7b7a6cbfd55!}

{!LANG-47ce9d31a95ca6846a19ccadf51dbe27!}

{!LANG-aec6c946315d2e9cfd447382848407b8!}

{!LANG-b7d35da13ebe268c59df188d60d3efea!}

{!LANG-61d8fd4cf656c9179343987f3b196435!}

{!LANG-3c8da01237bc531e831c15984e3d53bf!} {!LANG-84698a78a58b70101a74dc709513ba86!}{!LANG-6c0a0b132d64df6a3324d3e3b690319e!}

{!LANG-2a2646fc71352f1ff0c5a92fd32aead5!}

{!LANG-77fb32b761a951f3a49dd538e33d05bc!}

{!LANG-9c3f9b55939d3a2cb559c558a78282ef!}

{!LANG-0630d3ef866e1d21284d0a007e888d18!}

{!LANG-680d78f114357d1c45b9e75b1a66f0b2!}

{!LANG-42265f4efb75c27c5e75792ff4e28b85!}

{!LANG-38cca94af6bfbba3d4ee243ac7e285e2!}

- {!LANG-d1bac07c7a26b49c32018a45c461cdfe!}{!LANG-052ded3acf9e8799ebb83d98f26b526e!}

{!LANG-3cfb02e64cbb1b38739c1df415b41056!}

{!LANG-4cb78896ed7f475a695457db4d1b89a2!}

{!LANG-429eec0b103d7fdb137aa9fdc8150f50!}

{!LANG-afbea8c889f8c63aac89e52eaa2a0237!}

{!LANG-4d21eadb1a06ff3730dbfc9242322071!}

{!LANG-a724222c04bcfe5aac52c166445d2976!}

{!LANG-01a306f9e879ad0d584fa289716d1c4a!}

{!LANG-01e8ad76ee663a218bdb76b529b566c4!}{!LANG-5a9b77d02656b225a3d51a2bd8f9689d!}
{!LANG-92a1dfeab284a3ad7a195982675d55d0!}
{!LANG-10e261d1d533f60a88b79b34189bdb7b!} 2013
{!LANG-f362d03b14cfd3437e443a6c2bff52b0!}{!LANG-f21b89612826d04c9222058c1d5272e5!}
{!LANG-47750bc3f5c8dc93aa2b9b8fe41c3815!}{!LANG-a1aabc8ba1ef694e8a1ca7295baec4f3!}
{!LANG-5411791b5ccdf00c8b75bb76420ad3a3!}{!LANG-df1ce3be9637df450147e387359911e4!}
{!LANG-13447b9099c86eccd2a965e44c3f49bf!}{!LANG-572f1fd6f671b2dd2f6b843426aa6e3a!}

{!LANG-01e8ad76ee663a218bdb76b529b566c4!}{!LANG-741d0e0a93eab069f281d9e25633fe0f!}
{!LANG-3dfa1eef1043d72573356ab20037b83a!}
{!LANG-10e261d1d533f60a88b79b34189bdb7b!} 2012
{!LANG-f362d03b14cfd3437e443a6c2bff52b0!}{!LANG-fadda206d5f572f75d606fcc714a001e!}
{!LANG-47750bc3f5c8dc93aa2b9b8fe41c3815!}{!LANG-9b21af08356b17044af352c8439dc8ad!}
{!LANG-5411791b5ccdf00c8b75bb76420ad3a3!}{!LANG-df1ce3be9637df450147e387359911e4!}
{!LANG-13447b9099c86eccd2a965e44c3f49bf!}{!LANG-b0fb939091c95d723034716ff4fe3ecc!}

{!LANG-01e8ad76ee663a218bdb76b529b566c4!}{!LANG-7eaf59e3e627669b457648ab03ea2e83!}
{!LANG-46eb54818c2686c2ef5dd92d4f3fc771!}
{!LANG-10e261d1d533f60a88b79b34189bdb7b!} 2012
{!LANG-f362d03b14cfd3437e443a6c2bff52b0!}{!LANG-ac4f31a1250f5ee0afc3d9a9e5df7b1c!}
{!LANG-47750bc3f5c8dc93aa2b9b8fe41c3815!}{!LANG-9b21af08356b17044af352c8439dc8ad!}
{!LANG-5411791b5ccdf00c8b75bb76420ad3a3!}{!LANG-df1ce3be9637df450147e387359911e4!}
{!LANG-13447b9099c86eccd2a965e44c3f49bf!}{!LANG-fdfe3e0c2629bbe817500181a047e090!}

{!LANG-01e8ad76ee663a218bdb76b529b566c4!}{!LANG-939ec3edd2ceaa06b2490e09f0e68047!}
{!LANG-68bce0afc058f70dd42db78c28e7143b!}
{!LANG-10e261d1d533f60a88b79b34189bdb7b!} 1995
{!LANG-f362d03b14cfd3437e443a6c2bff52b0!}{!LANG-6590f9dd2fc28584e2303f8c1af16075!}
{!LANG-47750bc3f5c8dc93aa2b9b8fe41c3815!}{!LANG-a1aabc8ba1ef694e8a1ca7295baec4f3!}
{!LANG-5411791b5ccdf00c8b75bb76420ad3a3!}{!LANG-df1ce3be9637df450147e387359911e4!}
{!LANG-13447b9099c86eccd2a965e44c3f49bf!}{!LANG-051357afff285bf56ae030397af21496!}

{!LANG-01e8ad76ee663a218bdb76b529b566c4!}{!LANG-4ec09b0b67c59ba6e5dcc2f9acfb8cb4!}
{!LANG-58ab1056ca8dbd59620ca61ac76cfa2f!}
{!LANG-10e261d1d533f60a88b79b34189bdb7b!} 1999
{!LANG-f362d03b14cfd3437e443a6c2bff52b0!}{!LANG-a9a7f602ac27a32cacf2a517b3985d64!}
{!LANG-47750bc3f5c8dc93aa2b9b8fe41c3815!}{!LANG-a1aabc8ba1ef694e8a1ca7295baec4f3!}
{!LANG-5411791b5ccdf00c8b75bb76420ad3a3!}{!LANG-df1ce3be9637df450147e387359911e4!}
{!LANG-13447b9099c86eccd2a965e44c3f49bf!}{!LANG-51ea7f46942efe13a90d8f74e1f33db6!}

{!LANG-01e8ad76ee663a218bdb76b529b566c4!}{!LANG-2910dc5a05b18f6d5f7b2b278b2a3067!}
{!LANG-3dfa1eef1043d72573356ab20037b83a!}
{!LANG-10e261d1d533f60a88b79b34189bdb7b!} 1999
{!LANG-f362d03b14cfd3437e443a6c2bff52b0!}{!LANG-0b940fb831bd5c22d54c9ab61081bf9c!}
{!LANG-47750bc3f5c8dc93aa2b9b8fe41c3815!}{!LANG-a1aabc8ba1ef694e8a1ca7295baec4f3!}
{!LANG-5411791b5ccdf00c8b75bb76420ad3a3!}{!LANG-df1ce3be9637df450147e387359911e4!}
{!LANG-13447b9099c86eccd2a965e44c3f49bf!}{!LANG-980c484be4dd6ec062d874c442d86f57!}

{!LANG-01e8ad76ee663a218bdb76b529b566c4!}{!LANG-3e7bc9fbd52cc369ba1d0e0a398e5fac!}
{!LANG-3dfa1eef1043d72573356ab20037b83a!}
{!LANG-10e261d1d533f60a88b79b34189bdb7b!} 2004
{!LANG-f362d03b14cfd3437e443a6c2bff52b0!}{!LANG-a9824c3afaeab67569c4884f5a2ecbcd!}
{!LANG-47750bc3f5c8dc93aa2b9b8fe41c3815!}{!LANG-a1aabc8ba1ef694e8a1ca7295baec4f3!}
{!LANG-5411791b5ccdf00c8b75bb76420ad3a3!}{!LANG-df1ce3be9637df450147e387359911e4!}
{!LANG-13447b9099c86eccd2a965e44c3f49bf!}{!LANG-fd451043f544c67879c0202d362b324e!}

{!LANG-01e8ad76ee663a218bdb76b529b566c4!}{!LANG-3d332215bb3f6d3dc88ca1a957a06fbe!}
{!LANG-2ab908eb96cfd844cc4182712178c72c!}
{!LANG-10e261d1d533f60a88b79b34189bdb7b!} 2007
{!LANG-f362d03b14cfd3437e443a6c2bff52b0!}{!LANG-e31bf4d6a5df0e1faacbed7dfc02663c!}
{!LANG-47750bc3f5c8dc93aa2b9b8fe41c3815!}{!LANG-a1aabc8ba1ef694e8a1ca7295baec4f3!}
{!LANG-5411791b5ccdf00c8b75bb76420ad3a3!}{!LANG-888e22e5658dcf097e86ce2e7936289a!}
{!LANG-13447b9099c86eccd2a965e44c3f49bf!}{!LANG-bf4357ff19c7f6fabd88f3d9c0ef0e3e!}

{!LANG-24f73aafbd45eea1e6d73a1eddd1e8f4!}

{!LANG-41879a6962e18b9c0182fe7c68585711!}

{!LANG-4ae37b0195b60311358359378594b82e!}

{!LANG-857d09aa2c14dbccc6c554f9cbf8eb83!}

{!LANG-4b65bbb647eda78215dbf7d4d9e2e9bf!}

{!LANG-4b864d718a20d7b7318c253802dbc057!}

{!LANG-84e0a4c7243b65303310b7f38d972e70!}

{!LANG-06f310bc68b65a5a646735d8fa716f8c!}

{!LANG-63cee352c44fcef146aa14f50ea97183!} {!LANG-25ab653787b693feb9e7905a6f14f390!}{!LANG-f4773d91421de4e8349cf681fbaa1672!} {!LANG-ff8c9a057f55e29b512a1d607f9d0216!}{!LANG-fe2e812df52b2095b9b8b5af236bec3a!}

{!LANG-641342059b45e6f5d6cdd007c9eb6382!}

{!LANG-df6e927a34b08216b169f5ea6f50f89e!}

{!LANG-f2743749ee2378920b2b52c05a121ae8!}{!LANG-726229ee1bd6dcf4f0be59c979e3b957!} , {!LANG-6530b344c35c7d42621c41a35a402450!} , {!LANG-43f3dee68a80fc105d0acf58f5e8b96a!}

{!LANG-316702c2a8eb21cca43db3c91775b204!} {!LANG-6e32039f14b6c52a4175dd5b175dd7e7!}

{!LANG-1871de6d70b6496a5d4a210ab73d8fa6!}

{!LANG-63a770b1c5313404632cb755490d0a56!}

{!LANG-e97b48c0cf3955df8e71148189a02c1a!}
{!LANG-c4cfc472ed535e445c7c2aa8a38e1b55!}

{!LANG-3c9ccfff379d164368c8eb1ff3f29e89!}

{!LANG-9d214544830fff97fe9ecab709f9d323!}

{!LANG-cc97cb97d88336ce73f3f09446a18a64!}

{!LANG-1eb2ea593a18e6bf3a56c6c1dddadfb1!}

{!LANG-ecc30102b67c606318103d5ab76b4976!}

{!LANG-67036a8d6c2bd877c665c9a7d6d40464!}

{!LANG-ab91b6ad165032a4872d6f445e3ab80f!}

{!LANG-fade8ec35ea39165dc681bea412830b1!}

{!LANG-72f55377039572608aedd77fd837d2ef!}

{!LANG-f3343d617ecb6be93465a2570749de84!}

{!LANG-cada9b459d3d03b286fc4b4bbec8e5dc!}

{!LANG-b6344d3cecb4ab5d00d49ab062fec0d6!}

{!LANG-fa13695ae00e4cdf6ff73d4ca2359e53!}{!LANG-d9aa58d93938e530a5fc13693507a256!}

{!LANG-5e2d84564f36638c58a68a589b4d2332!}

{!LANG-2870df4ef6ed4109f875508357d09911!}{!LANG-d56ad321a6ef112a85d7d071fe1803d3!}

{!LANG-6c8601b6e2a7923c97ebefed0b071adb!}

{!LANG-c3559ddd2a82785d86d6b797f9c8bf49!} {!LANG-4401b0dc71c05e924e264ca8b464b98c!}{!LANG-8eb9cd3a399071d7351cf3b6108ffd24!}

{!LANG-75207a2ae6598549fb2fb89f48050a89!}

{!LANG-5f03adfac8ebbe5bc811f569ab71438b!}

{!LANG-805335b262c82fe2db68f19c77f32de8!}

{!LANG-997cf8153f90b1c0524f18e1f8e1898b!}

{!LANG-f8114c2afb2a204488a855e7730bbb44!}

{!LANG-0255dd4ec85f4cbed3d7a4286d933aaf!} {!LANG-47ffbd68c994bd5548b36f8644905ea3!}{!LANG-d65860bbfb8e971a13c59a781d18d31d!}

{!LANG-ba750d10ed0100821427ec8848ff400c!}

{!LANG-c143703cef5f4d3d66a224f4169dc625!}

{!LANG-a157bdaa1c7ab25203d2ddf748753570!}

{!LANG-96f8852c90723fa11a35f81f1cbaebb1!}

{!LANG-ffd97915b6ec03aad976e4ecbb8ce7b3!}{!LANG-2fe8acf1e261f2bc4c711b2e4a2fb8b1!}

{!LANG-f81cbb5d9cca1ca013928ac4d0028d20!}

{!LANG-9497bd4043eec3f751bee871a98c160e!}{!LANG-627eb371c1b086167bd1a7d3e6b635ea!} {!LANG-b2ebe85958ecb2b652a32847e7a13bff!}{!LANG-09d4ed4baa25238e520f008614992b57!} {!LANG-7b53d927f093c33f0cc9bc7e8ac7b474!}{!LANG-34ceea5d9429fec57c8e666c900530e5!}{!LANG-dddfa8b748fe9a5d025d750e0a81d331!}

{!LANG-d86853e53e29f046142e7e3f0905314a!}{!LANG-3f33daad6bf5a258e8ead7627fa6a84b!}

{!LANG-38dd8abb3c6396179d0f639fd600a46b!}

{!LANG-04fa39ac52047d2384c8f5ad493424fb!} {!LANG-0ec7fd81b5d9e5a51191d2cab2c31bc5!}{!LANG-2e8725a32fe9453e32ae2d51bde380ed!}

{!LANG-04fa39ac52047d2384c8f5ad493424fb!} {!LANG-656329febbf1e52132b9c832e47a369f!}{!LANG-3c1ff0c56c85dacfe1c60fc552ebe6ef!}

{!LANG-19fa292e1ef53bd72a7aeb47006e5c56!}

{!LANG-b256c9b4da554341e9a51e97a9c22932!}

{!LANG-2409e6b3ab37b3ba73bb3f3bd945d33a!}

{!LANG-5da66a818148efdaa1a75bc806e930de!}

{!LANG-0159ee7590df9ed8ca0dca531fb562cb!}

1. {!LANG-5ea774f74b63e063b51fb1b059962db8!}{!LANG-9f123bc90a8d49a6ba86859b222c4bb1!} {!LANG-d3cb227051e1c18d39d9d133ddc0d554!} {!LANG-59baca3c0574bbc29a7ee9c2350558e5!}).

2. {!LANG-02c7c5f50857db30a8811d8ce5138ffc!}{!LANG-ed725189cb70579dd447b58e0551f6be!} {!LANG-36140924e48eadceec1c46442bc02a66!} {!LANG-63a907f6aadcf5804b4f1f584936214a!}).

3. {!LANG-c4d72d41ba5b63bafa1923457b68b7b1!}{!LANG-510167371f85a157b0d0364bf655605a!}

4.{!LANG-37359fe655a935e768ed48484286cb35!}{!LANG-e0d1064c5cc551abd0708ee8e69b101e!} {!LANG-3ea09b87eb4700378b59eb1ca1dd5f17!} {!LANG-70c26a0742743380d82030e90589885b!}).

5. {!LANG-1a2494dc3080515515950de590a94d5b!}{!LANG-5bc67676185d2b5fea0d1417940ed53c!} {!LANG-0ec59df9ef83433643cd57adf8a1c8af!} {!LANG-e78edaca716353e8fab0b2f6d119a68f!}{!LANG-6adc5fc22b1d487e17b4991399c607ab!}

{!LANG-b711cdd3bcb6ce69a2d3850c18447617!} {!LANG-55ba35159176dacf953aa15ee13bb7f1!} {!LANG-70c26a0742743380d82030e90589885b!}, {!LANG-ea34f4dc34abc23bd5f21442776ec374!}

{!LANG-0551ef468e059d05b18ec02c7b56a4f4!} {!LANG-1c568f2281016f6e9a08407d6f21523f!} {!LANG-6c2a3581d97566402ae7fc92809b5f9b!}, {!LANG-4e536c6e60e367622d763375dad7d919!}, {!LANG-a723c78e85aa0ce83dc5d3cf7946d48f!}{!LANG-3703a0db0d49e105dac1b93f123c67eb!} {!LANG-944dcf6380050cb37af3a3d33d88caca!}, Clostridium.{!LANG-4a262d7a07fc91822bf9491c999cc4ff!}

{!LANG-750e67fd02152506ae504d45d7622d0f!} {!LANG-6c2a3581d97566402ae7fc92809b5f9b!} {!LANG-9d8c57df0e4f6ca9f5658d1915e3aaab!} {!LANG-e0e00f7e78ac7fd3c1a24f032c3d1fbb!}

{!LANG-6851d6999453420437d3bf25032b6915!} {!LANG-516cddcb52bcfafee1834bd077584d7d!}{!LANG-8eefcd256d51352e9a043cb316173645!} {!LANG-7ab3973ac8c674a2d174d634a9284726!}{!LANG-a3acea23ce8236c7e11330fe634f2c7e!} {!LANG-944dcf6380050cb37af3a3d33d88caca!} {!LANG-06dacb8119d0e2fc923614901cf4bd77!}{!LANG-f03aecba882599f0879bc25c7b85f968!}

{!LANG-e622015201cff60091c6e6ce339fa251!}

{!LANG-5aac807c3eea8ec13f068c8bd0fead34!}

{!LANG-a3579fcbebf3cfdd036711cd04bdb59c!} {!LANG-937ad9dc7e33eb9a51ec7d1ea14413aa!}

{!LANG-47a218ed56cd097c1366046f62450272!}

{!LANG-54f3719d0b7bf5aae808a4e5928afafb!}

{!LANG-925b1e1c3672f4fac72aa58caffdbf30!}

{!LANG-0eb25bc3fcfff65dc842eeb6ab25faac!}

{!LANG-cd302d1747f1fcf5f89885bcf77eed73!}

{!LANG-a1a4ca026de06e9ed4c9c8ed71c44177!}

{!LANG-6256a53b654a1282c4bd2a36b265a4ea!}

{!LANG-544bdb41b4e92f55baa8509a0a74a731!}

{!LANG-f364e89184157391e363ad0829493d48!}

{!LANG-0d0d2809803bcd7ff6fcc1bcac5f5334!}

{!LANG-f9e1456b69e7a59b4eda86df778e2ebb!}

{!LANG-79a4461cbaceba27166158953c6a9d97!}

{!LANG-8d6f027fff03677dacd6299462a2f112!}

{!LANG-08ee493e18d6de457e629865f348a875!} {!LANG-b33dd761719273fc4eb66e1803aea324!} {!LANG-31c2053011b111bcdc3a646160c0c235!} {!LANG-cc6a8baf50b1781e7010b3233a77b96c!}

{!LANG-f9d80fd2af15730ab6d5dafb0ea2b54d!}{!LANG-0dc2def81e6a60494b55fbc0f715c4cc!}

{!LANG-00470925d5f4e0c60b77fa113b6a5f51!}

{!LANG-19fe8f6dc702c31ff272488ee2b819ac!}

{!LANG-92309f5ccbec060b042abdabff3e6852!} {!LANG-599dd8be8a9359ba2c5dad645aca80af!}{!LANG-c794fe320840f875be456d046bb348d9!} Bacillus subtilis.{!LANG-1544c9ecab53cb2cefe40a28c8dc8155!}

{!LANG-69a2ace5e36ba619ff52fbd1115e1035!}

1. {!LANG-057e016f90ef0bff14268c5e59cc7af3!}{!LANG-e2c0dd85149c04a13efd4043b940e4c0!}

{!LANG-a363c9a3e9ec6f17357383e373033361!} {!LANG-f7364368eb2bc5289e58309410bf8697!}{!LANG-f3c4838e093fe687612b51a3b7fbaa1a!}{!LANG-2eb2a68d2b77f066fd93cf6da8570910!}

2. {!LANG-9677f96c00a4f623ef1279477e81bde2!}{!LANG-ca0e9fdf1b0413b008bacb5fc47f6df0!}

3. {!LANG-5f750e74b5f87a28ca82ac7e5e3557df!}{!LANG-6add452126e51393ac4b064e2bf81636!}

4. {!LANG-889cf7a4ed26441cd3e3dddcaab66691!}({!LANG-86c9764bffaf8d7d3c26fb54030ec049!}{!LANG-d7fbf5e2ef4841022f6feecbfa67c4ec!}

{!LANG-d1f8f7fe0dd64962fafc2066d57e1916!}

{!LANG-8218c4e5b01ac68720595cab663618cd!} {!LANG-050395dbb26ce6a0f59afd214e26d5aa!}{!LANG-2b699a588367086e5b7b13639c5bad6e!} {!LANG-6de3d4f7136853ec2780befef555e721!} {!LANG-5a6641e941c279923d0ee5aad6cd13b7!} {!LANG-56fd04a42b593eeffa445d18e3d2884a!} {!LANG-c794fe320840f875be456d046bb348d9!} {!LANG-07c9afcc16e14f9a12cd7a73cdacf1b1!} . {!LANG-43af640c288e737ff1b414c04a2e0f94!} {!LANG-cb75cee87aae22f19e625509ad61c48b!}{!LANG-da44bb13ea2b89a3b0501d08108c6b14!} {!LANG-9dff44f50f1757330d10ce0b28e0fbb4!}{!LANG-e6bf9ca001347ecade632c534cd4e349!} {!LANG-f45561ed5a216190e2e59e0defb127ba!}{!LANG-38c814a19a47ff73e5fd2b6c9fac0ca0!}

{!LANG-967518f3cd246ebb210e08e6314a8edf!} {!LANG-7d249ef3a483aafc7d301006fc3da907!}{!LANG-2e37e4ca19674f3f6b4f21289e4ecbf2!} {!LANG-d69c92cae1fcba347044c2905815a968!}

{!LANG-0281efec51ca51dd62bbbe4378c22b23!} {!LANG-4d2693dcfa2aa860f83736bb1cf144ce!}{!LANG-6dee3a5010860ca9ff5819628681f5ac!}

{!LANG-498ab15a15aaae1e3a832fccfdd5a9d9!}{!LANG-99f9d46858d9cf4237f72eff10199413!}

{!LANG-d5ce42fe2a78bc0d051851a73d0ac93d!} {!LANG-944dcf6380050cb37af3a3d33d88caca!} {!LANG-06dacb8119d0e2fc923614901cf4bd77!}{!LANG-c794fe320840f875be456d046bb348d9!} {!LANG-944dcf6380050cb37af3a3d33d88caca!} {!LANG-18aff72ac993c8a0b150ff268f8376df!}{!LANG-9c501028c8bb8fa461de1d16e955060e!}

{!LANG-aecc126b9fac95b4eb83b6e759877c54!}

{!LANG-7ee1a0ed81cafce0548b35f770266d8f!}{!LANG-27770da2de2e6049e6c33c9923f20a2b!}

{!LANG-b2043789f7534eea8600a676cef3d18b!} {!LANG-944dcf6380050cb37af3a3d33d88caca!} {!LANG-18aff72ac993c8a0b150ff268f8376df!}{!LANG-c794fe320840f875be456d046bb348d9!} {!LANG-944dcf6380050cb37af3a3d33d88caca!} {!LANG-06dacb8119d0e2fc923614901cf4bd77!}{!LANG-c17782108c8261bf5f4d81e2f527e215!}

{!LANG-60f36ff2e02bf6a26ee31e248002142e!}1. {!LANG-2d7e57008173adf14a834be30c573576!}{!LANG-397565cab34556b29b132e54ddb946be!}{!LANG-d2c4ddb8f15818d5345fcfc6ccd5dcb7!}

2. {!LANG-7a5f7e81a12022ce06aad7ceb1334aa5!}{!LANG-179bed513881b9e80329523846e11c37!} 2. .1).

3. {!LANG-2f01741cd26f040dcaac1de04c44bbdd!}{!LANG-ee1189751ab825a54e8e93258d527a41!}

4. {!LANG-80c2f1a3a4327e596cfb6e0129648dcc!}{!LANG-bfee26d869ce2e5579892ee9e95ff384!}

5. {!LANG-52bc63b6d04023f81dc1631a25d09394!}{!LANG-6e6c925c3a495b017089f50903def6af!} {!LANG-c5c5ee7c001368ae497b312e2ca781fb!}{!LANG-5e6248b647b11d8ad53c636cd3a45002!}

{!LANG-f34462879d24ce666904d3a6f92de500!}

{!LANG-07d16ca6a9eaab6bcf845940de23ef11!}

{!LANG-0236de14e6d844622ee78471c6197990!}

{!LANG-6d8402b8483c427e13d0a94214d84e00!}{!LANG-b0808c8f7d6dc047ae824a1c04967b08!} {!LANG-4197fc53900b2a34ba4b4e4b7d8dd878!}{!LANG-04fa2a5bfab5a6b60d3565dbbaf2b7c3!}

{!LANG-10c5acdd70fa9f0cb1524051b2e3e943!}

{!LANG-406b7133e2453ebabba8b43700b9211c!} {!LANG-5da3f73f2ce9c0bab0e6cd790f412fbd!}{!LANG-2251ef20ae394e38bef95aa89092270a!} {!LANG-cdd8fc331d485613b5991ea46bdabf76!}{!LANG-fe176d3c9fc5bc0ddb66726898a174c4!}

{!LANG-d680d0d8695c42427c9c7beabaabc21a!} {!LANG-aa92b600ac8ac1f09fc695086ff6c947!}{!LANG-3f7cc451a825cf089fabaf9b469beec5!}

{!LANG-9df8dd271c9bc2330889e8058170ba9f!}

{!LANG-3b2acb661ef8b0b7ea64833a033b77d6!}{!LANG-b88c04ffd0ff5aff57ca5edda7ecbb9f!}

{!LANG-13e2a29361153871f52b887232bad3aa!}

{!LANG-fb24e101c6e66f5e33751ca830c46026!}

{!LANG-bd0fcf4810d08c5d731bf28fd84b2e16!} {!LANG-49780b992b7959d39229b72a76047f58!}

{!LANG-ca6092fe9e26fc47a306392d68b22c3b!}

{!LANG-d97b98685fbbf1e3f9c8a710d4451eb1!}

{!LANG-504676d3d861c12cb137965377069f0d!}

{!LANG-cfcfa718441ba18e40c8925fac94e8c3!}

{!LANG-a54bfa95538043c250499638c2807c4f!}

{!LANG-002ef1897bac195d360f2636eb0f2fc2!}

{!LANG-da7c62d2256a4b4a64314337f37c5c4e!}

{!LANG-6b928ef047be021c3ed71998610d101c!}

{!LANG-f0ae55d70327660652c0d90014bb6181!} {!LANG-78749c37658c33643e49f9a98245034c!}

{!LANG-efaf7a7f5b0076ba2fb3ee3733d020b9!}

{!LANG-a00408af9beca5f3d1864ed58fdd8cb5!}

{!LANG-0e9553774b2b8cede70e7b12a9f9c2db!}

{!LANG-fa5d51501550005e0df4c83c9860ba3b!} {!LANG-690d9034223d4035261b4f0812a0ef4a!}{!LANG-6887807afb422a3d38d3395c060adae6!}

{!LANG-553080027890963860cb1cd9f1378334!}

{!LANG-1be0dc399125c6bcb2ab3a793bea9349!}

{!LANG-4ac3a67d0415a1152f534f626b8c53c5!}

{!LANG-34eccc2c2790e4cb7565d771ab29ce99!}

{!LANG-e52e91933a5ce0094a38f7e58a008245!}

{!LANG-344f1761af8cd0b433d45fefb676c1d4!}

Материали и оборудване

{!LANG-e71ed8bcdd050552e4cfb1614dbf2991!}

{!LANG-25b6169097327c7eb5efdf0949afde93!}

{!LANG-ecaa4bc4c99acee457941950fd84f91a!}

{!LANG-15e9fee6cc53bf30d1ab7625f169d5b9!}

{!LANG-d42febdcf5bda977b659d918f7b6afec!} {!LANG-9b95da04a642c4ecd9d17bc5b7da1574!}{!LANG-d52d3fa1ee62e779b90e623122e64456!}

{!LANG-121a3f0321fb585fa6c058836226906d!}

{!LANG-f279e5d82ecc45a0ae7104125f7f5f9f!}